480-19-3異鼠李素的藥理作用及應(yīng)用領(lǐng)域

背景及概述^[1][4]

異鼠李素是一種黃酮類化合物，是一種有力的抗氧化劑，可清除氧自由基從而避免由于年齡老化而引起的細(xì)胞和組織損傷。異鼠李素是從銀杏、沙棘等藥用植物中分離提純的黃酮類化合物，也廣泛存在于其他多種植物的花、果實(shí)和葉子中，異鼠李素具有保護(hù)心血管（抗心肌缺氧、缺血，緩解心絞痛、抗心律失常、降低血清膽固醇、促進(jìn)血流通暢等）、抗氧化、抗腫瘤、抗炎、抗病毒、抗過(guò)敏及調(diào)節(jié)免疫功能等多種生物活性，特別是在保護(hù)心血管方面具有擴(kuò)張血管降血壓、防治冠狀動(dòng)脈粥樣硬化心臟病、減輕心肌肥厚、抑制血管平滑肌細(xì)胞增生肥大、抗血栓形成等多中作用，具有廣闊的應(yīng)用前景。

藥理作用^[2][3]

1.抗菌抗病毒作用：異鼠李素具有廣譜抗菌作用，廣泛應(yīng)用于細(xì)菌及真菌感染，包括抑制食物中的葡萄球菌、沙門(mén)氏菌、芽孢桿菌、熒光假單胞菌、肉毒桿菌等細(xì)菌的繁殖。有研究顯示被注射含有異鼠李素提取物的細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)和碳水化合物都有一定量的減少，最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡。除此之外，異鼠李素在還具有明顯的抗流感病毒作用，可以直接或者間接抑制病毒的HA和NA基因表達(dá)，抑制病毒引發(fā)的自噬，ROS的產(chǎn)生和EPK磷酸化。異鼠李素對(duì)細(xì)菌引起的皮膚感染、泌尿道感染和消化道感染具有一定治療作用。

2.抗氧化作用：異鼠李素是一種天然的抗氧化劑，可以取代人工合成物質(zhì)作為食品添加劑使用。體內(nèi)試驗(yàn)表明，異鼠李素對(duì)血漿和肝臟中的膽固醇和過(guò)氧化脂質(zhì)具有抗氧化酶活性。

3.抗腫瘤作用：異鼠李素通過(guò)PI3K-Akt-mTOR路徑來(lái)抑制結(jié)腸腫瘤細(xì)胞的增長(zhǎng)，對(duì)BEL-7402細(xì)胞有潛在的抗腫瘤活性，線粒體細(xì)胞色素C-caspase-9調(diào)節(jié)著異鼠李素引起的細(xì)胞凋亡。研究表明，異鼠李素能夠通過(guò)降低凋亡抑制基因bcl-2表達(dá)、增加促凋亡蛋白Bax的數(shù)量來(lái)發(fā)揮誘導(dǎo)凋亡作用。異鼠李素可明顯抑制胃癌SGC7901細(xì)胞增殖、降低細(xì)胞端粒酶活性、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，且呈濃度和時(shí)間依賴性?？赡軝C(jī)制為阻滯細(xì)胞G₀期向S期的進(jìn)程，形成G₀阻滯期，造成G₀期細(xì)胞堆積阻滯并阻斷細(xì)胞DNA合成和復(fù)制。異鼠李素對(duì)體外培養(yǎng)的皮膚癌細(xì)胞的增殖具有抑制作用，可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；體內(nèi)研究也表明異鼠李素可以抑制皮膚癌細(xì)胞的增殖，其機(jī)制為異鼠李素在細(xì)胞水平減少癌細(xì)胞蛋白磷酸化程度，有效地調(diào)節(jié)蛋白絡(luò)氨酸酶（PTK）包括表皮生長(zhǎng)因子受體EGFR的活動(dòng)。

4.心血管保護(hù)作用：異鼠李素能夠預(yù)防內(nèi)皮功能障礙，抑制超氧化物的產(chǎn)生和血管緊張素II引起的p47phox過(guò)度表達(dá)，通過(guò)PI3K/AKT活化作用和HO-1誘導(dǎo)作用抑制巨噬細(xì)胞凋亡，以此減輕動(dòng)脈粥樣硬化。

合成方法^[4][5]

合成路徑1:

