87-42-3/6-氯嘌呤的制備

背景及概述^[1]

6-氯嘌呤是合成腺嘌呤的主要中間體之一，其經(jīng)6-位氨化即得到腺嘌呤。腺嘌呤，化學(xué)名為6-氨基嘌呤，其衍生物在醫(yī)藥及農(nóng)用化學(xué)品等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。比如，它是合成維生素B4(腺嘌呤磷酸鹽)的主要原料；美國(guó)Gileadsciences公司開(kāi)發(fā)研制的阿德福韋酯(Adefovirdi-pivoxil，9-[2-[雙(特戊酰氧甲氧基)膦酰甲氧基]乙基]腺嘌呤)，2002年9月經(jīng)FDA批準(zhǔn)已成為用于治療乙肝的核苷類(lèi)似物新藥，口服后能有效抑制乙肝病毒DNA鏈的復(fù)制；1992年，HuberS.發(fā)現(xiàn)8-氮雜腺嘌呤對(duì)馬鈴薯X病毒具有明顯的抑制作用；腺嘌呤類(lèi)衍生物也可作為細(xì)胞分裂素，如玉米素、二氫玉米素、異戊烯基腺嘌呤、6-芐基腺嘌呤與激動(dòng)素等，可促進(jìn)植物細(xì)胞分裂和擴(kuò)大、促進(jìn)側(cè)芽發(fā)育、影響各種酶的活性、延緩衰老等。

制備^[1-2]

報(bào)道一、

投料物質(zhì)的量比次黃嘌呤∶雙(三氯甲基)碳酸酯∶有機(jī)胺催化劑為1∶0.36∶0.2，次黃嘌呤投料量為2.74g(0.02mol)，雙(三氯甲基)碳酸酯投料量為2.16g(0.0072mol)，有機(jī)胺催化劑為三乙胺，用量為0.41g(0.004mol)，有機(jī)溶劑為甲苯，用量為次黃嘌呤質(zhì)量的10倍(27.4g)。

先將三乙胺溶解在10g甲苯中，冰浴冷卻，緩慢滴加雙(三氯甲基)碳酸酯的甲苯溶液(2.16g雙(三氯甲基)碳酸酯溶于17.4g甲苯中)，控制滴加速度使反應(yīng)液溫度維持在0~5℃，滴加完畢，繼續(xù)攪拌半小時(shí)；將次黃嘌呤投入繼續(xù)攪拌，維持0~5℃反應(yīng)3小時(shí)；撤去冰浴，室溫下攪拌反應(yīng)半小時(shí)，然后升溫至110℃(回流)反應(yīng)2小時(shí)；過(guò)濾，取濾餅即得到6-氯嘌呤鹽酸鹽，將6-氯嘌呤鹽酸鹽溶于冰水，用質(zhì)量濃度為15％的氨水調(diào)至pH為8，6-氯嘌呤析出，過(guò)濾，濾餅用冷水洗滌，烘干，得6-氯嘌呤2.57g。含量(HPLC面積歸一化法，98.4％)，收率81.8％。

熔點(diǎn)＞300℃。¹HNMR(DMSO-d6)δ：8.65(s，1H，2-CH)，8.79(d，J＝15.0Hz，1H，8-CH)，13.75(s，1H，-NH)；Msm/z(relativeintensity)：155(M+，38)，154(100)，119(56)，92(16)，74(6)，65(13)，53(8)，38(40)，36(87)；IRv(cm^-1)：2943，2858，1603，1553，1472，1382，1302，1265，1208，1113，986.

報(bào)道二、

投料物質(zhì)的量比為乙酰基次黃嘌呤∶三氯氧磷∶N，N?二甲基苯胺為1.0∶5.0∶1.0

在裝有溫度計(jì)和機(jī)械攪拌的500mL的三口燒瓶?jī)?nèi)，加入35.6g乙酰基次黃嘌呤(0.20mol)、152153.0g三氯氧磷(1.00mol)、24.2gN，N?二甲基苯胺(0.20mol)，開(kāi)啟攪拌，加熱至105℃，保溫4h后，蒸除未反應(yīng)的三氯氧磷。冷卻到0℃，加入100mL冰水，用0.1MNaOH溶液調(diào)pH值至8。冷卻后析出大量黃色固體。過(guò)濾，冷水洗滌，干燥，得6?氯嘌呤27.6g，收率90.0％(以乙酰基次黃嘌呤計(jì)，下同。)，經(jīng)檢測(cè)純度為99.0％(高效液相色譜面積歸一法，簡(jiǎn)稱(chēng)HPLC，下同)。MS(EI):M(100)，M+2(33)。

應(yīng)用^[3-4]

一種2-氟腺嘌呤合成方法。以廉價(jià)的6-氯嘌呤為原料，對(duì)9位NH進(jìn)行四氫吡喃基保護(hù)，然后和三氟甲磺酸酐反應(yīng)，在2位引入硝基，繼而和NH₄F反應(yīng)，將硝基轉(zhuǎn)化為氟原子的同時(shí)，脫除四氫吡喃基，最后在被氨氣飽和的甲醇溶液中，將6位氯原子轉(zhuǎn)化為氨基，得到2-氟腺嘌呤，總收率58%。本方法原料廉價(jià)易得，避免使用價(jià)格昂貴和有毒有害的試劑，避免使用危險(xiǎn)性和腐蝕性的操作步驟，且反應(yīng)規(guī)模擴(kuò)大到200g規(guī)模時(shí)，收率無(wú)明顯下降。本發(fā)明申請(qǐng)為2-氟腺嘌呤的合成提供了一條新的合成途徑，具有潛在的應(yīng)用前景。

一種6-芐氨基腺嘌呤人工抗原的合成方法，屬于生物化工技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明以6-氯嘌呤和4-（氨甲基）苯甲酸取代得到含羧基的產(chǎn)物6-BA即為半抗原。采用碳二亞胺法將半抗原6-BA與載體蛋白BSA偶聯(lián)，用紫外法表征，并測(cè)定偶聯(lián)物的偶聯(lián)比。本發(fā)明成功合成了6-芐氨基腺嘌呤人工抗原6-BA-BSA，合成步驟簡(jiǎn)單、安全、有效，完全可用于免疫分析中，為以后的研究提供了必需的人工抗原。

參考文獻(xiàn)

[1][中國(guó)發(fā)明]CN200910100306.3一種6-氯嘌呤的合成方法

[2][中國(guó)發(fā)明,中國(guó)發(fā)明授權(quán)]CN201110298421.3一種6-氯嘌呤的化學(xué)合成方法

[3] CN201510620892.X一種2-氟腺嘌呤合成方法

[4]CN201710277697.0一種6-芐氨基腺嘌呤人工抗原的合成方法