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細(xì)胞簡介
小鼠胚胎干細(xì)胞分離自囊胚胚胎組織。胚胎干細(xì)胞(Em bryonic stem cell,ESC s,簡稱ES、E K 或E SC 細(xì)胞) 是早期胚胎(原腸胚期之前) 或原始性腺中分離出來的一類細(xì)胞,它具有體外培養(yǎng)無限增殖、自我更新和多向分化的特性。無論在體外還是體內(nèi)環(huán)境,ES細(xì)胞都能被誘導(dǎo)分化為機(jī)體幾乎所有的細(xì)胞類型。進(jìn)一步說,胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞) 是一種高度未分化細(xì)胞。它具有發(fā)育的全能性,能分化出成體動物的所有組織和器官,包括生殖細(xì)胞。
ES細(xì)胞具有與早期胚胎細(xì)胞相似的形態(tài)結(jié)構(gòu),細(xì)胞核大,有一個或幾個核仁,胞核中多為常染色質(zhì),胞質(zhì)胞漿少,結(jié)構(gòu)簡單。體外培養(yǎng)時,細(xì)胞排列緊密,呈集落狀生長。用堿性磷酸酶染色,ES細(xì)胞呈棕紅色,而周圍的成纖維細(xì)胞呈淡黃色。細(xì)胞克隆和周圍存在明顯界限,形成的克隆細(xì)胞彼此界限不清,細(xì)胞表面有折光較強的脂狀小滴。細(xì)胞克隆形態(tài)多樣,多數(shù)呈島狀或巢狀。
小鼠ES細(xì)胞的直徑7微米~18微米,豬、牛、羊ES細(xì)胞的顏色較深,直徑12微米~18微米。胚胎干細(xì)胞與普通細(xì)胞有顯著差別,有其特定的生長特性和特定的標(biāo)志,例如堿性磷酸酶活性非常高,帶有胚胎階段特異性表面抗原( Stage- specificem bryonic antigen s,SSE A ) ,人類胚胎干細(xì)胞還帶有高分子量的糖蛋白T R A 1-60、T R A -1-81等標(biāo)志,這些特性和標(biāo)志均可以用于對胚胎干細(xì)胞進(jìn)行鑒定,除此之外,胚胎干細(xì)胞還可以在體外永久傳代,并保持正常核型。
在體外培養(yǎng)體系中加入分化抑制劑如白血病抑制因子(Leukaemiainhibitory factor,LF) 或者在小鼠胚胎成纖維細(xì)胞飼養(yǎng)層(M EF) 上培養(yǎng)時,胚胎干細(xì)胞都能呈克隆性增殖,長期保持核型正常和穩(wěn)定,凍存解凍也不影響不分化的特性。另外,胚胎干細(xì)胞還表現(xiàn)岀高水平端粒酶活性,目前證明端粒酶與細(xì)胞衰老密切相關(guān),多數(shù)成熟細(xì)胞的端粒酶活性都很低。這些都是胚胎干細(xì)胞與成熟細(xì)胞不同的重要特點,也可能是其復(fù)制生命期限遠(yuǎn)比體細(xì)胞長的原因。
方法簡介
紀(jì)寧生物實驗室分離的小鼠胚胎干細(xì)胞采用分離囊胚組織,去除胚胎透明帶、使用特制專用培養(yǎng)基篩選培養(yǎng),胰酶消化傳代純化制備而來,細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。質(zhì)量檢測
紀(jì)寧生物實驗室分離的小鼠胚胎干細(xì)胞經(jīng)O ct-4免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。培養(yǎng)信息
包被條件 :明膠(0. 1%)細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細(xì)胞電子版照片使用方法
小鼠胚胎干細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞,細(xì)胞形態(tài)呈短梭形、多角形,在紀(jì)寧生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,細(xì)胞可傳3-5代左右。建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實驗。客戶收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作
1. 取出T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
小鼠胚胎干細(xì)胞
注意事項