英文名稱 ：Pyruvate(PA) Content Assay Kit
別 名 ：丙酮酸試劑盒PA Kit 丙酮酸(PA)試劑盒 丙酮酸(PA)測(cè)試盒
產(chǎn)品包裝 ：盒裝
產(chǎn)品規(guī)格 ：100T/96S
儲(chǔ)存條件 ：2-8℃
檢測(cè)方法 ：微量法
有 效 期 ：6個(gè)月
產(chǎn)品組成：
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試劑名稱
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規(guī)格
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保存條件
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提取液
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液體110 mL×1瓶
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2-8℃保存
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試劑一
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液體3 mL×1瓶
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2-8℃保存
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試劑二
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液體15mL×1瓶
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2-8℃保存
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標(biāo)準(zhǔn)品
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液體1 mL×1支
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2-8℃保存
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產(chǎn)品說(shuō)明：
丙酮酸通過(guò)乙酰 CoA 連接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代謝， 起著重要的樞紐作用。 丙酮酸與 2,4-二硝基苯肼作用， 生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙， 在堿性溶液中呈櫻紅色。
技術(shù)指標(biāo)：
最低檢出限：0.001μmol/mL
線性范圍：0.0015-0.25μmol/mL
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器/細(xì)胞超聲破碎 儀、冰和蒸餾水。
注意事項(xiàng)：
1. 如果測(cè)定吸光值超過(guò)線性范圍吸光值，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測(cè)定。
2. 提取液中含有蛋白變性成分， 若使用蛋白濃度計(jì)算需要另取組樣本提取測(cè)定。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：
1.稱取約0.1171g兔肝，加入1mL提取液，進(jìn)行冰浴勻漿，靜置30min ，8000g，常溫離心10min，取上清待測(cè)。之后按照測(cè)定步驟操作，用96孔板測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A空白管=0.544-0.085=0.459，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管 -A空白管=0.436-0.085 =0.351，計(jì)算丙酮酸含量得：
PA(μmol/g質(zhì)量) =0.125×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W =1.396μmol/g質(zhì)量
2. 稱取約0.1094g合歡，加入1mL提取液，進(jìn)行冰浴勻漿，靜置30min ，8000g，常溫離心10min，取上清用蒸餾水稀釋2倍后待測(cè)。之后按照測(cè)定步驟操作，用96孔板測(cè)得計(jì)算ΔA 測(cè)定=A 測(cè)定管-A 空白管=0.552- 0.085=0.467 ，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.436-0.085 =0.351，計(jì)算丙酮酸含量得：
PA(μmol/g質(zhì)量) =0.125×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W ×稀釋倍數(shù)=3.040 μmol/g 質(zhì)量
3. 取50μL兔血清之后按照測(cè)定步驟操作，用96孔板測(cè)得計(jì)算ΔA=A測(cè)定管-A空白管=0.125-0.085=0.040，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.436-0.085 =0.351，計(jì)算丙酮酸含量得：
PA(μmol/mL)=0.1375×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)=0.016μmol/mL
