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吐溫20 ( Tween 20) ,又稱聚山梨酯20 ( polysorbate20) ,是一種非離子表面活性劑,具有較強的親水性和化學(xué)上的不解離性,對藥物有較好的助溶作用,在藥物制劑中常添加其以增加有效成分的溶解度;另一方面,吐溫20 能抑制大分子蛋白藥物的自動聚合,提高藥物的穩(wěn)定性。作為一種新型的非離子表面活性劑,聚山梨酯20具有穩(wěn)定性高,不易受強電解質(zhì)、酸、堿的影響,與其他類型表面活性劑能混合使用,相容性好的特點,在各種溶劑中均有良好的溶解性。因此,聚山梨酯20的消耗量也日趨增大。在使用過程中,含有聚山梨酯20的廢水不可避免地進入了水體、土壤等環(huán)境。非離子表面活性劑對魚類和水生生物會產(chǎn)生毒性,影響其他共存有機物在環(huán)境中的遷移和降解,它們在土壤/沉積物上的吸附可限制其在土壤等有機污染增效修復(fù)方面的應(yīng)用。并且是隨著近年來藥理學(xué)研究的深入,人們認(rèn)識到聚山梨酯類表面活性劑具有一定生物和藥理活性,它能夠誘導(dǎo)細胞產(chǎn)生脫顆粒作用,引起過敏活性物質(zhì)釋放,其本身的不飽和脂肪酸也十分容易氧化降解而產(chǎn)生多種有毒成分,與藥物臨床上出現(xiàn)的呼吸困難、惡心、嘔吐、皮疹等不良反應(yīng)相關(guān)。
吐溫20可用作化妝品的乳化劑,橡膠乳液的潤濕劑,染料的溶劑,醫(yī)藥品和照相乳液的乳化劑,泡沫塑料穩(wěn)定劑等。如有實驗利用吐溫輔助水劑法提取花生油脂,將同時得到富含花生蛋白的水提液作為研究對象,以蛋白純度、殘油量、蛋白質(zhì)回收率和吐溫20含量為指標(biāo),優(yōu)化花生蛋白粉的回收工藝,旨在獲得純度較高的花生蛋白粉。比較了堿鹽皂化、萃取和高速離心3種水提液脫脂處理方法,分別采用酸沉和膜分離回收花生蛋白。pH<4.0 時,隨著pH 的升高,蛋白質(zhì)回收率顯著提高;pH 為4.5 時蛋白質(zhì)回收率達到最大,為93.17%;pH>5.0 時,蛋白質(zhì)回收率顯著降低,最終確定酸沉最佳pH為4.5。隨著蛋白沉淀水洗次數(shù)的增加,蛋白質(zhì)回收率下降,但蛋白純度顯著上升,最終確定水洗蛋白沉淀2次。堿鹽皂化、萃取和高速離心3 種方法均可降低水提液油脂含量,而采用堿鹽皂化法處理水提液結(jié)合酸沉工藝,得到的花生蛋白粉純度最高為81.28%,殘油量5.18%,吐溫20 含量11.11%,蛋白質(zhì)回收率84.68%。采用5 kDa 超濾膜處理水提液制得花生蛋白粉純度77.35%,殘油量6.14%,吐溫20 含量6.36%,蛋白回收率97.45%。
分光光度法分析非離子表面活性劑聚山梨酯20的方法,通過下述技術(shù)方案實現(xiàn):
1)顯色反應(yīng):由于聚山梨酯20的水溶液顏色很淺,需要選用適當(dāng)?shù)脑噭┡c其反應(yīng)生成有色化合物再進行測定。碘作為一種電子受體能與聚山梨酯20分子中氧原子作用形成黃色絡(luò)合物。準(zhǔn)確稱取1gl2和2gKl,加蒸餾水溶解,定容至100mL。用Kl-l2的混合液做為顯色劑。配好的顯色劑應(yīng)避光低溫保存。
2)顯色條件:溶液最佳pH值范圍為4~8,顯色劑用量為0.25mL,顯色時間20min,最佳吸收波長486nm,參比溶液為蒸餾水。
3)標(biāo)準(zhǔn)曲線:制作標(biāo)準(zhǔn)曲線的目的是建立方法的測量信號與待測物聚山梨酯20濃度之間的定量關(guān)系。準(zhǔn)確配制不同濃度的聚山梨酯20標(biāo)準(zhǔn)溶液。在試管中分別加入10mL已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液,再加入0.25mL的顯色劑,搖勻,靜置反應(yīng)20min。用分光光度計在486nm處,使用1cm比色皿,以蒸餾水為參比測定各不同濃度聚山梨酯20及顯色劑空白的吸光值,兩者之差為不同濃度下溶液相對于試劑空白的吸光值。以濃度對吸光值作圖得到標(biāo)準(zhǔn)曲線。
4)聚山梨酯20含量的測定:在試管中加入10mL未知濃度的聚山梨酯20溶液,加入0.25mL的顯色劑之后搖勻,靜置反應(yīng)20min。用分光光度計在486nm處,使用1cm比色皿,記錄未知濃度聚山梨酯20的吸光值,將吸光值代入步驟(3)所建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程,即可求出聚山梨酯20的含量。
[1] RP-HPLC-ELSD 法測定康柏西普眼用注射液中輔料吐溫20 的含量
[2] CN201010181032.8一種聚山梨酯非離子型表面活性劑的測定方法
[3] 日用化工原料手冊
[4] 吐溫輔助水劑法提取花生油過程中蛋白質(zhì)的回收研究