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魚藤酮是魚藤酮類植物家族成員之一,是一種從豆科魚藤屬(Derris)和醉魚豆屬(Louhocarpus)植物萃取的天然毒性物質(zhì)。魚藤酮光下易分解。一般情況,其有毒成分5一6天分解,而陽光充足的夏天,僅需2一3天。魚藤酮在泥土和水中也易降解。半衰期僅1一3天。由于魚藤酮半衰期短,易分解,不污染環(huán)境,因此在世界各地都普遍應(yīng)用于農(nóng)作物蟲害治理和魚塘清理,被視為是一種天然低毒且高效的殺蟲劑。
1、魚藤酮的生物活性
魚藤對(duì)15個(gè)目,137科的800多種害蟲具有一定的防治效果,作用譜廣,尤其對(duì)蚜嫡類害蟲效果突出。Nawrot等在室內(nèi)測(cè)定了魚藤酮及其5種衍生物對(duì)
谷象(Sitophilus granatius)和雜擬谷盜(Triboli -fusun2)成蟲以及雜擬谷盜和谷斑皮蠢(Trogodermagran)幼蟲的拒食作用。結(jié)果表明,魚藤酮對(duì)儲(chǔ)糧害蟲有一定的拒食活性。當(dāng)溫度為26℃,相對(duì)濕度(RH)為64%時(shí),發(fā)現(xiàn)魚藤酮對(duì)這3種害蟲的拒食活性最高,其類似物的拒食活性不如魚藤酮本身,但表現(xiàn)出一定的選擇性。Bloszyk等用6種拒食活性較高的化合物作為食品包裝物,以防治貯糧害蟲谷蠢(Rhyzopertha dominica)和谷象的危害,發(fā)現(xiàn)魚藤酮對(duì)谷蠢的拒食活性比其他幾種藥劑都高。
斯里蘭卡有一傳統(tǒng)的植物藥物“pikamul”,就是Tephrosia purpurea Pers.的根。該植物地上部分含有披針灰葉素、a一灰葉素、魚藤素、灰葉素、去氫魚藤素等,根部含有魚藤酮和魚藤醇酮,由于魚藤酮類化合物強(qiáng)烈的殺線蟲活性而使該植物對(duì)Toxacara cams幼蟲的活性很高,從而使“Pilamul”表現(xiàn)出強(qiáng)烈的殺線蟲作用。用魚藤酮溶液對(duì)綿羊洗浴,9個(gè)月后,在綿羊身上找不到虱子((Bovicola ovis。在美國華盛頓州,用魚藤酮來控制西紅柿和其他作物上的塊莖跳甲(Epitrix tuberzs)和美國馬鈴薯跳甲(Epitrix sub-crinita ),胡椒基丁醚與魚藤酮混作可使Perillus biocu-latus的3齡幼蟲產(chǎn)生很高的死亡率。
魚藤酮生物活性會(huì)受到各種因素的影響。Zhong和Zhou測(cè)定致倦庫蚊(Culex quinquefascie)不同齡期的幼蟲對(duì)魚藤酮的敏感性時(shí)發(fā)現(xiàn),1齡幼蟲對(duì)魚藤酮不敏感。當(dāng)溫度為28℃,中性環(huán)境,低光強(qiáng),低營養(yǎng)時(shí),致倦庫蚊幼蟲的死亡率最高。此外,魚藤酮對(duì)熱水(41℃ ~ 43℃)引起地中海果蠅卵的死亡率有協(xié)同作用,當(dāng)水中的氧氣減少時(shí),浸入熱水中的地中海果蠅卵的死亡率改變,卵齡不同,死亡率也不同。
