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產(chǎn)品詳情

大鼠外周血單個核細胞
基本信息
產(chǎn)品名稱 : 大鼠外周血單個核細胞
產(chǎn)品品牌 : 紀(jì)寧生物
組織來源 : 外周血
產(chǎn)品規(guī)格 : 5×10 5 cells/T25細胞培養(yǎng)瓶


細胞簡介  

大鼠外周血單個核細胞分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中首次提出外周血這一新概念。外周血單個核細胞(PBM C)即外周血中具有單個核的細胞,包括淋巴細胞和單核細胞。目前,主要的分離方法是密度梯度離心法,因為血液中各有形成分的比重存在差異,因此得以分離出不同的細胞。


方法簡介

紀(jì)寧生物實驗室分離的大鼠外周血單個核細胞采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為5×10 5 cells/瓶。


質(zhì)量檢測

紀(jì)寧生物實驗室分離的大鼠外周血單個核細胞經(jīng)過檢測,且不含有H IV -1、H BV 、HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

培 養(yǎng) 基 : 含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 : 每2-3天換液一次
生長特性 : 懸浮
細胞形態(tài) : 圓形
傳代特性 : 不增殖;不傳代
傳代比例 : 不傳代
消 化 液 : 0.25% 胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 : 氣相:空氣,95% ;CO2 ,5%
大鼠外周血單個核細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用紀(jì)寧生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


細胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片


使用方法

大鼠外周血單個核細胞是一種懸浮細胞,細胞形態(tài)呈圓形,在紀(jì)寧生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,細胞不增殖;不傳代;建議您收到細胞后盡快進行相關(guān)實驗。


客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

1.取出T 25細胞培養(yǎng)瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2.懸浮細胞處理
1)收集T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基至50m l離心管中,用PBS清洗細胞培養(yǎng)瓶1-2次,收集清洗液。
2)1200-1500rpm 離心3m in,棄上清,收集細胞沉淀。
3)加入5m l新鮮完全培養(yǎng)基,用吸管輕輕吹打混勻、分散細胞;將分散好的細胞調(diào)整合適
密度接種至培養(yǎng)器皿中,置于37℃、5% CO 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4)若遇到懸浮細胞團塊較大,無法機械吹散時,向步驟2)中細胞沉淀添加0.25% 胰蛋白酶消化液2m L至離心管中,用吸-管輕輕吹打混勻,37℃溫浴2-3m in,消化結(jié)束后,加入胰酶抑制劑(或血清)終止消化,用吸管輕輕吹打,分散細胞;1200rpm 離心5m in,棄上清,收集細胞沉淀。
5)加入5m l新鮮完全培養(yǎng)基,用吸管輕輕吹打混勻;按傳代比例進行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L,置于37℃、5% CO 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
6)待細胞狀態(tài)穩(wěn)定后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。


大鼠外周血單個核細胞

注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和紀(jì)寧生物技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們紀(jì)寧系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
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