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催化過氧化氫分解而使其他氫供體氧化并生成水的一類酶。有不同的同工酶，有的底物專一性較強，有的無專一性。輔助因子也可不同，如谷胱甘肽過氧化物酶含硒；NAD+過氧化物酶含FAD；細胞色素c過氧化物酶含血紅素等。
過氧化物酶廣泛分布于各種植物組織中，在動物組織中較少見。動物的肝、腎中只有微弱的活性，在牛乳中已分離出過氧化物酶，在白細胞中含有髓性過氧化物酶，這就是膿具有過氧化物酶活性的原因。紅細胞也含過氧化物酶，極少量的血，在過氧化物存在時，就能使聯苯胺或愈創(chuàng)樹脂氧化成有色物質，這就是檢查糞、尿“隱血”的原理。
CN201510367541.2提供一種可以用于工業(yè)化生產高回收率和純化倍數可用于食品工業(yè)的乳過氧化物酶提取方法。本發(fā)明的目的是通過以下技術方案實現的：以牛乳清為原料，以硫酸銨鹽析法為提取手段，確定硫酸銨鹽析法中最佳鹽析條件下飽和度、鹽析時間、最佳轉速、體系pH的工藝條件，并比較了硫酸 銨鹽分級沉淀與直接一次用65％硫酸銨飽和度對LP酶活回收率和純化倍數的影 響。采用超濾技術進行進一步純化，最后透析脫鹽和冷凍干燥制得成品，即原料乳清→硫酸銨鹽析法分級沉淀提取乳過氧化酶→沉淀溶解→溶液使用超濾分 離→收集截留溶液→透析脫鹽→冷凍干燥→乳過氧化物酶粗產品。具體的，本發(fā)明的一種采用超濾法輔助硫酸銨鹽析提取乳過氧化物酶的方 法，包含以下步驟：
(1)硫酸銨鹽析法分級提取乳過氧化物酶：
除去新鮮的牛乳中的脂肪和酪蛋白后得到乳清，在室溫條件下，向乳清中 添加25-85％飽和度的硫酸銨，離心，去除沉淀，置于攪拌器上不斷攪拌使硫酸 銨充分溶解，調節(jié)體系pH到5.5-8.5，放置2-10h使乳過氧化物酶完全沉淀， 4℃5000-10000r/min離心20min到沉淀即為乳過氧化物酶制品；
(2)超濾：
將步驟(1)中得到的沉淀使用適量去離子水復溶用超濾膜進行超濾分離， 以除去雜蛋白，收集截留溶液；
(3)脫鹽處理：
將步驟(2)收集的截留溶液裝入透析袋內進行脫鹽；
(4)干燥：
將步驟(3)脫鹽溶液冷凍干燥即制得乳過氧化物酶粗制品。
采用本發(fā)明提取的乳過氧化物酶粗產品為淡黃色粉狀物，乳過氧化物酶的 酶活回收率和純化倍數分別達到79.25-85.21％和4.08-4.58倍。通過上述提取工藝可以直接獲得回收率較高的乳過氧化物酶，可以直接制 得天然的抗菌介質乳過氧化物酶制品，也可以將其制品作為天然防腐劑直接加 入到食品中。
通過上述提取方法可以直接獲得回收率較高的乳過氧化物酶，可以直接制 得天然的抗菌介質乳過氧化物酶制品，也可以將其制品作為天然防腐劑直接加 入到食品和牙膏等日用品中。
二、辣根過氧化物酶（Horseradish Peroxidase, HRP, E.C.1.11.1.7）是由酶蛋白和鐵卟啉結合而成的一種糖蛋白，該酶由多個同功酶組成，分子量為40kDa，等電點為pH3.0?9.0。HRP的輔基和酶蛋白最大吸收光譜分別在403nm和275nm，所以人們通常采用RZ值（即OD403nm /OD275nm的比值）來表示該酶的純度， RZ值越大，純度越高。
HRP是最重要的醫(yī)療診斷用酶之一（J. Chromat. B 2004,803:237?241），該酶不但用于多個生化檢測項目，還廣泛運用于免疫類試劑盒。除此之外，HRP還可用于工業(yè)廢水的脫色（Chem. Technol. Biotechnol. 2009,84:126–132），過氧化物的去除以及含酚污水的處理（Biotechnol. Bioprocess Eng. 2006,11:462–465）等。
在自然界中，辣根是HRP含量最高的植物，因此也成為生產HRP最具吸引力的原料。目前，從辣根中分離提取HRP的主要方法有：雙水相萃取技術（Appl. Biochem. Biotechnol. 1995, 53:147?154）、反膠束萃取技術（Enzyme Microb. Technol. 1996,18:332?339）、電泳技術（J. Biol. Chem. 1966,241:2166?2172）及層析技術（J. Membr. Sci. 2003,211:101?111）等。然而這些技術均存在一定的缺陷，其中，雙水相萃取技術和反膠束萃取技術獲得的產品純度較低，且容易引起HRP的失活和變性；電泳技術和層析技術的成本昂貴，且難于工業(yè)放大。
CN201210112799.4提供一種操作簡單、易于放大、產品純度高的辣根過氧化物酶的超濾提取方法。本發(fā)明的技術方主要包括以下步驟：
（1）將辣根破碎、浸提、離心得到辣根過氧化物酶粗提液；
（2）將辣根過氧化物酶粗提液用截留分子量為70kDa?100kDa的超濾膜進行超濾分離，得到辣根過氧化物酶超濾液；
（3）將辣根過氧化物酶超濾液用截留分子量為1?30kDa的超濾膜進行超濾濃縮，得到辣根過氧化物酶濃縮液；
（4）將辣根過氧化物酶濃縮液脫水得到辣根過氧化物酶。
一種豬肉中過氧化物酶的快速定量檢測方法，其特征在于，所述的檢測方法包括以下步驟：
(1)配制一系列以辣根過氧化物酶為標準酶的標準酶溶液；
(2)以過氧化脲為反應底物，以3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺為顯色劑，以磷酸 二氫鈉緩沖液為緩沖液，分別測試步驟(1)中所配制的標準酶溶液，測試的反 應溫度為20-30℃，反應pH值為4.0-5.0，反應時間為30-90s，反應結束后加入 稀硫酸溶液，終止反應，獲得反應產物溶液；
(3)將各反應產物溶液置于紫外分光光度計中，在450nm的吸收波長下分 別測定其OD值，獲得辣根過氧化物酶濃度-OD值的標準曲線；
(4)測試待測豬肉中過氧化物酶反應后其反應產物溶液的OD值，根據標 準曲線計算出豬肉中過氧化物酶的濃度。圖1為辣根過氧化物酶濃度-OD值的標準曲線圖。
[1] 農業(yè)大詞典
[2] 中國醫(yī)學百科全書·十七 生物化學
[3] 中國茶葉大辭典
[4] CN201510367541.2 一種采用超濾法輔助硫酸銨鹽析提取乳過氧化物酶的方法
[5] CN201210112799.4 超濾提取辣根過氧化物酶的方法
[6] CN201511001061.0 一種豬肉中過氧化物酶的快速定量檢測方法