關(guān)于魚藤酮混配方面的研究也有一些報(bào)道。田間試驗(yàn)表明,以4%魚藤酮與400氯氰菊醋1. 25 1/ hm2和其他幾種藥劑對(duì)甘薯粉虱(Benisia tabaczm)進(jìn)行處理,4天后,4%魚藤酮和400氯氰菊醋處理的卵的平均數(shù)為4.38,對(duì)照為427.2, 4天和7天的防效分別92.7%和8700。魚藤酮和氰戊菊醋以及魚藤酮和氯氰菊醋混劑對(duì)橘葉刺瘦嫡PhyZlocoptas obleivorus)的毒性很高,共毒系數(shù)分別達(dá)到667.46和405.94。田間試驗(yàn)表明:兩種混劑以50 mg/L噴霧處理,4天后的死亡率分別可達(dá)到99 . 63%和90.18%,并且可提高作物產(chǎn)量。目前我國已經(jīng)生產(chǎn)出了多種魚藤制劑,同時(shí)國外的魚藤產(chǎn)品也開始在我國進(jìn)行登記試驗(yàn)。魚藤制劑的防治抗性害蟲如我國南方的小菜蛾、北方的棉鈴蟲方面起到了一定的作用,正越來越受到人們的重視。
2、魚藤酮的作用機(jī)制
早期的研究表明魚藤酮的作用機(jī)制主要是影響昆蟲的呼吸作用,主要是與NADH脫氫酶與輔酶Q之間的某一成分發(fā)生作用。魚藤酮使害蟲細(xì)胞的電子傳遞鏈?zhǔn)艿揭种疲瑥亩档蜕矬w內(nèi)的ATl水平,最終使害蟲得不到能量供應(yīng),然后行動(dòng)遲滯、麻痹而緩慢死亡。許多生物細(xì)胞中的線粒體、NADH脫氫酶、丁二酸、甘露醇以及其他物質(zhì)對(duì)魚藤酮都存在一的敏感性。Setayria cervi線粒體中從NADPH到NADH這一過程的電子傳遞可被魚藤酮高度抑制。并且,絲蟲寄生物Setaria digitata線粒體顆粒中的反丁烯二酸還原酶系統(tǒng)的活性對(duì)魚藤酮敏感。魚藤酮和水楊氧肪酸可抑制Trypanosoma brucei brucei線粒體內(nèi)膜的電動(dòng)勢(shì)(EMT),從而間接地影響NADH脫氫酶的活性;魚藤酮還可抑制Trypanosoma brucei brucei線粒體呼吸鏈中的NADH到細(xì)胞色素C和NADH到輔酶Q還原酶的活性,抑制率高達(dá)80%一90000Niehaus和Flynn發(fā)現(xiàn),魚藤酮可抑制Cryptococcusnec細(xì)胞中甘露醇的合成,可能是影響了甘露醇合成酶的活性,從而間接地對(duì)生物體產(chǎn)生影響。
張雙喜的試驗(yàn)結(jié)果表明,魚藤酮抑制了菜粉蝶幼蟲的呼吸作用,而且又干擾了試蟲的正常生長發(fā)育。因菜粉蝶幼蟲的生長需要能量供給,并且幼蟲的蛻皮、化蛹均需要能量聚集到一定水平方能突破舊表皮,蛻掉舊表皮而完成蛻皮和化蛹過程。因此,幼蟲生長發(fā)育的抑制以及畸形蟲(主要指舊表皮沒有完全脫去而形成的畸形蟲態(tài))的出現(xiàn)很可能是由于魚藤酮抑制了呼吸作用而使能量降低所致,這表明魚藤酮可對(duì)昆蟲的生長發(fā)育產(chǎn)生影響。
另外,魚藤酮可抑制細(xì)胞中紡錘體微管的組裝,并在體外證明抑制微管的形成,Marshall推測(cè)魚藤酮是以一種可逆的方式聯(lián)接在微管蛋白上而抑制了微管的形成。從遺傳學(xué)的角度來看,紡錘體形成受到抑制必然影響細(xì)胞的正常分裂,從而可推論魚藤酮可能通過這一途徑影響蟲體的生長。此外,魚藤酮處理菜粉蝶幼蟲會(huì)使蟲體體壁蛋白質(zhì)組成發(fā)生改變,使總蛋白的量降低,體壁蛋白的變化必定影響體壁結(jié)構(gòu)。
