8002-43-5/卵磷脂的純化和純度鑒定

背景及概述^[1]

卵磷脂是磷脂的主要組成成分。磷脂（Phospholipid），也稱磷脂類、磷脂質(zhì)，是一類含磷酸根脂質(zhì)的總稱，屬于復(fù) 合脂質(zhì)。磷脂在植物種子、動物臟器、血液、卵巢、蛋黃及細(xì)菌中與油脂并存，是生物細(xì)胞構(gòu) 成的必需物質(zhì)，也是生命的基礎(chǔ)物質(zhì)之一。

一般磷脂組成成分包括：卵磷脂、腦磷脂、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰甘油和磷脂酰肌 醇。其中，卵磷脂是磷脂的主要組成成分，同時具有親水性磷酸脂酪基、膽堿或膽胺等(極性 基團(tuán))和疏水性脂肪酸基(非極性基團(tuán))，因此卵磷脂是一種兩性表面活性劑。具有分散、潤 濕、溶解、消泡等作用，在營養(yǎng)和保健方面也起著非常重要的作用，能預(yù)防和治療高膽固醇 和高脂血癥，緩解糖尿病的病情等功能，因此，卵磷脂是目前公認(rèn)的最具有生物學(xué)活性的磷 脂，在食品、醫(yī)藥、化妝品和飼料及其它工業(yè)部門都有著廣泛的應(yīng)用。

純度鑒定^[1]

（1）稱取500mg卵磷脂樣品，用氯仿溶解并定容至100mL，配制成5mg/mL的溶液；

（2）將上述卵磷脂溶液點(diǎn)樣于距一矩形薄層層析板底端1.0cm處，使點(diǎn)樣下方的薄層層析與展開劑液面接觸，當(dāng)展開劑上緣距離薄層層析板頂端1.3cm時立即取出薄層層析板，待薄層層析板上展開劑涼干后，再將薄層層析板完全浸泡于顯色劑中，然后取出；

（3）可觀察至薄層層析板上的卵磷脂、脂肪酸與甘油酯、溶血卵磷脂的顯色斑點(diǎn)分別是黃色、白色、乳黃色，將薄層層析板掃描后測量出其面積分別為36mm²、4mm²和4mm²；

（4）計算：卵磷脂的純度。

純化方法^[2]

一種硅膠柱層析法分離純化卵磷脂的方法，

（1）取30g勻漿后的魚卵，丙酮與魚卵以1:5的料液比浸提35min，抽濾后濾餅用90% 的乙醇，在料液比1:5，提取溫度30℃的條件下，超聲輔助萃取15min，超聲波功率為300w，脈 沖間隔2s，提取1次，抽濾；

（2）濃縮干燥：將乙醇提取液經(jīng)40℃下減壓濃縮后，置于45℃真空干燥得到粗磷脂 2.1g；

（3）分別將2.1g粗磷脂溶于異丙醇，氯仿和95%乙醇中，以2mL/min流速倒入硅膠柱 中，分別采用三種洗脫體系，包括異丙醇-甲醇溶液（1:1），氯仿-甲醇（1:1）和95%乙醇。用 TLC板檢測樣品的洗脫順序。通過TLC分析，把與標(biāo)準(zhǔn)品卵磷脂有相同R值的PC餾分收集在一 起，減壓濃縮至膏狀，真空干燥得到的卵磷脂的純度分別為：92%，93.12%，87.22%；說明氯 仿-甲醇體系洗脫效果最好，但是鑒于氯仿毒性較大，不宜用于卵磷脂的純化。綜合，選擇異丙醇-甲醇洗脫體系為最佳洗脫條件。

參考文獻(xiàn)

[1] [中國發(fā)明,中國發(fā)明授權(quán)] CN201110003383.4 一種鑒別卵磷脂純度的方法

[2] [中國發(fā)明,中國發(fā)明授權(quán)] CN201410501211.3 一種硅膠柱層析法分離純化魚卵中卵磷脂的方法