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黃酮是一種天然多酚類(lèi)化合物，在人類(lèi)日常食用的水果和蔬菜中大量存在，具有抗氧化、抗癌、抗炎等多種生物學(xué)活性，一直是國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。山奈酚(kaempferol)是一種黃酮類(lèi)化合物，又稱山奈酚-3、山奈素、山奈黃酮醇、百蕊草素III，廣泛存在于水果、蔬菜以及中草藥等天然植物中。近年來(lái)的研究表明，山奈酚具有抗氧化、抗炎、抗癌，防治糖尿病、動(dòng)脈粥樣硬化和骨質(zhì)疏松，以及保護(hù)神經(jīng)、肝臟和心肌，抑制蛋白激酶等多方面的營(yíng)養(yǎng)保健作用。山奈酚作為保健食品、藥品，有著非常廣闊的市場(chǎng)。
山奈酚，化學(xué)名稱為3，5，7，4′-四羥基黃酮，分子式為C15H10O6，相對(duì)分子質(zhì)量為286.23，微溶于水，溶于熱乙醇、乙醚和堿。山奈酚的二苯基丙烷結(jié)構(gòu)決定了其疏水性，C3、C5、C7和C4′的羥基可與氫自由基結(jié)合，增強(qiáng)了其抗氧化活性。山奈酚廣泛分布于韭菜、洋蔥、綠豆、南瓜、馬鈴薯、番茄、草莓等多種蔬菜與水果，以及連翹、迷迭香、金合歡、銀杏葉、含羞草、桂皮等傳統(tǒng)中草藥。
1.1)將30g含量98％以上的二氫楊梅素投入反應(yīng)器中，再加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15％的氫氧化鈉溶液400g，攪拌混合均勻，升溫回流，進(jìn)行水解反應(yīng)；高效液相色譜監(jiān)控，以羥基苯乙酮中間體不再增加為反應(yīng)控制終點(diǎn)，2h后，停止反應(yīng)。降溫至30℃，向反應(yīng)液中緩慢滴加50％的鹽酸溶液，調(diào)節(jié)pH至6.2左右，攪拌2h、靜置1h、過(guò)濾，得到淡黃色粘狀固體。
1.2)向步驟1.1)所得淡黃色粘狀固體中加入95％乙醇150g，升溫回流1h，然后趁熱過(guò)濾得到固體，再向該固體中加入95％的乙醇90g，再次升溫回流打漿1h，降至室溫，靜置2h，然后過(guò)濾、干燥，得到淡黃色固體，即羥基苯乙酮中間體(2-羥基-1-(2，4，6-三羥基苯基)乙酰)17.8g。
2.1)將步驟1.2)反應(yīng)得到的羥基苯乙酮中間體17.8g投入到反應(yīng)瓶中，加入DMF92g，攪拌使得羥基苯乙酮中間體完全溶解。
2.2)向步驟2.1)的溶液中加入脯氨酸3.55g，升溫至65℃并保持溫度不變，將13.9g對(duì)羥基苯甲醛用20gDMF溶解后緩慢滴加到反應(yīng)瓶中，約2h滴完。滴完后將溫度上升至70℃保溫，進(jìn)行催化閉環(huán)反應(yīng)，高效液相色譜監(jiān)控，以二氫山奈酚中間體不再增加為反應(yīng)控制終點(diǎn)，約7h后反應(yīng)結(jié)束。
2.3)將步驟2.2)所得的溶液降至室溫，加入5％的冰乙酸溶液350g，攪拌2h，慢慢析出固體。過(guò)濾，將濾餅用水洗至中性并干燥，得到二氫山奈酚粗品27.6g。
將步驟2.3)所得的二氫山奈酚粗品27.6g投入反應(yīng)瓶中，加入65％的乙醇275ml，攪拌均勻，再加入無(wú)水碳酸鉀6g，通入氧氣，然后升溫回流，進(jìn)行氧化反應(yīng)，高效液相色譜監(jiān)控，以山奈酚不再增加為反應(yīng)控制終點(diǎn)，約8h后反應(yīng)結(jié)束。降至室溫并放置過(guò)夜，過(guò)濾，得到黃色固體，再加入水200g，回流2h后過(guò)濾，濾餅水洗并干燥，得到山奈酚22.3g，含量98％(HPLC)。
據(jù)研究報(bào)道，山奈酚可以顯著抑制還原型輔酶II(triphosphopyridinenucleotide，NADPH)或Fe2+誘導(dǎo)的脂質(zhì)微粒系統(tǒng)中的脂質(zhì)過(guò)氧化，清除超氧化物陰離子，從而具有預(yù)防和治療由這些因素引起的氧化應(yīng)激反應(yīng)的作用。同時(shí)，山奈酚還可以抑制過(guò)氧化氫酶、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶、谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶等抗氧化酶的表達(dá)，從而降低由酒精和多不飽和脂肪酸引起的小鼠肝組織的氧化應(yīng)激反應(yīng)，進(jìn)而對(duì)由此引發(fā)的肝損傷起到一定的保護(hù)作用。此外，山奈酚還能激活血紅素氧合酶1(HO-1)的表達(dá)，抑制誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)及一氧化氮(NO)的產(chǎn)生，從而保護(hù)RAW264.7巨噬細(xì)胞不受脂多糖的損傷。
根據(jù)研究報(bào)道，山奈酚能夠顯著抑制白血病的發(fā)生，以及抑制肺癌、結(jié)腸癌、肝癌、乳腺癌、膀胱癌等多種惡性腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，并誘癌細(xì)胞凋亡；其本身也可以與其他腫瘤治療方法結(jié)合使用，加強(qiáng)腫瘤治療效果。因此，山奈酚可以作為一種潛在的癌癥預(yù)防和治療劑進(jìn)行進(jìn)一步的開(kāi)發(fā)和利用。
