產(chǎn)品詳情

Super/Tube犬腎細(xì)胞

基本信息

產(chǎn)品品牌 ： 紀(jì)寧生物

中文名稱 ： 犬腎細(xì)胞

細(xì)胞簡稱 ： SuperT ube

細(xì)胞別稱 ： M DCK sup ertube;SuperT ube

細(xì)胞形態(tài) ： 上皮細(xì)胞樣

生長特性 ： 貼壁細(xì)胞

培養(yǎng)環(huán)境 ：空氣，95% ；CO2，5% 37℃

凍存條件 ： 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% D M SO液氮

完全培養(yǎng)基 ： DM EM /F12(P M 150312)＋0.05m M N EAA＋10% F B S(164210-50)＋1%P /S(P B 180120)

傳代步驟  

1、吸出原培養(yǎng)液。

2、加入2ml左右PBS，輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄。

3、加入1ml左右0.25% 胰蛋白酶溶液（含ED TA ），輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細(xì)胞。

4、放入培養(yǎng)箱消化，顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時可終止，全程不要拍打培養(yǎng)瓶。

5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液。

6、收集細(xì)胞懸液離心，1200rpm /min 3分鐘，離心完吸出上清丟棄。

7、加入新鮮培養(yǎng)基，吹打幾下混勻細(xì)胞即可，按比例接種到新培養(yǎng)瓶，補足培養(yǎng)基，擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。

消化時間 ： 1~ 2分鐘

傳代比例（密度） ： 1:3-1:4

換液頻次 ： 2~ 3次/周

細(xì)胞背景描述

從表觀正常的成年雌性可卡犬中建立了細(xì)胞株M D C K，從中克隆建立了狗上皮樣細(xì)胞株SuperTube細(xì)胞。當(dāng)維持高細(xì)胞濃度時，SuperTube細(xì)胞形成大量的小管(據(jù)報道，24孔板的每孔鋪7×10^5細(xì)胞，3天內(nèi)就能形成小管)。要形成小管，SuperTube細(xì)胞需要每天兩次換液以提供足夠養(yǎng)分。與原始細(xì)胞株相比，SuperTube細(xì)胞的c-AM P的檢測水平低得多，在毛喉素刺激下讀出的腺苷環(huán)化酶水平也低；SuperT ube細(xì)胞的跨上皮抗性也比SuperD om e和M DCK都低。

供體年齡 ： 雌；成年

組織來源 ： 正常腎

細(xì)胞類型 ： 自發(fā)永生化細(xì)胞

生物安全等級 ： 1

細(xì)胞保藏中心 ： ATCC；C R L-2285

Super/Tube犬腎細(xì)胞

收到常溫細(xì)胞后如何處理保存

細(xì)胞培養(yǎng)詳細(xì)操作步驟請參照紀(jì)寧生物細(xì)胞培養(yǎng)操作指南

1. 收到常溫細(xì)胞后，及時拍照記錄有無漏液/瓶身破損現(xiàn)象。

2. 用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。

4. 靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片 將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。

5. 若觀察到異?；蛘邔?xì)胞有疑問，請及時跟我們聯(lián)系；對于細(xì)胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)。可跟我們的技術(shù)支持交流。