512-04-9/薯蕷皂素的制備方法

背景及概述^[1][2]

薯蕷皂素被醫(yī)藥界稱為“藥用黃金”，其可以合成皮質(zhì)激素、蛋白同化激素、性激素等數(shù)千種甾體激素類藥物。我國(guó)的薯蕷皂素一直處于主導(dǎo)和壟斷的地位，占領(lǐng)全世界甾體醫(yī)藥原料的97%市場(chǎng)份額。其他發(fā)達(dá)國(guó)家?guī)资陙?lái)雖然致力于尋找和制作替代品，但是由于先天氣候地理?xiàng)l件和原材料的缺陷，導(dǎo)致替代品造價(jià)高昂，產(chǎn)品利用率低等缺點(diǎn)，以至于全世界的發(fā)達(dá)國(guó)家?guī)资陙?lái)被迫只能依賴中國(guó)進(jìn)口。

制備^[1]

2003年以前，我國(guó)普遍采用預(yù)發(fā)酵-酸解工藝生產(chǎn)薯蕷皂素，該工藝與傳統(tǒng)酸直接水解工藝相比較，薯蕷皂素的產(chǎn)率有所提高，但用酸量基本與傳統(tǒng)工藝相當(dāng)，故污染與傳統(tǒng)工藝基本相同。在研究過(guò)程中，人們發(fā)現(xiàn)造成薯蕷皂素生產(chǎn)過(guò)程用酸大，廢水中COD值、BOD值高的根源是：盾葉薯蕷中的薯蕷皂苷在水解為薯蕷皂素的同時(shí)，盾葉薯蕷中的淀粉、纖維素被水解為糖類（單糖、二糖、三糖及多糖）。為了減少酸的用量，李祥等在分析盾葉薯蕷中淀粉、纖維素、木質(zhì)素、薯蕷皂苷等分布及性質(zhì)的基礎(chǔ)上，采用濕法磨漿工藝，將淀粉、纖維素、木質(zhì)素、薯蕷皂苷加以分離，在一定程度上減少了酸的用量，降低了廢水的COD值、BOD值、色度等，回收了盾葉薯蕷中的淀粉、纖維素。2003年在國(guó)家環(huán)保項(xiàng)目的支持下，陜西省環(huán)保局將此技術(shù)用于薯蕷皂素的工業(yè)化生產(chǎn)，在商洛地區(qū)建成以分離為主的薯蕷皂素清潔生產(chǎn)樣板企業(yè)—山陽(yáng)金川封幸化工有限責(zé)任公司，從運(yùn)行情況來(lái)看，該技術(shù)酸、煤、汽油的用量分別為傳統(tǒng)工藝的10%～15%、25%～50%及30%～35%，廢水排放量為傳統(tǒng)工藝的90%，廢水的COD值、BOD值為傳統(tǒng)工藝的10%，可回收盾葉薯蕷中20%～25%的淀粉。但由于該工藝路線較長(zhǎng)，設(shè)備投資大，成本高，且由于回收的淀粉含有泥沙等，限制了回收淀粉的應(yīng)用。為了降低薯蕷皂素的生產(chǎn)成本，LinliQiu等在傳統(tǒng)乙醇萃取技術(shù)的基礎(chǔ) 上，將超聲波技術(shù)引入薯蕷皂苷萃取的研究中，大大地節(jié)約了薯蕷皂苷的萃取時(shí)間，提高了薯蕷皂苷的萃取效率，增加了薯蕷皂素的得率。但由于萃取過(guò)程中乙醇損失較大，安全性差等制約了該技術(shù)的推廣應(yīng)用。劉樹(shù)興等將表面活性劑用于薯蕷皂苷萃取的研究中，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在薯蕷皂素得率不變的情況下，表面活性劑的加入顯著降低了乙醇的體積分?jǐn)?shù)。以表面活性劑十二烷基硫酸鈉為萃取劑、以絮凝技術(shù)為核心的薯蕷皂素生產(chǎn)工藝有效地減少了薯蕷皂素生產(chǎn)過(guò)程中酸的用量，減少了污染，降低了成本。但往往存在薯蕷皂素晶體被十二醇（油狀物）包裹的現(xiàn)象，這一現(xiàn)象導(dǎo)致薯蕷皂素分離困難，得到的薯蕷皂素產(chǎn)品往往純度不高。

CN201410145370.4提供一種高純度薯蕷皂素的分離方法，該方法操作簡(jiǎn)單、環(huán)境友好，能夠有效解決薯蕷皂素分離純化困難的問(wèn)題。

