574-25-4 / 6-疏基嘌呤核苷的制備方法

背景及概述^[1][2]

(脫氧)核苷是由結(jié)合于核糖或脫氧核糖的堿基如嘌呤或嘧啶組成的糖基胺，核糖或脫氧核糖是環(huán)狀戊糖。它們的實(shí)例包括胞苷、尿苷、腺苷、鳥(niǎo)苷、胸苷和肌苷。核苷類似物被廣泛用作抗病毒劑和抗癌劑，因?yàn)樗鼈冊(cè)赗NA或DNA合成中能夠用作反轉(zhuǎn)錄酶抑制劑或鏈終止劑。核苷磷酸化酶是廣泛分布于哺乳動(dòng)物細(xì)胞和細(xì)菌中并在核苷代謝補(bǔ)救途徑中起關(guān)鍵作用的轉(zhuǎn)移酶。它們具有雙重功能。在一方面，它們?cè)跓o(wú)機(jī)磷酸鹽存在下催化核糖核苷或脫氧核糖核苷的糖苷鍵的可逆切割，目的是生成堿基和核糖-1-磷酸或脫氧核糖-1-磷酸。在另一方面，這些酶催化嘌呤或嘧啶堿基和核苷之間的磷酸依賴的戊糖轉(zhuǎn)移，即轉(zhuǎn)糖基反應(yīng)，以產(chǎn)生具有不同堿基的核苷。6-疏基嘌呤核苷為核甘的一種。

制備^[1]

6-巰基嘌呤核苷如前述進(jìn)行制備。將1ml轉(zhuǎn)糖基活性約為12個(gè)單位/ml細(xì)胞裂解物的催化劑（細(xì)胞裂解物）加入至150ml溶液中，所述溶液在80℃下-5mM6-巰基嘌呤，和-30mM磷酸鉀緩沖液，pH7。該測(cè)定使用上文所述的條件在作為共溶劑的10%（v/v）DMSO中進(jìn)行。在80℃下5小時(shí)后，應(yīng)用具有3000-Da截留值的Amiconultra-4CentrifugalFilterDevices（Millipore，Bedford，MA）通過(guò)在4℃以2000×g離心30分鐘將所述反應(yīng)混合物過(guò)濾，并回收濾液。所述反應(yīng)的生物轉(zhuǎn)化產(chǎn)率高于50%。將得到的6-巰基嘌呤核苷（6-巰基嘌呤核糖核苷和6-巰基嘌呤脫氧核糖核苷）通過(guò)HPLC進(jìn)行分析。

主要參考資料

[1] (CN102770532) 用于核苷合成的熱穩(wěn)定生物催化劑結(jié)合物