手機(jī)掃碼訪問本站
微信咨詢
對苯二甲酸二乙酯(DTP)是一種含苯環(huán)類物質(zhì)，含苯環(huán)類物質(zhì)在化學(xué)工業(yè)中具有廣泛的應(yīng)用，因此形成的工業(yè)廢棄物數(shù)量 較多，且苯環(huán)類物質(zhì)對環(huán)境有一定毒害作用，對生物甚至有致癌致畸作用，因 此，苯環(huán)類物質(zhì)的降解是研究的熱門課題。
采用單一睪丸酮叢毛單胞菌針對對苯二甲酸二乙酯進(jìn)行降 解，主要包括以下步驟：
(1).菌種的培養(yǎng)：將睪丸酮叢毛單胞菌菌種在30?37℃、斜面固體培養(yǎng)基 中培養(yǎng)12?18h，存于4℃冰箱中備用；所述固體培養(yǎng)基的成分是：磷酸二氫鉀 3g/L，磷酸氫二鈉7g/L，氯化銨1g/L，氯化鈉5g/L，硫酸鎂0.25g/L，瓊脂粉 18g/L和底物3g/L；所述底物為對苯二甲酸二乙酯；
(2).底物溶液的配制：按照液體培養(yǎng)基的成分，配制濃度為1?5g/L的底 物溶液5?9份，每份50ml，分別裝在150ml錐形瓶中，121℃下包扎滅菌25min 后，冷卻后備用；所述液體培養(yǎng)基的成分是：磷酸二氫鉀3g/L，磷酸氫二鈉7g/L， 氯化銨1g/L，氯化鈉5g/L，硫酸鎂0.25g/L和底物用量為1?5g/L；
(3).底物的降解：將(1)中的睪丸酮叢毛單胞菌菌種轉(zhuǎn)接到(2)中的底 物溶液中，制得降解液，并于30?37℃、振蕩培養(yǎng)器轉(zhuǎn)速為200r/min的條件下， 振蕩培養(yǎng)、催化降解底物對苯二甲酸二乙酯；
(4).底物降解率的檢測：從未反應(yīng)的零時(shí)開始計(jì)時(shí)，每隔12h，取出一瓶 降解液，95℃水浴滅活5min，冷卻后加入10ml正己烷，充分振蕩，萃取未溶解 的底物，靜置脫泡后，取正己烷層中的液體用正己烷稀釋50?250倍，采用紫外 分光光度計(jì)進(jìn)行400?190nm波長的掃描，根據(jù)240nm處吸收峰的高低，判斷底 物含量變化；
(5).底物降解產(chǎn)物的檢測：從未反應(yīng)的零時(shí)開始計(jì)時(shí)，每隔12h，取出一 瓶降解液，95℃水浴滅活5min，冷卻后加入10ml正己烷，充分振蕩，萃取未溶 解的底物，靜置脫泡后，取水層中的液體用蒸餾水稀釋50?250倍，采用紫外分 光光度計(jì)進(jìn)行400?190nm波長的掃描，根據(jù)240nm處吸收峰的高低，判斷降解 中間產(chǎn)物對苯二甲酸含量的變化；
當(dāng)(4)中的正己烷層與(5)中的水層均無吸收峰時(shí)，認(rèn)為底物降解完全， 且中間產(chǎn)物對苯二甲酸降解完全，底物降解徹底。
[1] [中國發(fā)明,中國發(fā)明授權(quán)] CN201010267597.8 一種對苯二甲酸二乙酯的降解方法