9026-93-1 / 腺苷脫氨酶(ADA)的檢測(cè)及臨床應(yīng)用

腺苷脫氨酶(Adenosine deaminase，ADA)是一種與機(jī)體細(xì)胞免疫系統(tǒng)有重要聯(lián)系的核酸代謝酶類。近年來(lái)在一些疾病的早期診斷和治療監(jiān)測(cè)以及免疫功能障礙的發(fā)病機(jī)理研究中受到重視。國(guó)內(nèi)外研究表明，ADA對(duì)診斷結(jié)核性胸腹水、腦脊液等的特異性和敏感性明顯優(yōu)于活檢和結(jié)菌學(xué)方法。尤其在良、惡性難辯的滲出液鑒別診斷上有重要價(jià)值?，F(xiàn)將有關(guān)資料作一綜述。

性質(zhì)和作用

ADA是嘌呤核苷分解代謝過(guò)程中起關(guān)鍵作用的酶，它能催化腺嘌呤核苷降解為次黃嘌呤核苷，而后經(jīng)核苷磷酸化酶催化成次黃嘌呤，最終氧化成代謝產(chǎn)物尿酸。ADA屬于一種巰基酶，每一分子含兩個(gè)活性巰基，其活性能被對(duì)氯汞苯甲酸完全抑制。ADA基因位于第20對(duì)染色體上，并呈現(xiàn)遺傳多態(tài)性現(xiàn)象。ADA常見(jiàn)有3種表現(xiàn)型(ADA1、ADA2、ADA3)，廣泛分布全身各組織中，在動(dòng)物體內(nèi)主要分布在盲腸、小腸黏膜和脾。血液中的ADA主要存在于血細(xì)胞中(如紅細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和粒細(xì)胞)，其活性約為血清中的40～70倍。

ADA在臨床診斷上的應(yīng)用

1．結(jié)核病診斷

鑒別結(jié)核性和非結(jié)核性胸、腹水及腦脊液是臨床病因?qū)W診斷的一個(gè)常見(jiàn)難題。雖然近年來(lái)有結(jié)核抗體、PCR測(cè)定等新技術(shù)，但由于假陽(yáng)性及價(jià)格等因素，普及應(yīng)用仍受限制。據(jù)報(bào)道，即使多方檢測(cè)，仍有20％左右的積液不能明確病因。因此應(yīng)用ADA檢測(cè)，對(duì)不明原因積液診斷又增添了一項(xiàng)診斷指標(biāo)。

結(jié)核菌感染人體雖然能產(chǎn)生抗體，但無(wú)保護(hù)作用，其抗感染免疫主要靠細(xì)胞免疫。細(xì)胞免疫作用是結(jié)核菌激活T淋巴細(xì)胞使其產(chǎn)生增殖，隨之引起巨噬細(xì)胞的活化，活化的巨噬細(xì)胞內(nèi)溶酶體酶大量增多，增強(qiáng)對(duì)細(xì)胞內(nèi)結(jié)核菌的殺傷作用。

早在1978年P(guān)iras報(bào)道ADA在結(jié)核性胸水時(shí)P/S>I.0，癌性胸水<1.0(P/S表示液/血比值)，其機(jī)理為：由于各種物質(zhì)的生成、存儲(chǔ)、代謝以及化學(xué)特性、生物學(xué)活性、相對(duì)分子質(zhì)量等各不相同，加之細(xì)胞血管、漿膜的屏障作用在各種因素下的通透性改變，造成了檢測(cè)物質(zhì)在胸水中與血清中濃度上的差異與規(guī)律性比例，為診斷提供有價(jià)值依據(jù)。在胸腹水檢測(cè)中，結(jié)核性胸腹水ADA活性顯著增高，癌性胸腹水不增高，而血清ADA活性無(wú)顯著差異。

