科研 多巴胺(DA)定量檢測試劑盒
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒采用競爭法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。在預(yù)包被抗多巴胺(DA)抗體(固相抗體)的微孔酶標(biāo)板中,加入多巴胺(DA)校準(zhǔn)品和待測樣本,再加入HRP標(biāo)記的多巴胺(DA)抗原(酶標(biāo)抗原),經(jīng)過溫育與充分洗滌,去除未結(jié)合的組分,在微孔板固相表面形成固相抗體-酶標(biāo)抗原的免疫復(fù)合物。加底物A和B,底物在HRP催化下,產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物,在終止液(2M 硫酸)作用下,最終轉(zhuǎn)化為黃色,在酶標(biāo)儀450nm波長上測定吸光度(OD值),吸光度(OD值)與待測樣品中多巴胺(DA)的濃度負(fù)相關(guān)。擬合校準(zhǔn)品曲線,可以計(jì)算出樣本中多巴胺(DA)的濃度。
試劑盒限制性
1、僅供科研使用,不得用于臨床診斷。
2、在試劑盒標(biāo)示的有效期內(nèi)使用,過期產(chǎn)品不得使用。
3、跟其他廠家的試劑盒或者組分不能混用。
4、使用試劑盒配套的樣品稀釋液。
5、如果樣本值高于最高標(biāo)準(zhǔn)品濃度值,請(qǐng)將樣本適當(dāng)稀釋后,再重新測定。
6、待測樣本中存在的人抗鼠等異嗜抗體會(huì)干擾檢測結(jié)果,檢測前,請(qǐng)排出該因素。
7、通過其他方法得到的檢測結(jié)果,與本試劑盒測定結(jié)果不具有直接的可比性。
技術(shù)提示
1、混合蛋白溶液時(shí),避免起泡。
2、加校準(zhǔn)品與樣本時(shí),每個(gè)校準(zhǔn)品濃度和樣本都要更換移液槍頭,公共組分應(yīng)該懸臂加樣,避免交叉污染。
3、合適的溫育時(shí)間,和充分的洗滌步驟,是保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的必要條件。
4、使用自動(dòng)洗板機(jī)時(shí),加入一個(gè)30秒浸泡的步驟,可以提高檢測精度。
5、底物溶液為無色液體,保存過程中變?yōu)樗{(lán)色,代表底物溶液已經(jīng)失效,不得使用。
6、終止液加樣順序與底物溶液加樣順序一致,加入終止液后,藍(lán)色底物產(chǎn)物,會(huì)瞬間變?yōu)辄S色。
7、實(shí)驗(yàn)中,用剩的板條,應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
8、所有液體組分,使用前充分搖勻,嚴(yán)格按照說明書標(biāo)明的時(shí)間、加樣量及加樣順序進(jìn)行溫育操作。