將2-丁酮與芐基氯混合均勻，加入2,4,6-三羥基苯乙酮和無(wú)水K₂CO₃，加水?dāng)嚢?，將所得的白色混合物和香蘭素溶于無(wú)水乙醇，加入KOH水溶液，鹽酸酸化，得3^’-甲氧基-4^’,5,7-三芐基查爾酮，再將該酮溶于乙酸乙酯，在鈀碳催化下，加氫還原，得3^’-甲氧基-4^’,5,7-三羥基查爾酮，將3^’-甲氧基-4^’,5,7-三羥基查爾酮加入二氯甲烷和丙酮混合溶劑，加入緩沖液攪拌均勻，加入KHSO₄復(fù)合鹽水溶液，得到異鼠李素。這種四步合成方法工藝操作簡(jiǎn)單，生產(chǎn)成本低，所的產(chǎn)品純度高，易于工業(yè)化生產(chǎn)。

合成路徑2：

從沙棘果渣中提取異鼠李素，包括（1）冷提：定量稱取沙棘果渣，加入乙醇后常溫浸提，之后將提取液真空抽濾，收集濾液；濾渣加入乙醇，重復(fù)常溫浸提2次，之后將提取液真空抽濾，收集濾液，棄濾渣；（2）濃縮：將兩次提取的濾液抽入濃縮罐中，減壓回收溶劑，濃縮得浸膏；（3）去油：將所得的浸膏趁熱用二氯甲烷去油，過(guò)濾，得粗晶體；（4）重結(jié)晶：將所得粗晶體用有機(jī)溶劑溶解結(jié)晶，晶體烘干，即得異鼠李素。

應(yīng)用領(lǐng)域^[6][7]

1.用作抗腫瘤藥物成分

異鼠李素常被用作抗腫瘤藥物，一般用于人舌鱗癌、肝癌、肺腺癌、腦膠質(zhì)瘤等疾病的治療。以人宮頸癌細(xì)胞（Hela細(xì)胞）為例，接種細(xì)胞以2×10⁵個(gè)/ml于250ml培養(yǎng)瓶中，第二天隨機(jī)分組加藥，治療組采用含濃度20μg/ml異鼠李素的細(xì)胞培養(yǎng)液來(lái)處理Hela細(xì)胞，陰性對(duì)照組為采用不含異鼠李素的培養(yǎng)液處理Hela細(xì)胞。人宮頸癌細(xì)胞在經(jīng)異鼠李素處理后，細(xì)胞形態(tài)改變、增殖變慢、集落形成率低，³H-TdR摻入減少，細(xì)胞周期分布改變，基因表達(dá)率改變，凋亡率增加和端粒酶活性下降，說(shuō)明異鼠李素使宮頸癌細(xì)胞分化凋亡，并降低人宮頸癌細(xì)胞的DNA合成速率和增殖能力，達(dá)到治療宮頸癌的目的。下圖為MTT法測(cè)定的Hela細(xì)胞對(duì)照組和治療組的生長(zhǎng)情況。

2.用作酪氨酸酶抑制劑

酪氨酸酶使皮膚色素合成中具有多重催化功能的重要酶，兼有加氧酶和氧化酶的雙重功能，是黑色素合成過(guò)程中的限速酶，酪氨酸酶的活性與黑色素合成量密切相關(guān)，在人體內(nèi)的活性增高會(huì)導(dǎo)致雀斑、黃褐斑等黑色素過(guò)渡沉積疾病的發(fā)生。在異鼠李素存在的情況下對(duì)酪氨酸酶進(jìn)行活性測(cè)定，測(cè)得的多巴醌v值在475nm波長(zhǎng)處每分鐘吸光值的變化即v值顯著減小，當(dāng)異鼠李素濃度高于1.5mM時(shí)酪氨酸酶剩余活性在10%以下。下圖為異鼠李素對(duì)酪氨酸酶的抑制影響圖。

主要參考資料

[1] 趙增光, 劉應(yīng)才. 異鼠李素的心血管保護(hù)作用[D]. , 2008.

[2] Kandakumar Settu, Pharmacological Applications of Isorhamnetin，International Journal of Trend in Scientific Research and Development, Volume 1（4）

[3] 李炯, 王剛, 杜士明, 等. 異鼠李素抗腫瘤的作用及機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 山西醫(yī)藥雜志: 上半月, 2011, 40(12): 1215-1217.

[4] 郭文華，肖金霞，張瑜，一種異鼠李素的合成方法，CN 201510755625，申請(qǐng)日2015-11-09

[5] 何珺，楊佳年，康冀川，沙棘果渣中異鼠李素的制備及其應(yīng)用方法，CN 201610527665，申請(qǐng)日2016-07-06

[6] 王正榮，楊春蕾，王躍锜，異鼠李素及其衍生物在治療腫瘤藥物中的應(yīng)用，CN 03117220，申請(qǐng)日2003-01-23

[7] 錢(qián)國(guó)英，樸龍斗，斯越秀，異鼠李素作為酪氨酸酶抑制劑的作用，CN 201210039633，申請(qǐng)日2012-02-21