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煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸又稱輔酶Ⅱ，脫氫酶輔酶的一種。其為煙酰胺核苷-3′，5′-二磷酸與腺嘌呤核苷酸的縮合物。有氧化型和還原型兩種形式，分別簡寫成NADP+和NADPH+H+。含有維生素B5，在氧化還原反應(yīng)中的作用機(jī)制與煙酰胺腺嘌呤二核苷酸的相同。其為一些不需氧脫氫酶的輔酶，在生物體內(nèi)起傳遞氫的作用。煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate，NADP)是一種輔酶，其廣泛存在于生物界并參與眾多生理過程；研究顯示，所述煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸NADP在細(xì)胞內(nèi)主要被還原為NADPH，后者是細(xì)胞內(nèi)重要的抗氧化成分，同時(shí)還參與合成代謝過程。
近年來的基礎(chǔ)與臨床研究證實(shí)，氧化應(yīng)激損傷是糖尿病腎病的主要發(fā)病機(jī)制之 一，利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)在腎臟過表達(dá)抗氧化酶，如超氧化物歧化酶(SOD)或過 氧化氫酶 (catalase)，可以明顯改善糖尿病腎臟損傷?；诂F(xiàn)有技術(shù)的研究基礎(chǔ)與現(xiàn)狀，CN201610070262.4提供化合物煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate，NADP)新的藥用用途，具體涉及化合物煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸NADP在制備防治糖尿病腎病藥物中的用途。
CN201610070262.4通過體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)及體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，證實(shí)了所述NADP能減輕高糖對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷、改善糖尿病小鼠腎臟損害，進(jìn)一步可用于制備防治糖尿病腎病的藥物。本發(fā)明所述的制備的藥物可采用腹腔注射的途徑使用，使用的NADP的劑量為5- 20mg.kg-1.d-1，開始使用時(shí)間優(yōu)選為糖尿病確診開始，能對(duì)糖尿病腎病起到預(yù)防和治療作用。本發(fā)明為臨床防治糖尿病腎病、改善腎臟病變提供了新的靶點(diǎn)與思路，證實(shí)了改善腎臟的氧化應(yīng)激在糖尿病腎病防治中的重要作用。
肌酸激酶同工酶測定試劑盒(選擇性抑制法)用于測定人體血清或血漿中肌酸激酶同工酶的含量。血清CK-MB(肌酸激酶同工酶)測定的最重要意義在于診斷急性心肌梗塞。臨床上常以CK-MB超過CK總活性作為急性型肌梗塞的診斷依據(jù)。肌酸激酶是細(xì)胞內(nèi)能量轉(zhuǎn) 運(yùn)、代謝起著至關(guān)重要的激酶。肌酸激酶同工酶是肌酸激酶的一種同工酶，是在翻譯后修飾 過而生成的，主要存在于心肌細(xì)胞中(還有少量存在于骨豁肌、腸道、舌頭、前列腺以及子宮中)，是心肌能量代謝途徑中非常重要的肌酸激酶，由兩個(gè)亞基組成，代表肌肉和大腦。
肌酸激酶同工酶的檢驗(yàn)原理為肌酸激酶(CK)主要的同工酶包括CKMB、CKBB、CKMM， 因?yàn)檎Ｑ逯袔缀鯚oCKBB，抗M亞單位的抗血清可以和CKMM及CKMB中的M亞單位形成抗原 抗體復(fù)合物，從而完全抑制M亞單位的酶活力，將測得的CK活力值乘以2則代表CKMB的活力。肌酸激酶(CK)活力的檢測原理是：CK催化磷酸肌酸與二磷酸腺苷(ADP)反應(yīng)產(chǎn)生三磷酸腺 苷(ATP)與肌酸；偶聯(lián)己糖激酶(HK)及葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PDH)的催化反應(yīng)。HK催化葡 萄糖與ATP反應(yīng)，形成葡萄糖-6-磷酸，G6PDH催化葡萄糖-6-磷酸氧化，形成6-磷酸葡萄糖內(nèi) 酯及NADPH，NADPH生成的速率代表CK活力。
由于抗原是蛋白，本身穩(wěn)定性極差，在室溫條件下小時(shí)內(nèi)會(huì)全部降解.肌酸激酶同工酶在滿足臨床要求后，對(duì)其進(jìn)行穩(wěn)定性評(píng)價(jià)。肌酸激酶同工酶測定試劑盒(免疫抑制法) 要攻克的一個(gè)難點(diǎn)就是試劑穩(wěn)定性，必須滿足37℃熱破14天后各個(gè)性能指標(biāo)還能滿足偏差小于10％的要求。而現(xiàn)有試劑難以達(dá)到上述要求。
CN201711008283.4提供一種肌酸激酶同工酶雙試劑及其制備方法，在37℃保存14天的情況下，本發(fā)明仍保持了較高的試劑穩(wěn)定性，試劑的測值偏差小于10％。所述方法包括如下步驟：
1)稱量N-乙酰半胱氨酸、磷酸肌酸、二磷酸腺苷、三磷酸腺苷、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶、己糖激酶、肌酸激酶同工酶抗體、聚乙烯吡咯烷酮、月桂基二羥乙基氧化胺及異構(gòu)抗壞血酸鈉，溶解于水中，得到混合液，將所述混合液與咪唑緩沖液混合后，加入三(壬苯基)亞 磷酸酯溶解，得到試劑I溶液；
2)稱量煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸與葡萄糖，溶解于水中，得到試劑II溶液。
本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明肌酸激酶同工酶測定試劑盒試劑I中添加了聚乙烯 吡咯烷酮、月桂基二羥乙基氧化胺及三(壬苯基)亞磷酸酯，另外還含有抗氧化劑異構(gòu)抗壞血酸鈉，提高了試劑的保存穩(wěn)定性。經(jīng)過驗(yàn)證，2-8℃下本發(fā)明保質(zhì)期可以長達(dá)一年半，極大的提高了實(shí)際的貨架期，其運(yùn)輸穩(wěn)定性也大大提高。對(duì)于偏遠(yuǎn)山區(qū)樣本量少的鄉(xiāng)鎮(zhèn)醫(yī)院有很大的幫助。且在37℃保存14天的情況下，本發(fā)明仍保持了較高的試劑穩(wěn)定性，試劑的測值偏差小于10％。
[1] 農(nóng)業(yè)大詞典
[2] CN201610070262.4 煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸在制備防治糖尿病腎病藥物中的用途
[3] CN201711008283.4 一種肌酸激酶同工酶雙試劑及其制備方法