英文名稱 ：Cysteinyl Sulfoxide Lyase(CSL)Activity Assay Kit
產(chǎn)品包裝 ：盒裝
產(chǎn)品規(guī)格 ：100T/48S
儲(chǔ)存條件 ：2-8℃
檢測(cè)方法 ：微量法
有 效 期 ：6個(gè)月
產(chǎn)品組成：
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試劑名稱
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規(guī)格
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保存條件
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提取液
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液體60mL×1瓶
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2-8℃保存
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試劑一
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液體1.5mL×1支
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2-8℃保存
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試劑二
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粉劑×1瓶
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2-8℃保存
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試劑三
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液體3mL×1瓶
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2-8℃保存
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試劑四
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液體3mL×1瓶
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2-8℃保存
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試劑五
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液體12mL×1瓶
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2-8℃保存
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標(biāo)準(zhǔn)品
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液體1mL×1支
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2-8℃保存
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產(chǎn)品說(shuō)明：
半胱氨酰亞砜裂解酶，簡(jiǎn)稱蒜酶，又名蒜氨酸酶。半胱氨酰亞砜裂解酶幾乎存在于所有蔥屬植物中，如大蒜，洋蔥，韭菜等。蒜氨酸酶存在于液泡內(nèi)，其天然底物蒜氨酸存在于細(xì)胞質(zhì)中；蒜氨酸酶與蒜氨酸接觸并催化產(chǎn)生蒜素和順、反式阿霍烯并生成丙酮酸和氨等副產(chǎn)物，也是大蒜等植物辛辣氣味的主要來(lái)源。
半胱酰胺亞砜裂解酶可以催化S-甲基-L-半胱氨酸亞砜生成丙酮酸。丙酮酸可與2,4-二硝基苯肼反應(yīng)生成2,4-二硝基苯腙，在堿性條件下顯棕紅色；測(cè)定505nm吸光度的變化，即可計(jì)算CSL酶活性。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)，如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、蒸餾水和冰。
注意事項(xiàng)：
1.如果測(cè)定結(jié)果?A測(cè)定＞1，可以對(duì)樣本用蒸餾水進(jìn)行稀釋或者縮短第一步反應(yīng)時(shí)間；吸光值較小，可以加大樣本量或者延長(zhǎng)第一步反應(yīng)時(shí)間至1h或者更長(zhǎng)時(shí)間。注意計(jì)算時(shí)同步修改計(jì)算公式。
2.對(duì)于初次測(cè)定樣本，建議將樣本勻漿液用蒸餾水進(jìn)行梯度稀釋后測(cè)定，選取佳的稀釋倍數(shù)。洋蔥、香菇、大蒜類(lèi)樣本建議直接稀釋4-10倍后再進(jìn)行佳稀釋倍數(shù)摸索。(實(shí)驗(yàn)室洋蔥進(jìn)行了8倍稀釋，蒜進(jìn)行了64倍稀釋）
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：
1、稱取0.1233g蒜樣本，加入提取液進(jìn)行冰浴勻漿，上清用蒸餾水稀釋64倍，按照測(cè)定步驟操作，用96孔板測(cè)
得計(jì)算?A測(cè)定=A測(cè)定-A對(duì)照=0.46-0.113=0.347，?A標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A標(biāo)準(zhǔn)空白=0.551-0.064=0.487，帶入公式計(jì)算：CSL活性(U/g質(zhì)量）=0.0208×?A測(cè)定÷?A標(biāo)準(zhǔn)÷W×F=7.693U/g質(zhì)量。
2、稱取0.1263g洋蔥樣本，加入提取液進(jìn)行冰浴勻漿，上清稀釋4倍，按照測(cè)定步驟操作，用96孔板測(cè)得計(jì)算
?A測(cè)定=A測(cè)定-A對(duì)照=0.477-0.382=0.095，?A標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A標(biāo)準(zhǔn)空白=0.551-0.056=0.487，帶入公式計(jì)算：CSL活性(U/g質(zhì)量）=0.0208×?A測(cè)定÷?A標(biāo)準(zhǔn)÷W×F=0.169U/g質(zhì)量。
