3371-27-5/沒(méi)食子兒茶素的主要應(yīng)用

背景及概述^[1]

茶葉中的兒茶素主要為表型兒茶素，即表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯EG、表沒(méi)食子兒茶素E、表兒茶素沒(méi)食子酸酯ECG、表兒茶素EC，它們約占兒茶素總量的60~80%。其中EG是綠茶茶多酚中含量最高的物質(zhì)，也是目前公認(rèn)的茶葉中最主要的抗氧化成分。然而現(xiàn)有研究已經(jīng)證實(shí)，表型兒茶素的異構(gòu)體如沒(méi)食子兒茶素等在某些方面表現(xiàn)出較強(qiáng)的生理活性，如抗氧化和清除自由基活性等。兒茶素單體化合物主要是從茶葉或茶葉提取物中進(jìn)行提取，常用的分離純化方法有液液萃取、柱層析、中低壓柱色譜、高壓制備液相色譜和高速逆流色譜分離等。兒茶素的分離純化不乏其他方法，也常常采用兩種或多種方法聯(lián)合使用。文獻(xiàn)及專利中常見(jiàn)表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯EG、表兒茶素沒(méi)食子酸酯ECG等的分離純化報(bào)道，但制備沒(méi)食子兒茶素單體化合物的方法較少。公開(kāi)專利以兒茶素單體化合物為原料，經(jīng)高溫加壓熱轉(zhuǎn)化和凝膠介質(zhì)分離等過(guò)程制備非表型兒茶素。如以表沒(méi)食子兒茶素E為原料，制備得到了純度98.7%的沒(méi)食子兒茶素單體化合物，但該方法原料成本高；同時(shí)，在轉(zhuǎn)化過(guò)程中加入鈉鹽或鉀鹽的堿金屬，引入了無(wú)機(jī)鹽等雜質(zhì)，且采用凝膠分離純化的方法，所制備的單體化合物純度較低。鑒于沒(méi)食子兒茶素良好的營(yíng)養(yǎng)保健和生理藥理作用，在茶葉及茶葉相關(guān)制品的質(zhì)量控制、生產(chǎn)工藝的優(yōu)化及其基礎(chǔ)功效學(xué)的研究過(guò)程中，需要高純度的沒(méi)食子兒茶素單體化合物。

應(yīng)用^[2-3]

沒(méi)食子兒茶素具有廣泛的生物活性，如具有抗細(xì)胞增殖(抗癌)、抗氧化、抗炎、抗心血管疾病等活性；還具有防紫外線輻射、減肥、預(yù)防糖尿病、緩解帕金森氏癥等作用。如食子兒茶素對(duì)脂肪細(xì)胞在高濃度葡萄糖條件下吸收葡萄糖的作用，應(yīng)用3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化模型，測(cè)定在脂肪細(xì)胞中沒(méi)食子兒茶素對(duì)葡萄糖吸收的作用和對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化的影響。結(jié)果顯示沒(méi)食子兒茶素可促進(jìn)脂肪細(xì)胞中高濃度葡萄糖(30mmol/L)條件下由胰島素刺激的葡萄糖吸收，加快3T3-L1前脂肪細(xì)胞的分化。沒(méi)食子兒茶素可增加脂肪細(xì)胞葡萄糖吸收并促進(jìn)3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化，提示沒(méi)食子兒茶素可有效改變血糖濃度和改善胰島素抵抗。

沒(méi)食子兒茶素在制備抗良性前列腺增生藥物中的應(yīng)用。采用丙酸睪酮誘導(dǎo)的去勢(shì)大鼠前列腺增生模型，對(duì)眾多候選化合物進(jìn)行篩選，發(fā)現(xiàn)沒(méi)食子兒茶素(GC)能顯著降低模型動(dòng)物的前列腺重量與前列腺指數(shù)，改善前列腺組織病理學(xué)癥狀，顯示出良好的應(yīng)用前景。

制備^[4]

方法1：一種利用二氫楊梅素半合成(+)-沒(méi)食子兒茶素的方法，其特征在于，將二氫楊梅素以甲醇或乙醇為溶劑，以NaBH₄、Pd-C/H₂、Zn-Hg/HCl、NH₂-NH₂或Na-EtOH為還原劑，在室溫-80℃下反應(yīng)1～10h，減壓蒸餾回收溶劑，調(diào)節(jié)pH值2～3，冷卻，使主產(chǎn)物(+)-沒(méi)食子兒茶素結(jié)晶和重結(jié)晶析出。技術(shù)路線如下：

具體步驟為：用NaBH₄還原二氫楊梅素為沒(méi)食子兒茶素：往250mL三口瓶中加入32g(0.1mol)二氫楊梅素，無(wú)水乙醇150mL，在攪拌下和N₂保護(hù)下，加入NaBH₄38g(1mol)，室溫反應(yīng)10h，減壓蒸餾回收乙醇，在冰浴冷和攪拌卻下滴加5MHCl直至pH為2-3之間，同時(shí)加入200mL冰水，析出白色沉淀，抽濾，干燥，再用乙醇-水重結(jié)晶，得白色固體19.4g，產(chǎn)率60.5％。熔點(diǎn)：188-190℃。

方法2：一種制備高純度沒(méi)食子兒茶素GC的方法。本發(fā)明首先取綠茶茶多酚樣品，加適量溶劑溶解；其次取茶多酚溶解樣品適量于密閉容器，高溫轉(zhuǎn)化一定時(shí)間；然后取轉(zhuǎn)化液，采用快速制備液相色譜進(jìn)行分離，收集沒(méi)食子兒茶素GC餾分；餾分通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮制得沒(méi)食子兒茶素GC單體化合物粗品；最后取粗品適量，加一定溶劑溶解；利用高壓制備液相色譜分離純化上述單體化合物粗品，收集沒(méi)食子兒茶素GC餾分；餾分通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮、冷凍干燥和真空干燥后制得沒(méi)食子兒茶素GC高純單體化合物。本發(fā)明采用高溫轉(zhuǎn)化的方法，提高了綠茶茶多酚溶液中沒(méi)食子兒茶素GC的含量。

主要參考資料

[1] CN201610129513.1一種制備高純度沒(méi)食子兒茶素GC的方法

[2] 沒(méi)食子兒茶素促進(jìn)脂肪細(xì)胞吸收葡萄糖研究

[3] CN201110161658.7沒(méi)食子兒茶素在制備抗良性前列腺增生藥物中的應(yīng)用

[4] CN201010612390.X一種利用二氫楊梅素半合成(+)-沒(méi)食子兒茶素的方法