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胰酶是一種解離試劑,本質是可以降解蛋白的酶,生物學實驗中常用來把貼壁細胞從貼壁面解離下來和使細胞解聚,也可以用于原代細胞的傳代過程中分散組織。
胰酶濃度:常用0.25%胰酶+0.02%EDTA作為消化液。
商品化胰酶溶液需要用干冰運輸,在運輸過程中,胰酶溶液中的二氧化碳與干冰揮發(fā)的二氧化碳可能會極少部分的氣體交換,導致溶液PH的漂移。有些胰酶溶液里含有酚紅作為PH值指示劑,因此胰酶PH的變化是肉眼可觀察到的。由干冰運輸過程中導致的PH值的變化很小,PH值會從7.2-8.0變化到了6.8左右,在PH值7.2-8.0的時候,溶液呈淡紅色;PH值6.8左右時呈淡黃色的。因此胰酶顏色的變化是由PH值的變化引起,歸因于使用干冰運輸。這種顏色的變化是行業(yè)普遍現(xiàn)象,在不同供應商的胰酶產品都會出現(xiàn)。
簡單一個字:能!
對于胰酶呈黃色的問題,不同品牌也都對此現(xiàn)象進行了測試實驗。變色的胰酶同樣能很好的用于細胞的解離,請放心使用。
細胞消化時,如果消化液中只有胰酶,不含EDTA,不去除是沒有問題的。
如果消化液中含有胰酶和EDTA,最好去除。EDTA是一種化學螯合劑,主要作用在于能螯合Ca、Mg離子,使細胞分離。但EDTA不能被血清中和,消化后要徹底清洗去除,否則細胞易脫壁。胰酶胰酶和EDTA聯(lián)合使用可提高消化效率,所以常二者合用。
胰酶可在-20℃下保存一年。隨著時間延長,胰酶的消化能力減弱。胰酶可分裝凍存,在使用前從-20℃冰箱取出。盡量避免在4℃長期保存。