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產(chǎn)品詳情

小鼠外周血淋巴細胞
基本信息
產(chǎn)品名稱 :小鼠外周血淋巴細胞
產(chǎn)品品牌 :紀寧生物
組織來源 :外周血
產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

細胞簡介  

小鼠外周血淋巴細胞分離自外周血。所謂的外周血,即除骨髓之外的血液,就是已經(jīng)被造血器官釋放入循環(huán)系統(tǒng)參與循環(huán)的血,它區(qū)別于造血器官內(nèi)的未成熟的血細胞或未被釋放入循環(huán)的血細胞。外周血淋巴細胞(Peripheral Blood Lymphocyte) 簡稱PBL,主要是血液循環(huán)中的淋巴細胞,由T細胞和B細胞組成,其中T細胞(占70%~80%) 和B細胞(占20%~30%) 。

方法簡介

紀寧生物實驗室分離的小鼠外周血淋巴細胞采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為1×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

紀寧生物實驗室分離的小鼠外周血淋巴細胞經(jīng)過檢測,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息

培 養(yǎng) 基 :含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :懸浮
細胞形態(tài) :圓形
傳代特性 :不增殖。不傳代
消 化 液 :0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 :氣相:空氣,95%。CO2,5%
小鼠外周血淋巴細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用紀寧生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片

使用方法

小鼠外周血淋巴細胞是一種懸浮細胞,細胞形態(tài)呈圓形,在紀寧生物技術(shù)部標準操作流程下,細胞不增殖。不傳代。建議您收到細胞后盡快進行相關(guān)實驗。

客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 懸浮細胞處理
1) 收集T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基至50ml離心管中,用PBS清洗細胞培養(yǎng)瓶1-2次,收集清洗液。
2) 1200-1500rpm離心3min,棄上清,收集細胞沉淀。
3) 加入5ml新鮮完全培養(yǎng)基,用吸管輕輕吹打混勻、分散細胞。將分散好的細胞調(diào)整合適密度接種至培養(yǎng)器皿中,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 若遇到懸浮細胞團塊較大,無法機械吹散時,向步驟2) 中細胞沉淀添加0.25%胰蛋白酶消化液2mL至離心管中,用吸-管輕輕吹打混勻,37℃溫浴2-3min,消化結(jié)束后,加入胰酶抑制劑(或血清) 終止消化,用吸管輕輕吹打,分散細胞。1200rpm離心5min,棄上清,收集細胞沉淀。
5) 加入5ml新鮮完全培養(yǎng)基,用吸管輕輕吹打混勻。按傳代比例進行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
6)待細胞狀態(tài)穩(wěn)定后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。 

小鼠外周血淋巴細胞
注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和紀寧生物技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們紀寧系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

特殊注意事項

5. 此細胞為懸浮細胞,請注意不要直接倒掉,造成損失。懸浮細胞因多數(shù)胞體較小,離心收集時,請注意懸液中細胞是否收集完全,可適當加大離心轉(zhuǎn)速200轉(zhuǎn)或增加離心時間3-5min,增加細胞獲取量。 

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