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兔滑膜細(xì)胞

品牌:紀(jì)寧生物

貨號(hào):JN25023

規(guī)格: 5×10?Cells

聯(lián)系方式:021-54721350

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產(chǎn)品詳情

兔滑膜細(xì)胞

基本信息

產(chǎn)品名稱(chēng) : 兔滑膜細(xì)胞

產(chǎn)品品牌 : 紀(jì)寧生物

組織來(lái)源 : 滑膜組織

產(chǎn)品規(guī)格 : 5×105cells/T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶


細(xì)胞簡(jiǎn)介

兔滑膜細(xì)胞分離自滑膜組織?;そM織是位于關(guān)節(jié)腔內(nèi)面的內(nèi)襯結(jié)構(gòu),各種關(guān)節(jié)內(nèi)疾病均會(huì)累及滑膜。而滑膜細(xì)胞是維持關(guān)節(jié)正常功能的重要組織結(jié)構(gòu),同時(shí)在各種關(guān)節(jié)疾患中也是主要病變部位。骨關(guān)節(jié)炎(O A ) 以關(guān)節(jié)軟骨退行性變?yōu)樘卣?,其病理改變累及關(guān)節(jié)的各個(gè)組成部分,但絕不僅局限于軟骨,還包括軟骨下骨、滑膜、半月板和韌帶。


各組成部分的病理改變相互影響,相互作用,共同加速關(guān)節(jié)的退變。滑膜細(xì)胞是構(gòu)成滑膜層的最大細(xì)胞群體,是維持關(guān)節(jié)正常功能的重要組織結(jié)構(gòu),它包埋在顆粒狀無(wú)定性的基質(zhì)中,基質(zhì)內(nèi)有分散的纖維分布?;び葾 型(巨噬樣滑膜細(xì)胞) 、B 型(成纖維樣滑膜細(xì)胞) 以及C 型(樹(shù)突細(xì)胞樣滑膜細(xì)胞) 細(xì)胞組成。


滑膜細(xì)胞主要功能

① 滑膜細(xì)胞產(chǎn)生潤(rùn)滑液成分,并且與關(guān)節(jié)腔的吸收和血液/潤(rùn)滑液交換有關(guān)。

② 滑膜細(xì)胞增生,表現(xiàn)為不依賴于支持物生長(zhǎng),并且分泌大量的效應(yīng)分子來(lái)促進(jìn)炎癥和關(guān)節(jié)損壞。

③ 是自身自分泌和旁分泌網(wǎng)絡(luò)中效應(yīng)因子的一部分。


方法簡(jiǎn)介

紀(jì)寧生物實(shí)驗(yàn)室分離的兔滑膜細(xì)胞采用混合酶消化法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10 5cells/瓶。


質(zhì)量檢測(cè)

紀(jì)寧生物實(shí)驗(yàn)室分離的兔滑膜細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

培 養(yǎng)  基 : 含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptom ycin等

換液頻率 : 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 : 貼壁

細(xì)胞形態(tài) : 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 : 可傳5代左右。3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

傳代比例 : 1:2

消 化  液 : 0. 25% 胰蛋白酶

培養(yǎng)條件 : 氣相 :空氣,95% 。C O2,5%

兔滑膜細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用紀(jì)寧生物配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片


使用方法

兔滑膜細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞,細(xì)胞形態(tài)呈成纖維細(xì)胞樣,在紀(jì)寧生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,細(xì)胞可傳5代左右。3代以內(nèi)狀態(tài)最佳。建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。


客戶收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作

1. 取出T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 貼壁細(xì)胞消化

1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次。

2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化。

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

3. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時(shí),需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒(méi)貼好影響實(shí)驗(yàn)。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0. 1m g/m l),明膠(0. 1% ),依據(jù)細(xì)胞種類(lèi)而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無(wú)需包被。


兔滑膜細(xì)胞
注意事項(xiàng)

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和紀(jì)寧生物技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問(wèn)題得到解決。

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