莫美華、黃彰欣進(jìn)行了魚藤酮及其混劑對(duì)蔬菜害蟲的毒效研究。魚藤酮及其混劑均能抑制昆蟲的呼吸作用,它們還能破壞中腸和脂肪體細(xì)胞,造成昆蟲局部變黑;嚴(yán)重地影響了中腸多功能氧化酶的活性,使藥劑不易被分解而有效地到達(dá)靶標(biāo)器官,從而使昆蟲中毒致死。Zhong和Zhou用魚藤酮處理致倦庫蚊后,其中腸受到破壞。魚藤酮可影響昆蟲體內(nèi)ATl的產(chǎn)生,由于ATl是昆蟲生理活動(dòng)的主要供能場(chǎng)所,而在神經(jīng)沖動(dòng)傳導(dǎo)過程中,Na+被離子泵噴出膜外和K十被吸入膜內(nèi)的過程是需能的,如果ATl受到影響,能量供應(yīng)不上,鈉鉀離子交換變慢,從而恢復(fù)原來靜止?fàn)顟B(tài)所需的時(shí)間延長,膜內(nèi)Na+、膜外K十濃度升高,這就大大加強(qiáng)了擬除蟲菊醋對(duì)Na+,K十電流的遏制作用,使負(fù)后電位更加增大和延長。另外,魚藤酮本身也能使細(xì)胞膜內(nèi)Na+濃度上升,這就更增強(qiáng)了負(fù)后電位,更容易使昆蟲中毒。
魚藤酮除了可影響昆蟲的呼吸作用外,它還可影響多種植物的線粒體。Wiskich等提出,在植物線粒體內(nèi)膜中有NADH氧化酶;一種是可保存能量的復(fù)合體1,對(duì)魚藤酮敏感;另一種NADH脫氫酶不保存能量,對(duì)魚藤酮也不敏感。小麥和玉米褪色葉片組織中,魚藤酮可抑制甘氨酸的脫梭作用,抑制效果比在綠色組織中更明顯。魚藤酮能抑制大麥原生質(zhì)的呼吸作用,在有光、低二氧化碳條件下,水楊氧肪酸和魚藤酮聯(lián)合作用可抑制呼吸作用的7000,幾乎完全抑制。
1、毒魚劑
幾千年以前南美洲的土著居民就知道把含魚藤酮的尖莢豆屬植物作為魚毒劑,用來獲取食物。他們將這些植物在湖和小河中拖動(dòng)或?qū)⑦@些植物的莖桿和根碾打出的汁順著小溪流入池塘中,魚就會(huì)變得麻木而于捕捉,這種方法捕獲的魚人吃了沒有什么副作用,因?yàn)樗~藤酮的量很低。現(xiàn)今菲律賓等東南亞沿海一帶,還經(jīng)常有人在珊瑚礁海域和退潮后海水滯留海域及無法撒網(wǎng)的水域,利用魚藤根粉捕魚。魚藤酮能殺死魚類和部分水生昆蟲,而對(duì)浮游生物、致病菌、寄生蟲及其休眠抱子不起作用,是清理魚塘理想藥劑。
魚藤酮對(duì)多數(shù)魚類的致死濃度為0.025mg/L,而對(duì)蝦卻可以在含lOmg/L魚藤酮的溶液中正常生存。例如口本的對(duì)蝦養(yǎng)殖場(chǎng),在將種苗移至蝦池前,都用市售的魚藤根粉末驅(qū)除蝦池中的有害魚類,以有效地保護(hù)幼蝦。山于魚藤酮對(duì)魚類及其它生物具有大面積的毀滅性,因此應(yīng)對(duì)其加以控制使用,以免嚴(yán)重破壞海洋生態(tài)環(huán)境。
魚藤酮還可用作殺螺劑和捕獲觀賞魚類。許多種魚在魚藤酮致死濃度的溶液中會(huì)很快浮上水面,此時(shí)若及時(shí)將它們轉(zhuǎn)移至5-lOmg濃度的亞甲基鹽溶液中,這些魚便會(huì)馬上恢復(fù)活力。應(yīng)用魚藤酮的這一特性,可以捕獲到高品質(zhì)的觀賞魚,這種方法有時(shí)也可用于某些科學(xué)研究。
