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苯胺藍(lán)(醇溶)為綠色或紅棕色結(jié)晶粉末，微溶于醇，不溶于水，溶于濃硫酸呈棕黃色，稀釋后得藍(lán)色沉淀。制法：由4，4′-二氨基二苯甲烷、苯胺、苯胺鹽酸鹽、硝基苯及氯化亞鐵共熱(170℃)，即得對(duì)位品紅，后者再與過(guò)量苯胺在苯甲酸存在下共熱至180℃而得。其用途：可作染料。
CN201610422991.1提供了一種基于石蠟切片和苯胺藍(lán)熒光染色法觀察匍匐翦股穎葉片組織胼胝質(zhì)的沉積的方法，首次利用石蠟切片和苯胺藍(lán)熒光染色法觀察匍匐翦股穎葉片組織胼胝質(zhì)的沉積，石蠟制片全程耗時(shí)2天，極大的縮短了匍匐剪股穎石蠟制片的實(shí)驗(yàn)時(shí)間，突破了材料本身、環(huán)境因素所帶來(lái)的限制，可快速高效的完成石蠟制片過(guò)程。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案為：
基于石蠟切片和苯胺藍(lán)熒光染色法觀察匍匐翦股穎葉片組織胼胝質(zhì)的沉積的方法，包括如下步驟：
S1、進(jìn)行藥品的配制；
S11、將福爾馬林10ml、乙酸3ml、50％的乙醇87ml、5ml甘油混合均勻，得FAA固定液；
S12、將無(wú)水乙醇與二甲苯以1：1的比例混合配制成1/2二甲苯；
S13、稱取0.1g水溶性苯胺藍(lán)溶解于100ml濃度為0.07mol/L，pH＝7的磷酸緩沖液中，得0.1％的苯胺藍(lán)熒光染色劑。
S2、制作石蠟切片；
S21、用鋒利的刀片快速取下寬度約0.8mm的匍匐剪股穎葉片，將葉片切割成長(zhǎng)度約5mm左右小段，放入青霉素小瓶中，加入步驟S11所得的FAA固定液，固定12h；
S22、經(jīng)FAA固定后，依次置換15％、30％、50％、70％、85％乙醇中進(jìn)行梯度脫水，各脫水20min，于95％乙醇中脫水30mim，無(wú)水乙醇中脫水兩次，各20min；然后依次置換1/2二甲苯、二甲苯進(jìn)行透明，于1/2二甲苯中透明1h，二甲苯中透明兩次，每次30min，至材料完全透明為止；
S23、在裝有所得透明材料的青霉素小瓶中加碎蠟兩次，第一次加入與瓶中二甲苯 等量的碎蠟，放入電熱鼓風(fēng)干燥箱中溫度36℃保持1h至所加碎蠟完全融化后，加入瓶中液 體一半的碎蠟，放入電熱鼓風(fēng)干燥箱中調(diào)節(jié)溫度至36℃過(guò)夜后，調(diào)節(jié)溫度至42℃，置換50％ 石蠟保持1h后，溫度調(diào)至50℃，置換75％的石蠟保持30min后，調(diào)節(jié)溫度至60℃，依次置換純 石蠟A、純石蠟B、純石蠟C各30min，然后采用TKY-BMB型石蠟包埋機(jī)進(jìn)行包埋，一個(gè)蠟塊中一 個(gè)材料，蠟塊的尺寸為：0.5cm×0.5cm×0.5cm，將包埋好的蠟塊冷卻后直接修塊，進(jìn)行切片 或保存到4℃冰箱備用；
S24、采用輪式手動(dòng)切片機(jī)進(jìn)行連續(xù)切片，厚度10μm；將HH-6數(shù)顯恒溫水浴鍋溫度調(diào)節(jié)至45℃，在500ml大燒杯加入蒸餾水放入水浴鍋中，將切好的蠟帶放入燒杯中，待蠟帶完全展開后，將涂抹好蛋清甘油的載玻片伸入燒杯中，使蠟帶粘到載玻片上，將粘有蠟帶的載玻片自然晾干后，在光學(xué)顯微鏡下觀察展片效果，取展片效果好的片子置于電熱鼓風(fēng)干燥箱中于38℃下烘烤，直到片子完全干燥；
S25、取干燥的片子，依次放到分別加有二甲苯、1/2二甲苯、95％的乙醇、85％的乙 醇、70％的乙醇、50％的乙醇、30％的乙醇、磷酸緩沖液、0.1％的苯胺藍(lán)染色劑的立式染缸 中；在二甲苯、1/2二甲苯中各5min，95％的乙醇、85％的乙醇、70％的乙醇、50％的乙醇、 30％的乙醇中各5S，磷酸緩沖液中10min，0.1％的苯胺藍(lán)染色劑中30min；然后將染色后的 片子取出，置于蒸餾水中30S，洗凈片子上的雜質(zhì)后，過(guò)1/2二甲苯、二甲苯各10S，待片子干燥后采用中性樹膠封片；
S26、將所得的片子自然風(fēng)干后，置于LeiCaDM6000B熒光顯微鏡下觀察并拍照。
[1] 化合物詞典
[2] CN201610422991.1 基于石蠟切片和苯胺藍(lán)熒光染色法觀察匍匐翦股穎葉片組織胼胝質(zhì)的沉積的方法