54-64-8 / 硫柳汞鈉的制備方法及其在生物試劑中的應(yīng)用

背景及概述^[1]

硫柳汞鈉，又名乙基汞硫代水楊酸鈉，其具有消毒、抑菌和防腐等作用，廣泛用于制藥、化妝品等領(lǐng)域，是一種相對(duì)高效而毒性比較小的常用試劑。醫(yī)藥上用作外科消毒劑。農(nóng)業(yè)上用作殺菌劑。由硫代水楊酸與氫氧化乙基汞堿溶液反應(yīng)而得。

制備^[1]

東德專利Ger(East)49843(1966)公開了一種由硫柳汞酸制備硫柳汞鈉的方法，其中具體公開了將硫柳汞酸溶于異丙醇中，攪拌下加入等當(dāng)量的異丙醇鈉溶液，并加熱到80℃，趁熱過濾，冷卻結(jié)晶，得到硫柳汞鈉產(chǎn)品。但是這種方法中沒有公開硫柳汞酸的制備以及提純方法，而硫柳汞酸的純度會(huì)直接影響所制得的硫柳汞鈉的純度。此外，制備過程中使用的異丙醇鈉也不容易從反應(yīng)產(chǎn)物中除干凈。

CN200910092504.X 提供一種反應(yīng)條件容易控制、產(chǎn)率高、時(shí)間短、副產(chǎn)物容易分離且純度高的硫柳汞鈉制備方法。所述方法包括下述步驟：

(1)氯乙基汞的制備

以氯化汞和一氯二乙基鋁為原料，制備氯乙基汞；

(2)硫柳汞酸的制備

將步驟(1)中得到的氯乙基汞配制成堿液，在攪拌條件下加入到硫代水楊酸鈉溶液中，然后加酸將PH值調(diào)節(jié)到8～2，進(jìn)行酸析，最后，固液分離得到硫柳汞酸；

(3)硫柳汞鈉的制備

使步驟(2)所得硫柳汞酸與含有鈉離子的堿性溶液反應(yīng)，制得硫柳汞鈉。

本發(fā)明所述方法優(yōu)選在暗的光線下進(jìn)行，更優(yōu)選在避光條件下進(jìn)行。

根據(jù)本發(fā)明的方法，其中使用了酸析的方式從氫氧化乙基汞溶液中酸析沉淀出氯乙基汞，并對(duì)沉淀物進(jìn)行多次洗滌，使得得到的原料物質(zhì)氯乙基汞的純度達(dá)到了98％以上，為后續(xù)得到高純度的硫柳汞鈉提供了好的原料基礎(chǔ)。進(jìn)一步地，使用本發(fā)明方法制備的氯乙基汞與硫代水楊酸在堿液存在的條件下制備得到的硫柳汞酸其純度也達(dá)到了98％以上。此外，在由硫柳汞酸制備硫柳汞鈉的步驟中使用了易揮發(fā)的乙醇，使得產(chǎn)物的純度得到了進(jìn)一步的控制。

應(yīng)用 ^[3-4]

一、用于制備一種抗原包被板保護(hù)劑

CN201110206807.7提供一種抗原包被板保護(hù)劑的配方，該配方合理，保護(hù)效果明顯，可以用于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)中抗原(或抗體)包被板的處理，延長包被板的使用期限。該抗原包被板保護(hù)劑由以下原料按重量百分比配制而成：

制備方法，其步驟是：

A、配制濃度為0.024％的tris水溶液，用鹽酸調(diào)PH值為7.2～7.6，即為tris- 鹽酸緩沖溶液。

B、將tris-鹽酸緩沖溶液置磁力攪拌器上室溫(20～25℃，以下相同)攪拌， 向溶液中依次加入低聚糖、大分子物質(zhì)、多元醇、吐溫-20、硫柳汞鈉。

C、攪拌均勻后，置2～8℃冷藏保存。短期內(nèi)不用，可分裝置-20℃凍存。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點(diǎn)和效果：

本發(fā)明的保護(hù)劑原料易于獲得，配制成本低，使用方法簡(jiǎn)便，性狀穩(wěn)定。實(shí)踐表明，用該抗原包被板保護(hù)劑處理的抗原或抗體包被板，保存期可明顯延長，提高了酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)技術(shù)的商業(yè)價(jià)值。此外，該抗原包被板保護(hù)劑同時(shí)可以起到封閉效果，無需再用其它封閉液處理和洗滌，簡(jiǎn)化了抗原或抗體包被板的生產(chǎn)工藝。

二、制備一種抗體保存液

CN201810404684.X提供一種抗體保存液及其制備方法，以解決上述背景技術(shù)中提出的問題。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：一種抗體保存液，由如下組份制得：磷酸氫二鈉2.3～3.5份、磷酸二氫鈉0.23～0.35 份、氯化鈉6～12份、牛血清白蛋白5～15份、酪蛋白鈉0.8～4.5份、乙二胺四乙酸二鈉3～ 4.5份、聚乙二醇4000 5～15份、甘油2～5份、吐溫-20 1.5～4.5份、硫柳汞鈉0.5～1.5份、慶大霉素0.05～0.1份、水900～1000份，所述保存液pH值為7.0～8.0。

制備方法，包括以下步驟：

步驟1．分別稱磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、氯化鈉、聚乙二醇4000、乙二胺四乙酸二鈉、硫柳汞鈉，加入到900～1000份的純化水或注射用水或蒸餾水中；

步驟2．充分?jǐn)嚢?，使其完全溶解?/p>

步驟3．加入稱量好的酪蛋白鈉，均速攪拌至完全溶解；

步驟4．加入稱量好的牛血清白蛋白，均速攪拌至完全溶解；

步驟5．分別加入量取好的甘油 、吐溫-20、慶大霉素，均速攪拌均勻；

步驟6．調(diào)節(jié)pH值至7.0～8.0；

步驟7．根據(jù)需要分裝至相應(yīng)容器中備用。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：

1、該抗體保存液可以維持多種抗體分子的穩(wěn)定性，最大程度地保持抗體的生物活性，延長抗體分子的保存期，便于多種實(shí)驗(yàn)或工業(yè)生產(chǎn)中不同用途的使用。

2、該抗體保存液所用組分均為科學(xué)實(shí)驗(yàn)或相關(guān)醫(yī)藥生產(chǎn)領(lǐng)域常見的試劑，容易采購、成本不高，而維持抗體活性的作用突出，與常用的含牛血清白蛋白的磷酸鹽緩沖液相比，有明顯優(yōu)勢(shì)。

主要參考資料

[1] CN200910092504.X 一種制備硫柳汞鈉的方法

[2] CN201110206807.7 一種抗原包被板保護(hù)劑及制備方法

[3] CN201810404684.X 一種抗體保存液及其制備方法