28319-77-9 / 甘油磷酯酰膽堿的合成和純化方法

背景及概述^[1]

甘油磷酯酰膽堿，簡(jiǎn)稱(chēng)GPC，是磷脂家族中的一員。對(duì)細(xì)胞膜的健康有著重要作用。甘油磷脂酰膽堿在母乳中含量非常豐富。它能修復(fù)受損大腦功能，提高健康人的大腦功能并且使衰老的大腦重新煥發(fā)活力?？梢宰鳛楸＝∑罚龠M(jìn)大腦中乙酰膽堿和磷脂酰膽堿的生物合成，提高人的記憶能力和認(rèn)知能力，也能有效治療老年癡呆類(lèi)疾病如阿爾茨海默病，被醫(yī)藥界稱(chēng)為“大腦的防衰老營(yíng)養(yǎng)素”。

純化方法^[1]

一種甘油磷酯酰膽堿的純化方法，包括以下步驟：

A、將甘油磷酰膽堿粗品溶解于無(wú)水乙醇中，得反應(yīng)體系溶解液；所述無(wú)水乙醇與甘油磷酰膽堿粗品的質(zhì)量比為6：1。

B、向步驟A中的反應(yīng)體系溶解液內(nèi)加入氯化鈣，攪拌，形成甘油磷酯酰膽堿的鈣鹽復(fù)合物沉淀；所述氯化鈣與甘油磷酯酰膽堿的摩爾比為1：1。沉淀反應(yīng)的溫度條件為室溫，反應(yīng)時(shí)間為12小時(shí)。

C、使步驟B中停止沉淀反應(yīng)的反應(yīng)液降到室溫，過(guò)濾，得濾餅；濾餅用無(wú)水乙醇洗滌。

D、將步驟C中的濾餅放入真空干燥箱中干燥，得到甘油磷酯酰膽堿的鈣鹽。HPLC法測(cè)定純度在98.5％以上。

E、甘油磷酯酰膽堿的鈣鹽溶解于水中，水的用量是甘油磷酯酰膽堿鈣鹽干重的10倍，在室溫下攪拌溶解。如長(zhǎng)時(shí)間攪拌仍難以完全溶解，可以向水溶液中滴加幾滴鹽酸加速溶解(控制溶液在適當(dāng)?shù)乃嵝杂兄谌芙?。體系pH值在3到7之間，以pH值4～6為佳)。

F、步驟E所得的水溶液依次緩慢通過(guò)通過(guò)D001型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂柱除去鈣離子，通過(guò)D201陰離子交換樹(shù)脂柱(或D301陰離子交換樹(shù)脂柱)除去陰離子，得到不含鈣離子的甘油磷酯酰膽堿水溶液。

G、蒸除過(guò)量的水份得到不含鈣離子的甘油磷酯酰膽堿。

合成方法^[2]

步驟1、L?α?甘油磷脂酰膽堿（L?α?GPC）放大的制備

投料配比表

名稱(chēng)分子量 投料量摩爾數(shù) 摩爾比

大豆卵磷脂（PC） 788.13231Kg293.11.4

甲醇鈉 54.02 11.1Kg205.08 1

732樹(shù)脂 180Kg

D311樹(shù)脂180Kg

717樹(shù)脂 180Kg

D152樹(shù)脂 180Kg

甲醇90L+30L

蒸餾水 / 390L

石油醚 90L

操作工藝：

將PC、甲醇鈉、甲醇（90L）室溫下加入100L反應(yīng)釜中，攪拌固體不全溶，加熱到40℃， 保持內(nèi)溫40±5℃反應(yīng)24小時(shí)，TLC檢測(cè)反應(yīng)體系，反應(yīng)完畢后冷卻室溫，過(guò)濾，用甲醇 洗滌濾餅，母液用乙酸(約1024ml)調(diào)pH到5?6，體系于40℃減壓濃縮到一半體積，母液加 入石油醚（18L×5）攪拌，分液，甲醇相40℃減壓濃縮，得到77.16kg棕黃色粘油物。將4 種樹(shù)脂分別裝入到樹(shù)脂柱中各用30L蒸餾水沖洗，待用；再將棕黃色粘油物加入到732樹(shù)脂 柱中用甲醇（30L）沖洗此樹(shù)脂柱，直到洗脫液無(wú)顏色，甲醇舍棄，然后用360L蒸餾水沖 洗，收集洗脫液，洗脫液加入230克活性炭回流脫色30分鐘，將脫色液沖洗D311樹(shù)脂， 收集洗脫液，TLC檢測(cè)洗脫液如上步洗脫液沒(méi)有，則用蒸餾水沖洗樹(shù)脂柱，直到TLC檢測(cè) 無(wú)產(chǎn)品停止收集。再用收集到的洗脫液沖洗717樹(shù)脂柱，收集洗脫液，TLC檢測(cè)洗脫液如上 步洗脫液沒(méi)有，則用蒸餾水沖洗樹(shù)脂柱，直到TLC檢測(cè)無(wú)產(chǎn)品停止收集，再用上步收集到 的洗脫液沖洗D152樹(shù)脂柱，收集洗脫液，TLC檢測(cè)此洗脫液如上步洗脫液沒(méi)有，則用蒸餾 水沖洗樹(shù)脂柱，直到TLC檢測(cè)產(chǎn)品無(wú)停止收集，洗脫液濃縮得到16.66kg淡黃色粘油物，摩 爾收率為22.1%。

步驟2、L?α?甘油磷脂酰膽堿（L?α?GPC）的精制放大

投料配比表

名稱(chēng)分子量投料量

L?α?GPC粗品 257.216.62kg

無(wú)水甲醇83.1L

丙酮 664.8L

操作工藝

室溫下向L?α?GPC粗品（粘油物）16.62kg中加入無(wú)水甲醇，攪拌溶解，再將母液緩慢加 入到丙酮中，快速攪拌15分鐘，停止攪拌室溫靜置24小時(shí)，緩慢析出白色固體，抽濾，得 到白色固體，40℃真空干燥24小時(shí)，得12.02kg。收率為72.2%。

參考文獻(xiàn)

[1][中國(guó)發(fā)明]CN201711481580.0一種甘油磷酯酰膽堿的純化方法

[2] [中國(guó)發(fā)明] CN201310106218.0 L-α-甘油磷酰膽堿的合成方法