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成份 |
N+2 個(gè)樣品管 |
PCR 陰性對(duì)照 |
PCR陽(yáng)性對(duì)照 |
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PCR Magic Mix 3.0 |
各 20μL |
20μL |
20μL |
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麥類(lèi)殼多胞斑點(diǎn)病菌PCR 引物混合液 |
各2μL |
2μL |
2μL |
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N+2個(gè)樣品DNA模板 |
各18μL |
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PCR 陰性對(duì)照（水） |
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18μL |
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PCR 陽(yáng)性對(duì)照（麥類(lèi)殼多胞斑點(diǎn)病菌PCR陽(yáng)性對(duì)照1000倍稀釋液） |
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18μL |
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成份 |
N+2 個(gè)樣品管 |
PCR 陰性對(duì)照 |
PCR陽(yáng)性對(duì)照 |
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PCR Magic Mix 3.0 |
各 20μL |
20μL |
20μL |
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麥類(lèi)殼多胞斑點(diǎn)病菌PCR 引物混合液 |
各2μL |
2μL |
2μL |
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N+2個(gè)樣品DNA模板 |
各18μL |
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PCR 陰性對(duì)照（水） |
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18μL |
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PCR 陽(yáng)性對(duì)照（麥類(lèi)殼多胞斑點(diǎn)病菌PCR陽(yáng)性對(duì)照1000倍稀釋液） |
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18μL |
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過(guò)程 |
溫度 |
時(shí)間 |
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預(yù)變性 |
95℃ |
5 min |
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PCR 反應(yīng)35 個(gè)循環(huán) |
95℃ |
30 sec |
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55℃ |
30 sec |
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72℃ |
40 sec |
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最后延伸 |
72℃ |
7 min |
5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。
PCR 產(chǎn)物陽(yáng) 性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對(duì)照必須無(wú)任何擴(kuò)增，否則實(shí) 驗(yàn)無(wú)效。對(duì)沒(méi)有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。