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黃曲霉毒素G2是霉菌的次生代謝物，存在于發(fā)霉的大豆、豆油、棉籽油、谷物等中。現(xiàn)已分離出有黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1、M2六個化合物。對多數(shù)動物具有強烈毒性，可引起某些動物肝臟致癌，其中以黃曲霉毒素B1毒性最高。它們在紫外光照射下呈強烈的熒光。
黃曲霉毒素（Aflatoxins，AF）是黃曲霉（Aspergillus flavus）、寄生曲霉（A.parasiticus）和模式曲霉（A.nomius）等在合適的溫度和濕度條件下產(chǎn)生的真菌毒素，對人畜有強烈的致病性、致癌性，嚴重危害人體健康，是危害最嚴重的真菌毒素。污染糧食的黃曲霉毒素主要有 B1、B2、G1和G2。目前AF 的檢測方法主要有薄層色譜法、膠體金試紙條法、 酶聯(lián)免疫法、液相色譜法或液質(zhì)聯(lián)用法等方法。
方法一：選擇MycosepTM226 MFC 多功能柱或相當者結合高效液相色譜熒光檢測器-柱后衍生測定啤酒，玉米、花生及其制品中黃曲霉毒素 B1、B2、G1、G2，方法準確度高、靈敏度好，步驟簡單，操作方便，適合在基層實驗室推廣。
1.1 標準液的配制
準確吸取適量的黃曲霉毒素標準儲備液，用乙腈溶液稀釋成混合標準工作溶液，濃度 100 ng/mL -20 ℃ 避光保存。準確吸取工作溶液 10 μL、30 μL、50 μL、 70 μL、100 μL、200 μL 在1.5 mL 樣品瓶中，用乙腈—水（20+80）定容至 1.0 mL。其中黃曲霉毒素 B1、 B2、G1、G2 分別為1.0、 3.0、5.0、7.0、10.0、20.0 ng/mL。臨用前配制。
1.2 樣品前處理
1.2.1 啤酒樣品
啤酒樣品倒入燒杯中超聲 10min，除去二氧化碳氣體。準確稱取試樣 5.00 g 于50 mL 離心管中，加入乙腈—水（20+80）至 20.0 mL，渦旋 3 min，8 000 r/min 離心 5 min 取上清液備用。
1.2.2 植物油脂
準確稱取樣品 5.00 g 于50 mL離心管中，加入20.0 mL乙腈—水（20+80），渦旋3min，8 000 r/min 離心5 min 取上清液備用。
1.2.3 固體樣品
準確稱取經(jīng)過磨細（粒度小于2 mm）的試樣 5.00 g 于50 mL 離心管中，加入 20.0mL 乙腈—水（20+80），渦旋 3 min，8 000 r/min 離心5 min 取上清液備用。
1.3 試樣凈化
移取 8.00 mL 提取液至多功能凈化柱的玻璃管內(nèi)，將多功能凈化柱的填料管插入玻璃管內(nèi)并緩慢推動填料管，凈化液就被收集到凈化柱的收集池內(nèi)。取 5 mL 凈化液在 30 ℃下用氮氣緩緩吹至近干，用乙腈—水（20+80）定容至 1.00 mL，渦旋 30 s，過 0.22 μm 濾膜，收集濾液于進樣瓶中，上機測定。
1.4 高效液相色譜條件
色譜柱色譜柱inertsustain C18 柱（填料直徑5μm內(nèi)徑 4.6 mm 柱長 250 mm）柱溫：40℃ 熒光檢測器 激發(fā)波長：360nm發(fā)射波長：440 nm流動相：水+甲醇+乙腈：68+16+16 進樣量：20 μL 流速：1.0 mL/min柱后衍生系統(tǒng)衍生液 0.05 %碘溶液 流速 0.5 mL/min 反應管溫度：70 ℃
2.1 四種黃曲霉毒素色譜圖 由圖可以看出，黃曲霉毒素 G1、G2、B1、B2 在 1.2.4 色譜條件下分離效果良好、沒有其它干擾峰。
2.2 線性與檢出限 分別吸取一定量的標準溶液，用乙腈—水（20+80）配置成一系列標準混合溶液，在0.1 ng/mL—50.0 ng/mL 之間，在1. 4 色譜條件下，以峰面積對濃度作線性回歸分析。結果見表 1。根據(jù)3 倍信噪比（3S/N）結合檢測方法計算出檢出限。由表 1 可以看出黃曲霉毒素 B1、B2、G1、G2 線性關系良好，檢出限能夠達到國家標準 GB2761-2011 《食品中真菌毒素限量》 的要求。
2.3 精密度與回收率
用本法在已知濃度的同一樣品 5.00 g 中加入黃曲霉毒素 G1、G2、B1、B2 混標 10 ng，重復 6 次測定，計算實測含量，測定結果見表 2。由表 2 可知，黃曲霉毒素 G1、 G2、 B1、 B2 各相對標準偏差在 3.87 %～5.00 % 之間，回收率達到 85 %～94 %。說明該方法準確度較好，精密度良好，符合分析要求。
方法二：
趙群等建立了一種使用超高效液相色譜儀LC- 30A測定糧食中黃曲霉毒素的方法。 結果表明，該方法線性良好，相關系數(shù)均大于0.9999；進樣量2μL，儀器檢出限為0.002~0.019μg/L，儀器定量限為0.007~0.065μg/L；玉米樣品加標回收率在 93.9%~104.4%。本方法同普通液相色譜相比具有無需衍生，節(jié)約流動相和時間，操作簡單，準確度和靈敏度高等優(yōu)點。適用于糧食中黃曲霉毒素的快速、準確檢測。
[1] 化學詞典
[2]王志強.高效液相色譜-柱后衍生法測定食品中黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2[J/OL].河南預防醫(yī)學雜志,2018(11):828-831[2018-10-25].https://doi.org/10.13515/j.cnki.hnjpm.1006-8414.2018.11.010.
[3]趙群,徐振斌.超高效液相色譜快速測定糧食中黃曲霉毒素含量[J].糧食科技與經(jīng)濟,2017,42(03):43-45.