2、殺蟲劑
19世紀(jì)中葉就有人把魚藤當(dāng)作殺蟲劑使用,至今已有100多年的歷史,對(duì)它的生物活性、作用方式、作用機(jī)理、殺蟲譜等都研究得比較清楚,并且形成了一套較為完善的理論。魚藤酮對(duì)15個(gè)目,137科的800多種害蟲具有一定的防治效果,對(duì)蚜蝸類害蟲效果尤其突出。適應(yīng)范圍廣,包括經(jīng)濟(jì)作物、住房、果園、從事農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的房屋、狗、貓、兔子、馬以及儲(chǔ)存的谷物、溫室、湖和小溪。
Higgs等人用魚藤酮溶液對(duì)綿羊洗浴,9個(gè)月后在綿羊身上找不到虱子Takashima發(fā)現(xiàn)魚藤酮具有很強(qiáng)的抗幽門螺桿菌(Helicobacterpylori)活性(MIC為1.3Hg/ml)。魚藤根粉的溶劑提取物對(duì)害蟲具有強(qiáng)烈的觸殺、拒食和致畸等作用。在美國華盛頓州,用魚藤酮來控制西紅柿和其他作物上的塊莖跳甲(即itrix tuberis)和美國馬鈴薯跳甲(即itrixsubcrinita)。胡椒基丁醚(piperonyl butoxide)與魚藤酮混用可使Perillus bioculat的3齡幼蟲產(chǎn)生很高的死亡率。馮春用魚藤精防治曲房蝸類、跳蟲?。╫duridae).谷盜、甲殼蟲、木象等害蟲效果顯著。魚藤酮和擬除蟲菊酷混合后對(duì)園林植物常見害蟲均有很強(qiáng)殺滅力,而無副作用,能克服當(dāng)前園林植物害蟲對(duì)有機(jī)磷和擬除蟲菊酷等常用殺蟲劑的抗藥性,少劑量、高效能、迅速殺滅害蟲。
1.3%. 2.5%. 7.5%的氰·魚藤乳油用于防治蔬菜、水稻、果樹和茶葉等多種作物害蟲,對(duì)有機(jī)磷殺蟲劑有抗性的各種蚜蟲、菜青蟲(Pieris rapae)等有很好的防治效果,0.2%苦參堿水劑+1.8%魚藤酮乳油桶混劑安全無污染,避免了使用常規(guī)農(nóng)藥對(duì)蔬菜的殘留污染和對(duì)環(huán)境的污染,對(duì)天敵無殺傷作用。3.5%魚藤酮乳油是以一種特異的植物滲透劑與魚藤酮配制而成,對(duì)番茄蚜蟲有良好的防治效果,速效性強(qiáng),持效期長,對(duì)作物安全,是防治蔬菜蚜蟲比較理想的農(nóng)藥品種,2.5%復(fù)配農(nóng)藥毗蟲琳·魚藤乳油(魚藤酮+毗蟲琳)可以有效地延緩害蟲的抗藥性,降低用藥量,減少環(huán)境污染,具有較強(qiáng)的市場(chǎng)競(jìng)爭力和較高的經(jīng)濟(jì)效益,吐魚藤酮與氯氰菊酷(cypermethrin)混用對(duì)甘薯粉虱(Berrisia tabacim)有很高的防效。魚藤酮和氰戊菊酷(1:1)以及魚藤酮和氯氰菊酷(Q: 1)混劑對(duì)柑桔潛葉峨(Phyllocnistis citrella)、柑桔全爪蝸(Yanonychus citri)、柑桔銹蜘蛛(Phyllocoptruta oleivora)和柑橘葉刺瘤蝸(Phyllocoptes obleivorus)有很高的防效,且持效期長,還可提高作物產(chǎn)量。
3、獸藥、醫(yī)藥及其他
