7184-60-3/疏螺旋體素的制備方法

背景及概述^[1]

疏螺旋體素（又稱勃利霉素，Borrelidin）是一個(gè)帶有環(huán)戊烷羧酸的和共軛的氰二烯特征結(jié)構(gòu)的十八元大環(huán)內(nèi)酯化合物，最早由Berger等人在1949年從婁徹氏鏈霉菌（Streptomycete rochei）代謝產(chǎn)物中分離得到。疏螺旋體素除了具有廣泛的抗細(xì)菌、抗真菌和抗瘧作用以外，還具有良好的抑制新生血管生成活性（IC50=0.8nM），是目前抗腫瘤藥物研究開發(fā)的熱點(diǎn)化合物之一。

制備^[1]

利用加納鏈霉菌（S.ghanaensis）TRM78-24發(fā)酵并制備疏螺旋體素

接種加納鏈霉菌（S.ghanaensis）TRM78-24少量孢子粉于ISP4培養(yǎng)基中，28℃培養(yǎng)4d，獲得種子液，取2mL（8 %的接種量）種子液接種于小米發(fā)酵培養(yǎng)基內(nèi)發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵條件為：轉(zhuǎn)速180 rpm，初始pH 7.2-7.4，裝液量250mL，發(fā)酵溫度28℃，發(fā)酵7d。收集發(fā)酵液，用四層紗布過濾發(fā)酵液，濕法上樣到大孔樹脂色譜柱（發(fā)酵濾液每100L裝填D101或AB-8大孔樹脂2.0kg）；然后分別用50%乙醇-水溶液、95%乙醇-水溶液洗脫；95%乙醇洗脫液，減壓濃縮去掉溶劑后得到富含疏螺旋體素的95%乙醇浸膏，繼而通過ODS中壓柱色譜，分別用50%甲醇-水及100%甲醇洗脫。100%甲醇洗脫部位繼而用70%甲醇-水制備獲得疏螺旋體素純品，HPLC分析顯示該發(fā)酵液中疏螺旋體素的含量為12.0mg/L，實(shí)際制備量為6.6mg/L。

參考文獻(xiàn)

[1] [中國發(fā)明,中國發(fā)明授權(quán)] CN201610229401.3 一種產(chǎn)生疏螺旋體素的放線菌及其應(yīng)用