英文名稱 ： Creatine Content Assay Kit
產(chǎn)品包裝 ： 盒裝
產(chǎn)品規(guī)格 ： 50T/24S
儲(chǔ)存條件 ： -20℃
檢測(cè)方法 ： 可見分光光度法
有 效 期 ： 6個(gè)月
產(chǎn)品內(nèi)容：
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試劑名稱
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規(guī)格
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保存條件
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提取液一
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液體30mL×1瓶
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2-8℃保存
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提取液二
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液體5mL×1瓶
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2-8℃保存
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試劑一
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粉劑×2支
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-20℃保存
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試劑一稀釋液
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液體15 mL×1瓶
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-20℃保存
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試劑二
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液體15mL×1瓶
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-20℃保存
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標(biāo)準(zhǔn)品
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粉劑×1 支
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2-8℃保存
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產(chǎn)品說明：
肌酸(Creatine)是一種含氮化合物，自然存在于脊椎動(dòng)物體內(nèi)，能夠輔助為肌肉和神經(jīng)細(xì)胞提供能量。肌酸可由精氨酸(arginine)、甘氨酸(glycine)及甲硫氨酸(methionine)三種氨基酸合成，可由人體自行合成，也可以從食物中攝取。大約95%的肌酸存在于骨骼肌中，主要存在形式為磷酸肌酸。肌酸作為一種補(bǔ)充劑主要通過增加肌肉質(zhì)量，增強(qiáng)運(yùn)動(dòng)表現(xiàn)能力。
肌酸也被作為神經(jīng)肌肉疾病的一種治療藥被廣泛研究，它可能有助于保護(hù)神經(jīng)和改善細(xì)胞生物功能狀態(tài)。
肌酸酶偶聯(lián)肌氨酸氧化酶，可將肌酸轉(zhuǎn)化為甘氨酸、甲醛、過氧化氫，過氧化物酶催化過氧化氫氧化4-氨基安替比林偶聯(lián)酚，生成有色化合物，在505nm有特征吸收峰。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水、超聲破碎儀。
注意事項(xiàng)：
1、顯色完成后，請(qǐng)?jiān)?10 min 之內(nèi)完成檢測(cè)。
2、提取液中含有蛋白沉淀劑，提取的上清液不能用于蛋白濃度的測(cè)定。若想要用蛋白濃度計(jì)算肌酸含量需要另取樣本，即取相同質(zhì)量的組織、同等數(shù)目的細(xì)菌或細(xì)胞，用 1.1875mLPBS（生理鹽水）勻漿；取相同體積的血清（漿），用 1.206mLPBS（生理鹽水）勻漿（相當(dāng)于提取步驟最終樣本上清液），用 BCA 法進(jìn)行蛋白濃度測(cè)定。
3、如果測(cè)定吸光值低于或超過線性范圍吸光值，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測(cè)定。
4、試劑一、試劑二對(duì)人體有刺激性，請(qǐng)采取適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)措施。為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴乳膠手套操作
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：
1、取 0.1g 小鼠肌肉加入1mL 提取液一進(jìn)行勻漿研磨離心，取 0.8mL 上清后加 0.15mL 提取液二，離心取上清稀釋 2 倍后按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算 ΔA 測(cè)定=A 測(cè)定-A 對(duì)照=1.335-0.058=1.277，帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.0118x+0.0343，計(jì)算 x=105.3。按樣本質(zhì)量計(jì)算含量得：
肌酸含量（μg/g 質(zhì)量）=1.044×x÷W ×2（稀釋倍數(shù)）=2198.7 μg/g 質(zhì)量。
2、取100μL 牛血清加入 1mL 提取液一，離心取 0.8mL 上清后加 0.15mL 提取液二，離心取上清，之后按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算 ΔA 測(cè)定=A 測(cè)定-A 對(duì)照=0.596-0.069=0.527，帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線 y=0.0118x+0.0343，計(jì)算x=41.754。按照液體體積計(jì)算含量得：肌酸含量（μg/mL）=11.482×x= 479.4 μg/mL。
