4547-24-4 / 科羅索酸的應(yīng)用及制備

背景及概述^[1]

科羅索酸(corosoli科羅索酸cid，CRA)，又名2α－羥基熊果酸，為一種天然的五環(huán)三萜酸，存在于對萼獼猴桃、大葉紫薇、枇杷等植物中。因不同植物被某一地區(qū)傳統(tǒng)地運用于不同疾病并可取得療效而引起科學(xué)家們的重視，從而研究提取到其中有效成分包括科羅索酸，近年來研究發(fā)現(xiàn)科羅索酸具有降血糖、減肥、抗腫瘤、抗炎、抗病毒和抗心血管疾病的作用，并進一步研究其作用機理，尋找其發(fā)揮藥物效能的微觀證據(jù)?？屏_索酸作為防治肥胖癥和Ⅱ型糖尿病新藥，已進入美國FDA的Ⅲ期臨床藥效學(xué)評價，作為防治肥胖癥和Ⅱ型糖尿病植物新藥和功能性天然保健食品醫(yī)藥原料，受到人們廣泛關(guān)注。隨著研究的不斷深入，該產(chǎn)品將具有非常廣闊的市場前景。

結(jié)構(gòu)

應(yīng)用^[2]

科羅索酸具有抗炎、抗氧化、降血糖、減肥、抗病毒和抗心腦血管疾病作用，具有廣闊的應(yīng)用前景。

1）呼吸系統(tǒng)癌癥

有研究表明科羅索酸以濃度和時間依賴性的方式，誘導(dǎo)細胞停滯于亞G1期，抑制肺癌A549細胞活力，通過以活性氧(ROS)依賴性方式減少抗凋亡蛋白，增加含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(科羅索酸spase)活性，進而誘導(dǎo)細胞凋亡。體內(nèi)實驗H1也表明，科羅索酸通過抑制信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3(STAT3)的活化，增加浸潤淋巴細胞的數(shù)量，顯著抑制鼠肉瘤模型中的皮下瘤的發(fā)展和肺癌細胞的轉(zhuǎn)移。經(jīng)證實，科羅索酸對人肺癌A549細胞實體瘤具有一定的治療作用，其作用機制可能與抑制腫瘤組織中血管內(nèi)皮生長因子VEGF和CD34蛋白的表達有關(guān)?？屏_索酸可以抑制雞胚絨毛尿囊膜科羅索酸M和卵黃囊膜YSM血管生成，表明科羅索酸對A549的抑制生長作用機制可能是通過抑制腫瘤血管生成而實現(xiàn)的。

2）消化系統(tǒng)癌癥

科羅索酸對人胃癌BGC823細胞的抑制作用呈時間、劑量依賴性，其中可能的機制是抑制NF-KB亞基p65的表達，增加IKBot的表達?？屏_索酸聯(lián)合5一氟尿嘧啶處理胃癌SNU-620細胞可以抑制細胞活力，通過降低Bcl-2，升高Bim，抑制roTOR來增加5-氟尿嘧啶的抗癌活性?？屏_索酸通過與ATP結(jié)合口袋直接相互作用來抑制VEGFR2激酶活性，從而降低對VEGFR2／Src／FAK／cdc42軸的控制，降低F一肌動蛋白的形成和遷移活性，可能是治療肝細胞肝癌(HCC)的新手段。科羅索酸可以提高3TrCP蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性，通過提高LATSl的磷酸化來增強J3TrCP依賴性的YAP的泛素化，放線菌素D(AD)通過升高YAP同時下調(diào)13TrCP來增強科羅索酸誘導(dǎo)的肝癌細胞凋亡。科羅索酸可以通過促進B-聯(lián)蛋白N末端的磷酸化降低結(jié)腸癌細胞內(nèi)B一聯(lián)蛋白的表達，并抑制由腺瘤性結(jié)腸息肉病大腸桿菌APC突變導(dǎo)致的結(jié)腸癌細胞的生長，發(fā)揮其對結(jié)腸癌細胞的抗癌活性。