2．腫瘤診斷

利用檢測(cè)T淋巴細(xì)胞ADA活性，能夠作為表面標(biāo)志物輔助淋巴細(xì)胞白血病和淋巴瘤的診斷和分型。有關(guān)資料證實(shí)，急性淋巴細(xì)胞性白血病的T淋巴細(xì)胞活性增強(qiáng)，而慢性淋巴細(xì)胞性白血病和何杰金氏淋巴瘤患者外周血T淋巴細(xì)胞ADA無(wú)明顯變化。

3．艾滋病(AIDS)的診斷

1987年Delia提出，在檢測(cè)無(wú)癥狀A(yù)IDS高危人群時(shí)，ADA活性測(cè)定與檢測(cè)AIDS相關(guān)逆轉(zhuǎn)錄病毒抗體可協(xié)同作為AIDS的診斷標(biāo)志。獲得性免疫綜合征，無(wú)特征淋巴細(xì)胞中ADA和PNP均比健康對(duì)照組有顯著性增高，在半數(shù)無(wú)癥狀A(yù)IDS高危個(gè)體的RBC中ADA活性顯著增高加。

4．重癥聯(lián)合免疫缺陷病(SCID)的產(chǎn)前診斷

ADA缺乏與SCID有關(guān)，至今發(fā)現(xiàn)約有1/4~1/2的SCID是因先天缺乏ADA造成的，并且也證實(shí)ADA屬常染色體隱性遺傳。臨床測(cè)定胎兒羊水中纖維母細(xì)胞ADA活性能有效地對(duì)ADASCID患者進(jìn)行產(chǎn)前診斷。

5．其他疾病的診斷

除對(duì)上述疾病的鑒別診斷外，在另一些能刺激細(xì)胞免疫系統(tǒng)的疾病(如傷寒、傳染性單核細(xì)胞增多癥、布魯氏菌病、風(fēng)濕熱、溶血性貧血)的血清中，ADA也出現(xiàn)增高現(xiàn)象。此外，ADA鑒別膽汁淤積原因和診斷急慢性肝炎、肝硬化等有一定的價(jià)值。在反映急性肝病殘存病變或慢性肝損害程度方面，如結(jié)核患者服用抗癆藥物最常見(jiàn)引起肝損害，ADA較ALT敏感，并且可作為非甲非乙型肝炎的標(biāo)記。

在臨床方面的應(yīng)用

利用相同血型紅細(xì)胞懸液，經(jīng)處理破壞其中的淋巴細(xì)胞后輸注給SCID患兒，可使缺少ADA患兒的T、B細(xì)胞功能恢復(fù)，起到緩解癥狀作用。ADA是淋巴細(xì)胞生長(zhǎng)和功能的依賴性酶，利用ADA抑制劑(如去氧助間型霉素)選擇性地抑制ADA活性，能夠有效控制T淋巴細(xì)胞DNA的合成，治療急性淋巴細(xì)胞性白血病，有效率達(dá)57％。自身骨髓移植法也是一種用于緩解急淋癥狀的治療手段。

檢測(cè)方法

檢測(cè)血清、體液、紅細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的ADA活性。通常利用ADA的作用底物——腺苷的分解速度，次黃苷或氨等產(chǎn)物的生成量，以及終產(chǎn)物——尿酸生成量的改變進(jìn)行ADA活性測(cè)定。

小結(jié)

腺苷脫氨酶(ADA)廣泛分布于體內(nèi)各組織，主要與細(xì)胞免疫功能有關(guān)的核酸代謝酶類。檢測(cè)ADA活性方法較多，其中以分光光度法和氨試劑法較為簡(jiǎn)單實(shí)用，一般普通醫(yī)院易于開(kāi)展。ADA活性檢測(cè)可用于SCID產(chǎn)前診斷、白血病的分型和艾滋病的普查，檢測(cè)胸水、腹水、腦脊液中ADA活性對(duì)結(jié)核性積液病因?qū)W診斷有重要價(jià)值，國(guó)內(nèi)外研究表明，ADA對(duì)診斷結(jié)核性滲出液的特異性和敏感性明顯優(yōu)于活檢和細(xì)菌學(xué)方法，值得推廣。