3949-36-8 / 3-乙?；u基香豆素的應(yīng)用

背景及概述^[1][2]

香豆素具有較大的摩爾消光系數(shù)和量子產(chǎn)率，是很重要的綠色熒光染料，經(jīng)過(guò)修飾后用于發(fā)光材料、化學(xué)傳感器以及標(biāo)記生物分子。近幾年利用熒光增強(qiáng)效應(yīng)檢測(cè)活體細(xì)胞中半胱氨酸的研究得到不斷發(fā)展。3-乙?；u基香豆素又稱(chēng)為3-乙酰香豆素；8-乙酰-6,7-二甲氧基香豆素，常溫下為白色固體具有特殊香味，常用為醫(yī)藥和化學(xué)合成中間體，與此同時(shí)，3-乙?；u基香豆素作為香豆素衍生物中重要的代表，被廣泛應(yīng)用于熒光探針檢測(cè)中，具有價(jià)格低廉，靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)。

3-乙酰基羥基香豆素

應(yīng)用^[3]

1.高選擇性高靈敏識(shí)別汞離

制備方法：將300mg(1.47mmol)3-乙?；u基香豆素溶于15mL二氯甲烷中，再加入508mg(3mmol)硫代氯甲酸苯酯常溫?cái)嚢?h，然后利用旋蒸儀進(jìn)行旋蒸過(guò)柱，得到粗產(chǎn)品。如果要得到較純的產(chǎn)品，可以將其過(guò)柱然后在二氯甲烷和石油醚的混合體系(例如v/v，1:10)中進(jìn)行重結(jié)晶得到純品。得到白色純凈產(chǎn)品210mg，產(chǎn)率為42％。

伴隨著探針溶液中Hg2+濃度的增加，熒光強(qiáng)度逐漸增強(qiáng)，且在(0-2μM)Hg2+濃度范圍內(nèi)，Hg2+的濃度與熒光強(qiáng)度成很好的線性關(guān)系。說(shuō)明探針對(duì)汞離子有很好的響應(yīng)，該探針能實(shí)現(xiàn)對(duì)汞離子的靈敏識(shí)別。我國(guó)飲用水標(biāo)準(zhǔn)中汞離子的標(biāo)準(zhǔn)限值為0.001mg/L因此，本探針能較精確地確定待測(cè)樣本中汞離子的含量。

2.半胱氨酸熒光探針

由2，4-二羥基苯甲醛與乙酰乙酸乙酯反應(yīng)得到3-乙酰基羥基香豆素，然后與丙烯酰氯反應(yīng)得到2-(3-乙酰基)香豆素基丙烯酸酯。生成的2-(3-乙?；?香豆素基丙烯酸酯可以與半胱氨酸發(fā)生邁克加成環(huán)化反應(yīng)，釋放出有熒光的3-乙酰基-7-羥基香豆素，從而實(shí)現(xiàn)檢測(cè)。

將2，4-二羥基苯甲醛（1，20mmol），乙酰乙酸乙酯（24mmol）和1mL哌啶加入到30mL無(wú)水乙醇中，加熱至回流，反應(yīng)3小時(shí)后冷至室溫，有綠色固體析出，抽濾，乙醇洗三次，粗產(chǎn)品用乙醇重結(jié)晶得到淡綠色固體2，熔點(diǎn)：237℃，產(chǎn)率91%。

紅外測(cè)定(KBr，cm-1):3482(O-H)，3050(Ar-H)2928(=CH)，1678(C=O)，1620(C=C)，1211(C-O-C)。

在37℃條件下，將1μM的2-(3-乙?；?香豆素基丙烯酸酯分別加入到不同濃度的牛血清溶液（0,0.01,0.05,0.2,0.5,1）中培養(yǎng)20分鐘。熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)熒光強(qiáng)度，結(jié)果顯示2-(3-乙?；?香豆素基丙烯酸酯可成功的應(yīng)用于生物液體中，且血清濃度越大，熒光越強(qiáng)。

主要參考資料

[1] 鄧正江, & 林紅梅. (2005). 3-乙?；?5-羥甲基-7-羥基香豆素治療病毒性肝炎高膽紅素血癥37例. 蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 30(6), 553-553..

[2] 蔣德?tīng)t, 朱廣軍, 鄧汝溫, & 吳集貴. (1995). 3—乙酰乙?；?mdash;4—羥基香豆素希土配合物的合成和性質(zhì). 無(wú)機(jī)化學(xué)學(xué)報(bào), 11(1), 15-18.

[3] 張珍英, 鄧慧敏, & 鄧芹英. (2008). 香豆素類(lèi)新基質(zhì)用于基質(zhì)輔助激光解吸/電離飛行時(shí)間質(zhì)譜對(duì)聚乙二醇的測(cè)定. 分析測(cè)試學(xué)報(bào), 27(11), 1225-1228.