84-26-4 / 吳茱萸次堿的制備方法

吳茱萸為蕓香科植物吳茱萸Evodiarutaecapa(Juss.)Benth.、石虎Euodiarutaecarpa(Juss.)Benth.Var.officinalis(Dode)Huang或疏毛吳茱萸Euodianutaecarpa(Juss.)Benth.Var.bodinienri(Dode)Huang的干燥近成熟果實，散寒止痛,降逆止嘔,助陽止瀉,用于厥陰頭痛、寒疝腹痛、寒濕腳氣、經(jīng)行腹痛、脘腹脹痛、嘔吐吞酸及五更泄瀉。近代醫(yī)學(xué)研究證明吳茱萸有鎮(zhèn)痛田、安神國、抗菌田、降血壓國和抗缺氧因等藥理作用。吳茱萸含有多種化學(xué)成分，其中生物堿類成分是吳茱萸的主要活性成分。

吳茱萸次堿是吳茱萸的主要活性成分之一，具有增加冠脈血流量回,舒張血管、降血壓回,抗血小板聚集,腦保護(hù)作用田,調(diào)節(jié)糖脂代謝國,抗癌、抗炎、抗?jié)儭⑺沙诜茄芷交?、抗缺氧等藥理作用田。昶國平等的分離周期長，且用丙酮重結(jié)晶,危害性大。為了研究更簡單、快速、高效的分離、純化吳茱萸次堿的制備方法,本試驗用一次硅膠柱層析分離，甲醇重結(jié)晶的方法，高效率制得純度在98.5%以上的吳茱萸次堿。

儀器與試藥

Waters1525型高效液相色譜儀,Waters2489型紫外可見檢測器;色譜柱為WatersC18柱(150mmx4.6mm,5μm);薄層色譜及柱色譜用硅膠(青島海洋化工廠);色譜純乙腈(Calipure進(jìn)口分裝);吳茱萸藥材購自云南昆明藥材市場,經(jīng)北京中醫(yī)藥大學(xué)張貴君教授鑒定為Evodiarutaecarpa(Juss.)Benth.的干燥近成熟果實。

實驗方法

1.裝柱

取200~300目硅膠1.5kg溶于石油醚中，攪拌均勻后裝入層析柱(φ15cmx60cm的玻璃層析柱)。石油醚為流動相,常壓沉降.硅膠1周備用。

2.提取與分離

取吳茱萸藥材0.5kg,用粉碎機(jī)稍加粉碎,裝入10L圓底燒瓶中,用10倍量石油醚脫油脂1次(2h),趁熱過濾,得殘渣和濾液，濾液回收石油醚,殘渣再次放入圓底燒瓶中，用10倍量85%乙醇提取3次,每次2h,合并3次提取液。將提取液濃縮至無醇味。加適量水,有大量沉淀析出,過濾,得黑綠色沉淀物101.12g,于通風(fēng)櫥中揮干溶劑，減壓干燥箱中干燥(55℃)24h,研缽中研磨。細(xì)粉過80目篩后,直接干法上樣,用石油醚-乙酸乙酯(v:v,5:1)洗脫，按照1滴/s的流速收集流分于圓底燒瓶中,500mL后換瓶，流分至5000mL后開始有白色雪花狀結(jié)晶析出,為吳茱萸次堿粗品。結(jié)合色帶顏色收集流分,收集液(40℃)減壓回收溶劑后,點硅膠板合并有相同目標(biāo)物的流分。常溫放置一段時間后得黃白色粗品1.2g。

重結(jié)晶:將粗品用甲醇溶解成過飽和狀態(tài),放入冰箱中，低溫重結(jié)晶，如此反復(fù)3次,干燥后即淡黃色吳茱萸次堿純品0.5g。