618109-05-0 / 伏立康唑N-氧化物的檢測方法

背景及概述^[1]

伏立康唑(voriconazole，VＲCZ)為新一代廣譜三唑類抗真菌藥，該藥在氟康唑結(jié)構(gòu)丙基骨架上加入一個甲基，并用一個氟代嘧啶環(huán)取代了氟康唑的一個三唑環(huán)，大大增強了其抗菌譜和抗菌活性。伏立康唑是目前臨床上廣泛使用的抗真菌藥物之一，具有抗菌譜廣口服生物利用度高等特點，抗菌譜主要包括急性侵襲性曲霉菌、侵襲性念珠菌屬、足放線病菌屬和鐮刀菌屬等，還可以用于預(yù)防侵入性真菌感染免疫功能低下的患者。但由于伏立康唑藥代動力學(xué)個體差異大，藥動學(xué)具有復(fù)雜性，且與免疫抑制劑如環(huán)孢素A、他克莫司等很多藥物相互干擾作用，其血藥濃度與臨床療效和不良反應(yīng)，如肝功能異常視覺改變或視覺障礙等顯著相關(guān)，因此臨床治療過程需進行伏立康唑的治療藥物監(jiān)測。伏立康唑的主要代謝物為伏立康唑N-氧化物(voriconazoleN-oxide，VNO)，主要通過細胞色素CYP450氧化酶包括CYP3A4、CYP2C19和CYP2C9代謝，其中CYP2C19是主要的代謝酶。伏立康唑N-氧化物抗真菌活性弱，研究表明伏立康唑N-氧化物可以抑制CYP3A4或CYP2C19的體外代謝活性。伏立康唑N-氧化物濃度的測定可能有助于確定伏立康唑向伏立康唑N-氧化物轉(zhuǎn)化的主要代謝途徑中伏立康唑濃度是否存在個體間變異，并進一步評估伏立康唑N-氧化物潛在的副作用。國外相關(guān)文獻報道采用高效液相色譜法對伏立康唑和伏立康唑N-氧化物進行血藥濃度測定，而目前國內(nèi)對伏立康唑的治療藥物監(jiān)測主要采用高效液測定，但未見對其代謝產(chǎn)物伏立康唑N-氧化物進行測定的相關(guān)報道。

檢測方法

有研究建立同時測定人血漿中伏立康唑和伏立康唑N-氧化物濃度的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)方法，并應(yīng)用于臨床伏立康唑的治療監(jiān)測。方法酮康唑為內(nèi)標(biāo)，經(jīng)甲醇沉淀蛋白后進行LC-MS/MS分析。電噴霧離子源，正離子模式監(jiān)測，檢測離子伏立康唑m/z350.1→m/z127.0，伏立康唑N-氧化物m/z366.1→m/z224.0，酮康唑(內(nèi)標(biāo))m/z531.0→m/z82.1;色譜柱為InertsilODS-3(2.1mm×50mm，5μm)，流動相為甲醇∶10mmol/L乙酸銨溶液(90∶10)。運用本法對伏立康唑和伏立康唑N-氧化物血藥濃度測定。結(jié)果伏立康唑和伏立康唑N-氧化物在0.4～10.0μg/mL濃度范圍內(nèi)線性良好(r＞0.999)，最低定量限為0.4μg/mL。批內(nèi)、批間精密度及基質(zhì)效應(yīng)ＲSD均小于15%。樣本儲存和處理過程中，化合物穩(wěn)定良好。23例患者伏立康唑穩(wěn)態(tài)谷濃度為0.4～14.3μg/mL，伏立康唑N-氧化物穩(wěn)態(tài)谷濃度為0.5～7.2μg/mL，個體間差異較大。建立的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)方法操作簡便，特異性強，靈敏度高，可應(yīng)用于臨床治療藥物監(jiān)測。

主要參考資料

[1] 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定人血漿中伏立康唑和伏立康唑氮氧化物濃度及其臨床應(yīng)用