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黃豆黃苷是大豆異黃酮的一種糖苷型化合物，在大豆胚芽中含量較高，約占異黃酮總量的40％。大豆異黃酮是大豆生長過程中形成的一類次級代謝產(chǎn)物，是一類具有生物活性的黃酮類化合物。大豆異黃酮具有與雌激素相似的結(jié)構(gòu)，又被稱為植物雌激素。大豆異黃酮的雌激素作用影響到激素分泌、代謝生物學(xué)活性、蛋白質(zhì)合成、生長因子活性等，是植物來源的天然抗癌及預(yù)防癌癥因子。
我國大豆資源豐富，種植面積廣泛，因此大豆及其副產(chǎn)物的研制開發(fā)具有很大的發(fā)展?jié)摿?。資料顯示，大豆收獲后的大豆莖葉在我國的利用率較低，一部分被用作飼料原料，尚不到總產(chǎn)量的30％，大部分被廢棄在田間地頭，既造成了資源浪費(fèi)，又導(dǎo)致環(huán)境被污染。因此，對大豆葉進(jìn)行合理利用進(jìn)而創(chuàng)造價值，具有深遠(yuǎn)的社會意義。大豆籽實(shí)中大豆異黃酮的提取工藝研究已有大量報道，但是大豆葉中大豆異黃酮的提取尤其是單一化合物的提取純化及其功效研究罕見報道。
CN201810756493.X提供了從大豆葉提取純化黃豆黃苷的方法，大豆葉黃豆黃苷具有良好的降血脂、降血糖功效。為解決以上技術(shù)問題，本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：大豆葉黃豆黃苷的提取純 化方法是按以下步驟進(jìn)行的：
步驟(1)、將干燥的大豆葉粉碎，過篩，加入10倍重量的去離子水，浸泡至少24h；
步驟(2)、然后超聲提取至少20min，再加熱萃取，離心除去固形物，獲得上清液；
步驟(3)、步驟(2)獲取的上清液用石油醚和去離子水進(jìn)行分液萃取，萃取后水層 再次用乙酸乙酯分液萃取，得乙酸乙酯提取物；
步驟(4)、乙酸乙酯提取物經(jīng)硅膠色譜分離純化，以石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，經(jīng)硅膠薄層色譜檢測后合并，經(jīng)高效液相色譜檢測，即得。
制備舉例：
步驟(1)將干燥大豆葉粉碎，過60目篩，加入10倍重量的去離子水，浸泡24h；
步驟(2)置于功率100W的超聲波條件下提取20min，再置于60℃條件下萃取1h，以 1000rpm的速率離心除去固形物，獲得上清液；
步驟(3)將步驟(2)獲得的上清液以石油醚和去離子水(石油醚和去離子水的體積 比為1:1)進(jìn)行分液萃取，萃取后水層再次與乙酸乙酯以體積比1:1分液萃取，得乙酸乙酯提取物；
步驟(4)將步驟(3)獲得的乙酸乙酯提取物經(jīng)硅膠色譜分離純化，以石油醚-乙酸 乙酯(體積比4:1→3:1→2:1→1:1)進(jìn)行梯度洗脫，洗脫物多次經(jīng)硅膠薄層色譜檢測后合并 相同樣點(diǎn)接受液，經(jīng)高效液相色譜比對確認(rèn)所獲得化合物為黃豆黃苷；
其中，步驟(4)高效液相色譜檢測條件如下：
色譜柱：Develosil C-30-UG-5(4.6i.d.*250mm,野村化學(xué)株式會社,日本)，A溶媒 15％乙腈。所得黃豆黃苷高效液相色譜圖如圖1。
研究證實(shí)黃豆黃苷有多種生物活性作用，其具有一定的降血脂、降血糖功效。黃豆黃苷也具有抗菌，抗病毒作用，補(bǔ)充雌激素作用，可預(yù)防骨質(zhì)疏松癥，防止心腦血管疾病，預(yù)防癌癥和減少腫瘤數(shù)目。減輕或避免因雌激素減少引起的更年期綜合癥，以及具有抗衰老和防止酒精中毒等功效。
[1] CN201810756493.X 大豆葉黃豆黃苷的提取純化方法及其用途