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伊馬替尼雜質(zhì)F中文別名：伊馬替尼(吡啶)-N-氧化物，英文別名CGP 72383；伊馬替尼雜質(zhì)F存在于甲磺酸伊馬替尼片的生產(chǎn)過程，甲磺酸伊馬替尼片中雜質(zhì)F的測(cè)定液相色譜質(zhì)譜法。甲磺酸伊馬替尼片；化學(xué)名稱；4-[(4-甲基-1-哌嗪)甲基]-N-[4-甲基-3-[[4-3-吡啶-2-嘧啶]氨基]苯基] -苯胺甲磺酸鹽，適應(yīng)癥為治療費(fèi)城染色體陽(yáng)性的慢性髓性白血病(Ph+CML)的慢性期，加速期或急變期，用于治療不能切除或發(fā)生轉(zhuǎn)移的惡性胃腸道間質(zhì)腫瘤(GIST)的成人患者，在該藥合成過程中，會(huì)產(chǎn)生基因雜質(zhì)F，按照EP規(guī)定采用LCMS對(duì)某制藥公司提供的樣品進(jìn)行了分析測(cè)定，對(duì)相關(guān)藥物分析研發(fā)人員有一定的參考意義，利用液相色譜質(zhì)譜儀檢測(cè)甲磺酸伊馬替尼片中雜質(zhì)F的含量，分析與驗(yàn)證該方法的可行性，使其達(dá)到藥典規(guī)定的要求。兩者結(jié)構(gòu)式如下：
針對(duì)伊馬替尼雜質(zhì)F，開發(fā)一種分析方法，采用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)合使用的方法，用有機(jī)溶劑和水的混合相溶解樣品，然后再以乙腈和pH=3.5的甲酸銨作為流動(dòng)相，在十八烷基鍵合硅膠色譜柱上進(jìn)行梯度洗脫，這個(gè)方法簡(jiǎn)單有效地解決了雜質(zhì)F檢測(cè)靈敏度不高，專屬性不強(qiáng)，更高效的分離并檢測(cè)出伊馬替尼雜質(zhì)F。
本技術(shù)的具體方案如下所示：
（1）采用高效液相色譜-質(zhì)譜法連用，以0.01%-0.05%甲酸乙腈溶液和甲酸銨緩沖液作為流動(dòng)相，在十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱上進(jìn)行梯度洗脫。
（2）溶解樣品所用的稀釋液，乙腈和水的比例是20:80；
（3）所選用的甲酸銨緩沖鹽的pH值為3-4，優(yōu)選的pH值為3.4-3.5；
（4）甲酸銨的濃度范圍為0.6g/l-1.2g/l；
（5）色譜的檢測(cè)條件為：流動(dòng)相洗脫速率為0.8-1.2ml/min;色譜柱的溫度為30℃-40℃；
（6）樣品進(jìn)樣量為10ul。
本分析方法的效果和優(yōu)點(diǎn)是：
（1）可以非常有效地分離出甲磺酸伊馬替尼與伊馬替尼雜質(zhì)F，空白稀釋液不會(huì)干擾雜質(zhì)F的檢測(cè)，該分析方法專屬性很強(qiáng)，而且比較快速；
（2）該分析方法相對(duì)而言操作比較簡(jiǎn)單；
（3）該分析方法能夠?qū)谆撬嵋榴R替尼與伊馬替尼雜質(zhì)F進(jìn)行定量，而且還具有很高的靈敏度，檢測(cè)限位0.02ppm、定量限位0.05ppm。
化合物N-（5-氨基-2-甲基苯基）-4-（3-吡啶基）-2-嘧啶胺是合成甲磺酸伊馬替尼的中間體，屬于潛在的基因毒性雜質(zhì)。在歐洲藥典（EP8.4）甲磺酸伊馬替尼原料藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，將化合物N-（5-氨基-2-甲基苯基）-4-（3-吡啶基）-2-嘧啶胺命名為伊馬替尼雜質(zhì)F，并且規(guī)定其限度不得超過20ppm，并公開了用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用的檢測(cè)伊馬替尼雜質(zhì)F的方法，按照歐洲藥典（EP8.4）的公開的實(shí)驗(yàn)條件，來配制不同濃度的伊馬替尼雜質(zhì)F的對(duì)照品，檢測(cè)限以S/N≥3計(jì)，定量限以S/N≥10計(jì)，確定該方法伊馬替尼雜質(zhì)F的檢測(cè)限為0.1ppm、定量限為0.25ppm。
建立LC-MS法來測(cè)定甲磺酸伊馬替尼中基因毒性雜質(zhì)的含量。其具體的實(shí)驗(yàn)方法為：采用Inertsil ODS-3 C18色譜柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流動(dòng)相A為10 mmol.L-1甲酸銨溶液（用甲酸調(diào)pH至3.2）,流動(dòng)相B為甲醇,然后再梯度洗脫（0～10 min,45%B;10～17 min,45%→80%B;17～22 min,80%B;22～23 min,80%→45%B;23～33 min,45%B）;流速為1.0 mL.min-1;柱溫為35℃;采用正離子模式采集數(shù)據(jù)。結(jié)果：雜質(zhì)507-00進(jìn)樣是在0.018～0.734 ng范圍內(nèi),與峰面積呈良好線性關(guān)系,線性方程為Y=8.909×104X-453.2,r=0.9999;檢測(cè)限0.007 ng;定量限為0.018 ng;平均回收率為90.9%,RSD為3.6%（n=9）。最終結(jié)論為本方法簡(jiǎn)便準(zhǔn)確,可用于甲磺酸伊馬替尼中基因毒性雜質(zhì)的檢測(cè)。
[1]江蘇豪森藥業(yè)集團(tuán)有限公司.伊馬替尼基因雜質(zhì)的高靈敏度分析方法:中國(guó),CN201610139151.4[P].2016-07-20.
[2] 劉俊華, 鐘雅妮, 熊淵, et al. LC-MS測(cè)定甲磺酸伊馬替尼中基因毒性雜質(zhì)的含量[J]. 藥物分析雜志, 2013(7):1168-1170.