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粘菌素系由多粘芽胞桿菌(bacilluspolymyxa)產(chǎn)生的一組多肽類抗生素。其中多粘菌素B和E對革蘭氏陰性菌具有顯著的抗菌活性，是治療綠膿桿菌感染的首選藥物。粘菌素常用鹽為硫酸鹽。但硫酸粘菌素毒性大，因此在許多國家(如美國)規(guī)定其僅適用于局部外用藥或口服治療腸道感染，而對于其他非腸道給藥是嚴(yán)格禁止使用的。為了克服硫酸粘菌素毒性大的缺陷，醫(yī)藥研究人員將其化學(xué)修飾后制成粘菌素甲烷磺酸鈉，由此使該藥物的LD50降低了50倍。粘菌素甲烷磺酸鈉可用于肌注或皮注，也可通過靜脈給藥。目前制備粘菌素甲烷磺酸鈉的方法，通常為將粘菌素與甲醛在堿性緩沖溶液中進(jìn)行反應(yīng)，然后再與亞硫酸氫鈉反應(yīng)，從而得到粘菌素甲烷磺酸鈉(二步反應(yīng)法)。該方法存在的缺點是產(chǎn)品殘留有甲醛和粘菌素，且產(chǎn)品質(zhì)量極不穩(wěn)定，由此也大大增加了產(chǎn)品潛在的毒性。
粘菌素甲烷磺酸鈉的制備方法，包括以下步驟：
(a)將硫酸粘菌素水溶液用氨水或氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至9?13，攪拌、反應(yīng)1?3小時抽濾，所得濾餅加入去離子水，配制成粘菌素混懸液；
(b)將上述混懸液中加入羥甲基磺酸鈉，10～90℃溫度條件下，反應(yīng)1～24小時；
(c)將b步生成的反應(yīng)溶液，經(jīng)過凝膠型苯乙烯系強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂和大孔型丙烯酸系弱堿性陰離子交換樹脂構(gòu)成的混合樹脂分離純化；所述的混合樹脂的用量按照硫酸粘菌素與混合樹脂重量比為1∶1.5～3.0計；
(d)將c步所得到的產(chǎn)品，進(jìn)行干燥。
一種檢測粘菌素甲烷磺酸鈉中甲醛殘留量的方法，所述的方法為一種基于液相色譜儀檢測粘菌素甲烷磺酸鈉中甲醛殘留量的方法包括以下步驟：
a、制備供試品溶液：精密稱定粘菌素甲烷磺酸鈉1.0g置燒杯中，加10mL無水乙醇，超聲10min后離心分離，精密量取5mL上清液置10mL容量瓶中，并向容量瓶中精密加入3mL磷酸水溶液，1mL2，4-二硝基苯肼無水乙醇溶液，并用無水乙醇稀釋至刻度，蓋好瓶塞，用倒轉(zhuǎn)的方式使瓶內(nèi)的液體混合均勻，于30-40℃放置5-10h；
b、制備對照品溶液A：精密稱定1.1g甲醛溶液置100mL量瓶中，用無水乙醇溶解定容至刻度，所述的甲醛溶液使用前進(jìn)行滴定；
c、制備對照品溶液B：精密量取1.0mL步驟b制備的對照品溶液A，置200mL量瓶中，用無水乙醇定容至刻度；
d、制備對照品溶液C：精密量取5.0mL步驟c制備的對照品溶液B，置50mL量瓶中，用無水乙醇定容至刻度；
e、制備對照品溶液：精密量取5.0mL步驟d制備的對照品溶液C，置10mL量瓶中，精密加入3mL磷酸水溶液，1mL2，4-二硝基苯肼無水乙醇溶液，并用無水乙醇稀釋至刻度，蓋好瓶塞，用倒轉(zhuǎn)的方式使瓶內(nèi)的液體混合均勻，于30-40℃放置5-10h；
f、制備空白溶液：精密量取5mL無水乙醇，置10mL量瓶中，精密加入3mL磷酸水溶液，1mL2，4-二硝基苯肼無水乙醇溶液，并用無水乙醇稀釋至刻度，蓋好瓶塞，用倒轉(zhuǎn)的方式使瓶內(nèi)的液體混合均勻，于30-40℃放置5-10h；
g、色譜條件：采用AgilentC184.6*250mm5.0um色譜柱，以磷酸溶液：乙腈體積比為50：50為流動相，色譜柱的柱溫控制在25-35℃，流速為1.0～1.5mL/min，檢測波長為336nm，進(jìn)樣量20μL；
h、系統(tǒng)適應(yīng)性試驗：打開液相色譜儀，預(yù)熱5min，將對照品溶液連續(xù)進(jìn)樣3針，要求甲醛峰峰面積的RSD≤2.0％；
i、測定：分別精密量取供試品溶液、對照品溶液、空白溶液各20μL，注入液相色譜儀，按步驟g的色譜條件進(jìn)行測定，記錄色譜圖；
j、按外標(biāo)法計算出粘菌素甲烷磺酸鈉中甲醛的殘留量。
[1] CN201110007006.8一種粘菌素甲烷磺酸鈉的制備方法
[2] CN201410841426.X一種檢測粘菌素甲烷磺酸鈉中甲醛殘留量的方法