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氨基酸是生物功能大分子蛋白質(zhì)的基本組成單位，能夠在植物或動物組織中合成，也可由蛋白質(zhì)水解得到，其在組織的代謝、生長、維護和修復(fù)過程中起重要作用。作為重要營養(yǎng)素，氨基酸可從食物中獲取，無須通過其他輔助手段補充，但是，在特殊情況下，為了恢復(fù)體內(nèi)代謝平衡，增強免疫力等，就需要額外的補充各種氨基酸。
亮氨酸、異亮氨酸和纈氨酸都是支鏈氨基酸，它們有助于訓(xùn)練后肌肉的恢復(fù)，控制血糖，并給身體組織提供能量。其中，D-亮氨酸是最有效的一種支鏈氨基酸，但是人體自己不能生產(chǎn)，只能通過飲食獲得，但普通食品中幾乎不含D-亮氨酸，D-亮氨酸多出現(xiàn)在細菌的肽聚糖中。因此，D-亮氨酸多通過發(fā)酵法獲得。
發(fā)酵法生產(chǎn)D-亮氨酸多以葡萄糖作為營養(yǎng)物質(zhì)，在發(fā)酵過程中，由于加入的原料糖不能全部被利用，發(fā)酵液還夾帶多糖、非還原糖等不能被發(fā)酵利用的物質(zhì)，因此發(fā)酵結(jié)束后，發(fā)酵液中除存在D-亮氨酸外，還有蛋白質(zhì)、色素、膠體物、原料還原糖、多糖、非還原糖等，以及纈氨酸、異亮氨酸、蛋氨酸等雜氨基酸。
一種D-亮氨酸的提純方法，包括以下步驟：
取D-亮氨酸發(fā)酵液體積135L升溫至80℃，攪拌狀態(tài)下，保溫半小時進行滅活處理，處理結(jié)束后，取樣檢測D-亮氨酸含量為41.89g/L，合計D-亮氨酸5.65kg，控制物料溫度低于40℃，壓力小于0.65MPa，流速220L/h過陶濾，除去菌渣和部分雜質(zhì)，共收集陶濾液120L，取樣檢測濾液中D-亮氨酸濃度為40.91g/L，合計D-亮氨酸4.91kg。
將所得陶濾清液調(diào)節(jié)PH至6，70℃下進行濃縮得到濃縮液，使?jié)饪s液中D-亮氨酸的濃度達到110g/L，向濃縮液中加入NaCl，調(diào)節(jié)濃縮液中的離子強度達到0.25mol/L后，進行梯度降溫，降溫速率為9℃/h，直到濃縮液溫度降至15℃以下，結(jié)晶得到D-亮氨酸濕粉6.72kg；
將D-亮氨酸濕粉溶于25L的PH為9.5的氫氧化鈉水溶液中，充分溶解后，補加純化水至D-亮氨酸濃度為150g/L，此時溶液的體積為30L，向溶液中加入鹽酸溶液，反調(diào)PH為6后，加入KCl調(diào)節(jié)溶液的離子強度達到0.08mol/L，以6℃/h的降溫速率進行降溫，當溫度降至15℃時，攪拌30min進行結(jié)晶，過濾分離結(jié)晶，用與結(jié)晶質(zhì)量相同的5℃的冷水對結(jié)晶進行洗滌，洗滌結(jié)束后，在80℃、真空度為-0.095MPa條件下對結(jié)晶進行干燥，最終得到4.22kgD-亮氨酸晶體。
整個提純過程在潔凈區(qū)生產(chǎn)，所得產(chǎn)品純度為99.3％，水分含量為0.04wt％，收率為74.1％。
CN202011126111.9報道了D-亮氨酸和氯己定組合物的應(yīng)用，尤其涉及D-亮氨酸和氯己定組合物在制備預(yù)防或治療齲病藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明通過實驗研究證明D-亮氨酸增強氯己定對致齲變形鏈球菌的殺菌作用的機制為D-亮氨酸將生物膜狀態(tài)的變形鏈球菌轉(zhuǎn)變?yōu)榉稚顟B(tài)的浮游變形鏈球菌，使變形鏈球菌更易殺滅，從而增強氯己定對變形鏈球菌的殺滅作用，通過在口腔殺菌劑氯己定中添加綠色化合物D-亮氨酸，制備D-亮氨酸和氯己定組合物，殺滅致齲變形鏈球菌生物膜，大大降低氯己定的使用濃度，降低氯己定臨床應(yīng)用的不良反應(yīng)，達到同等的殺菌效果，具有臨床轉(zhuǎn)化前景。
CN201180012935.6報道了一種處理、減少或抑制由細菌引起的生物薄膜形成的方法，所述方法包括：將物品與包含有效量的D-氨基酸的組合物接觸，所述組合物實質(zhì)上不包含所述對應(yīng)的L-氨基酸，由此處理、減少或抑制所述生物薄膜形成，其中所述D-氨基酸選自由D-丙氨酸、D-半胱氨酸、D-天冬氨酸、D-谷氨酸、D-組氨酸、D-異亮氨酸、D-賴氨酸、D-亮氨酸、D-天冬酰胺、D-脯氨酸、D-谷氨酰胺、D-精氨酸、D-絲氨酸、D-蘇氨酸、D-纈氨酸、D-色氨酸、D-酪氨酸及其組合所組成的組。
[1] [中國發(fā)明] CN201910764076.4 一種D-亮氨酸的提純方法
[2] CN202011126111.9D-亮氨酸和氯己定組合物的應(yīng)用
[3] CN201180012935.6用于處理生物薄膜的方法和涂層