3）生殖系統(tǒng)癌癥

經(jīng)科羅索酸處理的宮頸癌Hela細胞，Bax蛋白表達明顯增高，而Bcl-2不變，導(dǎo)致Bax／Bcl-2比率增加，線粒體通透性增加，進而誘導(dǎo)細胞凋亡m1?？屏_索酸通過誘導(dǎo)細胞停滯于G2／M期，下調(diào)P13K和Akt蛋白的表達，進而抑制宮頸癌上皮細胞科羅索酸Ski的增殖。作為STArl3的抑制劑，科羅索酸能夠增加上皮卵巢癌細胞對化療藥物的敏感性，增強紫杉醇，順鉑和阿霉素的抗癌作用，并抑制上皮卵巢癌細胞與致瘤性巨噬細胞的細胞一細胞相互作用¨9|?？屏_索酸對乳腺癌細胞MCF-7、MDA—MB-231及正常乳腺細胞MCF一10A均具有明顯抑制作用?？屏_索酸也是通過增加Bax／Bcl-2的比率來誘導(dǎo)人乳腺癌MDA—MB-231細胞的凋亡，可能的機制是調(diào)節(jié)了p38／MAPK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。研究表明人工合成科羅索酸的類似物也對乳腺癌MDA-MB-231細胞起作用，可以使其停滯于有絲分裂期。

4）其他癌癥

科羅索酸以劑量和時間依賴性的方式抑制骨肉瘤MG-63細胞的生存能力，這與科羅索酸spase-3和科羅索酸spase-9的活化，及線粒體膜電位的喪失和線粒體中細胞色素C的釋放有關(guān)，表明科羅索酸是通過激活線粒體途徑誘導(dǎo)骨肉瘤細胞凋亡的。科羅索酸可能通過靶向骨髓來源的抑制細胞(MDSC)的免疫抑制活性，增強阿霉素和順鉑的抗腫瘤作用，可能與降低環(huán)氧合酶-2和CCL2的mRNA表達有關(guān)?？屏_索酸可以劑量依賴性地抑制人早幼粒白血病細胞HL-60的增殖，并能誘導(dǎo)該細胞的分化瞄J。研究心叫表明，科羅索酸通過誘導(dǎo)HL一60細胞染色質(zhì)縮合和DNA斷裂，增強線粒體功能障礙和科羅索酸spase一3、科羅索酸spase一8和科羅索酸spase-9活化，上調(diào)Bid和Bax，而Bcl-2和Bcl—xL不受科羅索酸的影響，科羅索酸可能是治療人類白血病的潛在化學(xué)治療劑。

制備^[1]

枇杷葉總?cè)扑岬姆蛛x制備方法是：以枇杷葉為原料，采用5～15倍枇杷葉干重(W/W)的80～100％親水性有機溶劑水溶液，在pH值4～11條件下，于50～80℃提取1～3次，每次1～3小時，合并提取液，過濾；濾液在pH值>7的條件下靜置陳化、過濾去除不溶物；濾液于50～80℃趁熱進行活性炭脫色，過濾；濾液經(jīng)減壓回收部分溶劑后，調(diào)整pH值至8～12、親水性有機溶劑濃度達20～50％和總?cè)扑釢舛葹?.5～10.0g/L，其中科羅索酸濃度達0.2～5.0g/L。

科羅索酸的樹脂富集純化方法是：所述步驟中的枇杷葉總?cè)扑崛芤航?jīng)大孔吸附樹脂吸附科羅索酸至飽和，先用不少于1倍樹脂量(V/V)的純水洗去未被吸附的枇杷葉總?cè)扑釟埩袅弦汉筒簧儆?倍樹脂量(V/V)的25～55％親水性有機溶劑水溶液洗去吸附力較科羅索酸弱的雜質(zhì)，再用不低于3倍量(W/W)的40～60％親水性有機溶劑水溶液，在pH值8～12條件下，以1～3倍樹脂量(V/V)/小時的流速洗脫科羅索酸；洗脫液在-0.06～-0.095MPa、50～80℃條件下，經(jīng)減壓回收部分溶劑后，加入科羅索酸溶解度調(diào)節(jié)劑，控制洗脫液體系中親水性有機溶劑終濃度≤50％和pH值≤7，緩慢冷卻至開始析出科羅索酸結(jié)晶、4～10℃冷藏、靜置養(yǎng)晶、過濾，得科羅索酸粗品。

科羅索酸的結(jié)晶純化方法是：50～80℃條件下，科羅索酸粗品用不低于3倍量(W/W)的親水性有機溶劑充分萃取科羅索酸，過濾，濾液緩慢冷卻至開始析出科羅索酸、4～10℃冷藏、靜置養(yǎng)晶、過濾、室溫條件下水洗，得科羅索酸結(jié)晶。

主要參考資料

[1] CN201310144494.6一種科羅索酸的制備方法

[2] 科羅索酸在抗腫瘤方面的研究進展

[3] CN200710009556.7從枇杷葉中分離制備科羅索酸的方法