本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)：

一種高純度薯蕷皂素的分離方法，包括粗分離和精處理兩步，所述粗分離具體操作步驟為：

1）將粉碎的盾葉薯蕷浸入十二烷基硫酸鈉溶液中，浸提2～4h后，超聲萃取，然后離心，得薯蕷皂苷萃取液及濾渣；

2）將濾渣繼續(xù)用十二烷基硫酸鈉溶液超聲萃取，然后離心，將離心得到的萃取液與步驟1）得到的薯蕷皂苷萃取液合并，得到薯蕷皂苷總萃取液；

3）按薯蕷皂苷總萃取液：絮凝劑A水溶液=100：（4～10）的體積比，向薯蕷皂苷總萃取液中加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.8%～1.2%絮凝劑A水溶液，待膠團(tuán)形成后停止攪拌，靜置5～20min后，過(guò)濾，得濾渣1及濾液1，再給濾液1加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%～6%的絮凝劑B水溶液，在40～50℃下，靜置1～3h后，離心，得濾液2及濾渣2，合并濾渣1和濾渣2，得到薯蕷皂苷粗品；

其中，所述的絮凝劑A以質(zhì)量分?jǐn)?shù)計(jì)，包括95%～100%的殼聚糖，0%～5% 的黃原膠；所述的絮凝劑B以質(zhì)量分?jǐn)?shù)計(jì)，包括55～60%的棒狀膨潤(rùn)土，40～45%的皂土澄清劑；

4）按每g薯蕷皂苷粗品添加2.5～3mL硫酸的比例，將薯蕷皂苷粗品加入到濃度為1.3～1.8mol/L的硫酸中，在105～108℃下，水解4～6h后，將水解液冷卻并中和后過(guò)濾，水洗濾渣至流出液呈中性后干燥，再將干燥的濾渣經(jīng)回流提取后，冷卻、結(jié)晶，得到薯蕷皂素粗品；

所述精處理具體操作步驟為：

（1）向薯蕷皂素粗品中滴入溫度為60～90℃的水中，充分?jǐn)嚢杈鶆?，然后離心，棄除上層水及油狀物，得到薯蕷皂素；

（2）將純化的薯蕷皂素重復(fù)步驟（1）操作2～4次后，將帶有水分的薯蕷皂素進(jìn)行干燥，得到高純度薯蕷皂素。

應(yīng)用 ^[2-3]

一、含自噬抑制劑和薯蕷皂素的組合藥物及其用途

CN201410521576.2公開(kāi)一種新的治療腫瘤的組合藥物，具體涉及一種含自噬抑制劑和薯蕷皂素的組合藥物及其用途，尤其涉及該組合藥物通過(guò)聯(lián)合給藥或序貫使用在制備治療慢性髓系白血病、急性白血病、淋巴瘤、肝癌或輔助治療伊馬替尼耐藥的腫瘤藥物中的用途。該組合藥物，其由一種或多種安全劑量的細(xì)胞自噬抑制劑和薯蕷皂素組成，其特點(diǎn)在于，自身無(wú)明顯細(xì)胞毒性或?qū)δ[瘤有輔助殺傷作用但能通過(guò)抑制細(xì)胞自噬來(lái)增強(qiáng)薯蕷皂素對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用，增強(qiáng)其療效。本組合藥物，可以通過(guò)薯蕷皂素顯著抑制腫瘤細(xì)胞的增殖并誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，以及誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞發(fā)生細(xì)胞自噬，在薯蕷皂素殺傷腫瘤細(xì)胞中細(xì)胞自噬起到保護(hù)腫瘤細(xì)胞的作用，使抑制細(xì)胞自噬明達(dá)到顯增強(qiáng)薯蕷皂素對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷的效果。

二、一種含有薯蕷皂素的植物鹽

CN201610242016.2提供一種含有薯蕷皂素的植物鹽及其制備方法。本發(fā)明植物鹽具有明顯的降血脂功能；具有明顯降低高血壓患者的血壓的功能；還具有潤(rùn)腸通便的作用。本發(fā)明采取的技術(shù)方案如下：一種含有薯蕷皂素的植物鹽，所述植物鹽包括以下組分：鹽地堿蓬提取物、槐花粉、菠蘿粉、紫蘇粉、紅景天提取物、 覆盆子提取物、薯蕷皂素。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果為：

1、食用本發(fā)明植物鹽，具有明顯的降血脂功能，經(jīng)試驗(yàn)，明顯降低小鼠血清的TC、TG、 LDL-C水平，提高了小鼠血清的HDL-C水平；

2、食用本發(fā)明植物鹽，明顯降低高血壓患者的血壓，有效率為93～99%，顯效率為80～ 87%；

3、食用本發(fā)明植物鹽，明顯改善患者的便秘癥狀，改善便秘的有效率為84～92%；

4、食用本發(fā)明植物鹽，無(wú)任何身體不適的不良癥狀。

主要參考資料

[1] CN201410145370.4 一種高純度薯蕷皂素的分離方法

[2] CN201410521576.2 含自噬抑制劑和薯蕷皂素的組合藥物及其用途

[3] CN201610242016.2 一種含有薯蕷皂素的植物鹽及其制備方法