研究發(fā)現(xiàn)，山奈酚能夠顯著抑制LPS誘導(dǎo)的人單核細(xì)胞THP-1的MAPK通路的表達(dá)，降低巨噬細(xì)胞衍生趨化因子(MDC)、干擾素誘導(dǎo)蛋白-10(IP-10)、白細(xì)胞介素-8(IL-8)等炎癥因子產(chǎn)生，從而有效抑制炎癥的發(fā)生。
山奈酚能通過(guò)抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)，對(duì)由氧化應(yīng)激引起的神經(jīng)損傷起到一定的保護(hù)作用。山奈酚能夠顯著保護(hù)SHSY5Y神經(jīng)細(xì)胞和主要的神經(jīng)元細(xì)胞不受魚(yú)藤酮的傷害，減少蛋白酶裂解和細(xì)胞核凋亡，ROS水平和線粒體羥基化合物含量也被顯著降低。由此證明，山奈酚具有一定的神經(jīng)保護(hù)功能，可以作為一種潛在的神經(jīng)保護(hù)藥劑進(jìn)行開(kāi)發(fā)和利用。
山奈酚能夠顯著抑制重組人蛋白激酶CK2的活性，而且對(duì)HL-60細(xì)胞內(nèi)CK2的抑制作用強(qiáng)于陽(yáng)性對(duì)照四溴-2-氮雜苯并咪唑。另有研究表明，山奈酚能夠明顯抑制重組人CK2全酶活性，作用效果強(qiáng)于目前已知的CK2抑制劑。由此證明，山奈酚是一種效果很好的蛋白激酶抑制劑。
以山奈酚等黃酮類(lèi)化合物為主要成分的延肝丸一直被亞洲國(guó)家用于治療及預(yù)防肝臟疾病。研究發(fā)現(xiàn)，山奈酚可通過(guò)抑制凋亡蛋白CHOP的表達(dá)，對(duì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)的HL-7702人正常肝細(xì)胞的凋亡起到保護(hù)作用。用山奈酚處理局部缺氧/復(fù)氧(A/R)誘導(dǎo)損傷的心肌細(xì)胞，可以發(fā)現(xiàn)山奈酚能夠通過(guò)沉默調(diào)節(jié)因子1(SIRT1)介導(dǎo)的線粒體途徑，顯著增加Bcl-2的表達(dá)，表現(xiàn)出對(duì)A/R誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用。
檢測(cè)山奈酚對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化模型新西蘭白兔的影響，發(fā)現(xiàn)山奈酚和高膽固醇混合飼養(yǎng)10周后，與高膽固醇單獨(dú)飼養(yǎng)組相比，兔子動(dòng)脈血中細(xì)胞間黏附分子-1(ICAM-1)、血管細(xì)胞黏附分子-1(VCAM-1)、整合蛋白、單核細(xì)胞趨化因子-1(MCP-1)等黏附分子的基因水平和蛋白水平均有顯著降低，證明山奈酚能夠有效降低血管炎癥反應(yīng)，具有防止動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生的潛在功能。此外，山奈酚也是辣木中抗動(dòng)脈粥樣硬化的主要活性成分，辣木已被列為一種潛在的高脂血癥、動(dòng)脈粥樣硬化和心血管疾病的治療劑。
研究發(fā)現(xiàn)，山奈酚能夠顯著改善胰島素刺激下的成熟3T3-L1脂肪細(xì)胞攝取葡萄糖的能力，表現(xiàn)出防治糖尿病的潛在功能。同時(shí)，山奈酚還可通過(guò)降低血糖、改善胰島素敏感度來(lái)維持正常血脂水平；通過(guò)抗氧化、抗炎、抑制醛糖還原酶途徑，在一定程度上抑制2型糖尿病大鼠慢性并發(fā)癥的發(fā)生。
山奈酚能夠激活雌激素受體的活性，促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖，提高成骨細(xì)胞的分化和礦化能力。另有研究發(fā)現(xiàn)，山奈酚能顯著提升去卵巢大鼠的骨密度，減緩大鼠尿液中骨鈣和磷的流失，抑制去卵巢大鼠血清中酒石酸酸性磷脂酶和組織蛋白K的活性。顯微CT結(jié)果表明，山奈酚能夠顯著改善骨質(zhì)疏松大鼠骨小梁形態(tài)結(jié)構(gòu)，證明山奈酚對(duì)去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松有明顯的治療作用，而且其作用機(jī)制可能與抑制骨吸收有關(guān)。
除上述生物功能外，人們發(fā)現(xiàn)，山奈酚還具有抗菌作用，對(duì)金黃色葡萄球菌及綠膿桿菌、傷寒桿菌、痢疾桿菌等多種人體病原菌均有很好的抑制作用，還在止咳、治療白內(nèi)障、抑制生育、抗癲癇、解痙、抗?jié)?、利膽利尿等方面表現(xiàn)出了一定的治療效果。此外，山奈酚還是一種天然的免疫抑制劑，可以減少由T淋巴細(xì)胞過(guò)度活化和增殖所導(dǎo)致的自身免疫病和器官移植排斥反應(yīng)的發(fā)生。
[1] 陳育華,周克元,袁漢堯.山奈酚藥效的研究進(jìn)展[J].廣東醫(yī)學(xué),2010,31(08):1064-1066.
[2] 張雅雯,邵東燕,師俊玲,朱靜,黃慶生,楊慧.山奈酚生物功能研究進(jìn)展[J].生命科學(xué),2017,29(04):400-405.
[3]CN201811455271.0一種山奈酚的制備方法