魚藤酮可治療“癲皮狗”病和犬疥蝸病;1%的魚藤酮軟膏可治愈牛蝸病;魚藤精可治愈豬疥癬病。澳化魚藤酮乳劑治療疥癬效果較好,且無不良反應(yīng)。有人報(bào)道魚藤酮能抑制肝細(xì)胞增殖,具有抗癌、防癌作用。魚藤酮可以抑制山tB-OOH引起的U937細(xì)胞壞死,并使之增殖。魚藤酮還具有顯著消腫鎮(zhèn)痛作用。截耳瓣魚藤 (Derris scandens)的莖可用作祛痰藥、利尿劑、抗痢疾藥、補(bǔ)益藥并治療惡病質(zhì)。魚藤酮還可以當(dāng)作護(hù)膚品,如新膚蝸靈霜中就含有魚藤酮。Lonchocarpus muehlbergianus的種子可用來制作食品和飼料。
1、材料
非洲山毛豆紫花和白花品種葉片采于華南農(nóng)業(yè)大學(xué)昆蟲毒理研究室殺蟲植物標(biāo)本園內(nèi),烘干(45一50℃),粉碎.魚藤酮純品(w為9700),由Sigma公司生產(chǎn)。
2、方法
2.1提取方法用石油醚、氯仿、苯、乙酸乙醋、丙酮、甲醇等6種極性不同的有機(jī)溶劑按下列方法進(jìn)行提取(所有溶劑均為分析純).每處理重復(fù)3次。
(1)索氏抽提法:分別稱取紫花和白花品種的植物干粉20 g,用濾紙包好放入索氏提取器中提取,回流至溶劑為無色時(shí)停止.將提取液濃縮,得粗提物。
(2)冷浸法:稱取20 g干粉,加入400 mL的有機(jī)溶劑置于避光暗處(24 ~ 25℃)浸提48 h,過濾出溶劑,再加入200 mL溶劑浸提24 h,過濾.用100 mL溶劑沖洗濾渣,合并3次的濾液,濃縮得浸提粗提物。
(3)振蕩提取法:稱取20 g干粉,加入400 mL的溶劑置于恒溫?fù)u床上振蕩抽提48 h,以下步驟同冷浸法。
2.2提取物的配制
根據(jù)提取率準(zhǔn)確稱取一定量的粗提物,用丙酮定容至每mL含1g植物干粉,逐級(jí)稀釋100倍,即0. O1 g/mL,密封待測(cè).
3、魚藤酮的定性和定量測(cè)定
用美國惠普公司生產(chǎn)的1100型HPLC配置:四元梯度泵、紫外可見光檢測(cè)器、手動(dòng)進(jìn)樣器、惠普化學(xué)工作站、ODIS柱((5 lam, 125 mmX 4 mm).測(cè)定條件:流動(dòng)相為甲醇:水一69 :31 (v:v);流速0. 8 mL/min;進(jìn)樣量10lL;檢測(cè)波長299 nm;柱溫室溫;檢測(cè)靈敏度AL1FS=0. 001。
3.1定性 根據(jù)標(biāo)樣的出峰時(shí)間(保留時(shí)間)進(jìn)行定性.
3.2定量 根據(jù)已知濃度標(biāo)樣魚藤酮的吸收峰面積和樣品魚藤酮吸收峰面積與它們各自的含量成正比的關(guān)系測(cè)定試樣中魚藤酮的含量,計(jì)算公式如下:
[1]徐漢虹,黃繼光.魚藤酮的研究進(jìn)展[J].西南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2001(02):140-143.
[2]張庭英,徐漢虹,王長宏.魚藤酮的應(yīng)用現(xiàn)狀及存在問題[J].農(nóng)藥,2005(08):352-355.
[3]黃繼光,徐漢虹,周利娟,劉新清,江定心.非洲山毛豆葉片中魚藤酮的提取方法[J].華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2001(04):29-32.