4091-99-0/2′,7′-二氯熒光素二乙酸酯的應用

背景及概述^[1]

2',7'-二氯熒光素二乙酸酯是一種熒光探針，作為一種非極性化合物，能夠迅速擴散到細胞內(nèi)，細胞內(nèi)的酯酶將其水解為非熒光的二氯熒光素（DCFH），從而使探針被裝載到細胞內(nèi)。

應用舉例^[1]

CN201610307068.3報道了卷煙煙氣的體外毒理學研究，具體是一種卷煙煙氣有害成分誘導細胞氧化應激ROS的測定方法。卷煙煙氣是一種復雜的氣溶膠，煙氣中的化學成分多達8000余種，同時包含有 1014-1016個自由基，具有氧化性。卷煙煙氣中氧化性物質(zhì)會誘導細胞內(nèi)活性氧（ROS）的增加，誘導機體產(chǎn)生的ROS會對細胞內(nèi)蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和遺傳物質(zhì)（DNA）等造成損傷。測定方法特征在于：是利用熒光探針2',7'-二氯熒光素二乙酸酯(DCFH-DA)檢測細胞氧化損傷后胞內(nèi)活性氧ROS水平，包括以下具體步驟：1)配置實驗試劑；2)細胞接種培養(yǎng)；3)、DCFH-DA探針裝載；4)、卷煙煙氣有害成分染毒；5)、ROS檢測。機理是DCFH-DA作為一種非極性化合物，能夠迅速擴散到細胞內(nèi)，細胞 內(nèi)的酯酶將其水解為非熒光的二氯熒光素（DCFH），從而使探針被裝載到細胞內(nèi)，在ROS存在的條件下，DCFH被氧化生成熒光物質(zhì)DCF，發(fā)出綠色熒光，熒光強度與細胞內(nèi)活性氧水平成正比。本發(fā)明的最大特點是可快速、靈敏地檢測卷煙煙氣有害成分誘導的細胞氧化損傷程度，對研究卷煙煙氣有害成分對于誘導細胞內(nèi)活性氧ROS的影響有非常重要的意義。

參考文獻

[1] [中國發(fā)明] CN201610307068.3 卷煙煙氣有害成分誘導細胞氧化應激ROS的測定方法