26644-46-2 / 嗪氨靈的殘留檢測

背景及概述^[1]

嗪氨靈又稱嗪胺靈，是雜環(huán)類殺菌劑。原藥白色無味結(jié)晶，幾乎不溶于水、堿和酸中。嗪氨靈在氯仿、芳香烴中溶解度很小，稍溶于甲醇和酮類。嗪氨靈在二甲基甲酰胺和N-甲基吡咯烷酮的溶解度為30%和40%。嗪氨靈屬于內(nèi)吸性殺菌劑，用于防治由白粉菌、銹菌、黑星菌等引起的禾谷類銹病和蘋果黑星病，禾谷類、蘋果、葫蘆科白粉病等病害。嗪氨靈以根部澆灌比葉面噴灑效果好，亦用于禾谷類作物拌種處理。它對菌的作用是抑制甾醇的生物合成，干擾膜的生成。嗪氨靈在植株體內(nèi)它損害白粉菌吸器，而不影響孢子萌芽。嗪氨靈對植物安全，對人畜低毒，小鼠急性口服LD₅₀>6000mg/kg，把魚放入50mg/kg溶液中，無中毒表現(xiàn)，對蜜蜂也無毒性。

殘留檢測^[2]

嗪氨靈是一種酰胺類內(nèi)吸殺菌劑，廣泛用于對糧谷、果樹和蔬菜中白粉病、銹病和黑星病的防治。由于它能夠破壞動物體內(nèi)的血紅細胞，許多國家對它的最高殘留限量都有嚴格規(guī)定:歐盟已嚴格制定了505種食品中嗪氨靈的最大殘留量，且最為嚴苛，范圍為0.01～0.05mg/kg;日本規(guī)定了193種食品中嗪氨靈的最大殘留量。王敬等人參考國內(nèi)外文獻方法，對樣品的提取及凈化進行了優(yōu)化，根據(jù)國內(nèi)外對嗪氨靈殘留量的要求，選擇了幾種有代表性的基質(zhì)如糧谷、豆類、水果、蔬菜和食用菌等作為檢測對象，采用液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜法作為分析手段，建立了植物源食品中嗪氨靈殘留量的檢測方法，方法簡單快速、靈敏度高，能夠滿足國際上日益嚴格的農(nóng)藥殘留量的檢測要求。

1.材料與儀器

嗪氨靈(分子式為C10H14Cl6N4O2，CASNo.26644－46－2，純度≥99%)德國Dr.Ehrenstorfer公司;乙腈、甲酸、丙酮、乙酸乙酯、二氯甲烷色譜純，美國Sigma公司;甲苯、無水硫酸鈉和氯化鈉分析純，北京化學試劑公司;PSA固相萃取柱(1000mg，6mL)、石墨化炭黑/氨基固相萃取柱(500mg/500mg，6mL)、石墨化碳黑固相萃取柱(1000mg，6mL)美國Supelco公司;C18固相萃取柱(1000mg，6mL)、QuEChEＲS提取管(內(nèi)含1.5g無水硫酸鈉和6g無水硫酸鎂)、QuEChEＲS凈化管(內(nèi)含150mg無水硫酸鈉鎂，50mgPSA，50mgC18)美國Waters公司;J2ScientificMPSGPC(裝有22gS－X3Bio－Beads填料，粒徑38～75μm)美國J2Scientific公司;實驗用水超純水。ThermoTSQQuantumUltra液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜儀(配電噴霧離子源)美國ThermoFisher公司;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器德國Heidolph公司;PT3100型均質(zhì)器瑞士Kinematica公司;TurboVapLV型氮吹濃縮儀美國Zymark公司;ML204/02分析天平梅特勒－托利多儀器(上海)有限公司;CＲ22GIII型高速冷凍離心機日本HITACHI公司;固相萃取柱裝置美國Waters公司;Milli－Q純化系統(tǒng)美國Millipore公司。

2.標準溶液的配制

2.1標準儲備液精密稱取嗪氨靈標準品10mg置于10mL容量瓶中，用乙腈溶解并定容，配制成質(zhì)量濃度為1000mg/L的標準儲備液，置于棕色試劑瓶中，4℃避光保存。

2.2標準工作溶液準確吸取適量標準儲備液，用乙腈配制成系列標準工作溶液，現(xiàn)用現(xiàn)配。

2.3辣椒和蘑菇基質(zhì)空白標準工作溶液準確吸取適量標準儲備液，用辣椒和蘑菇樣品空白提取液(由3步驟所得)配制成系列基質(zhì)空白標準溶液，現(xiàn)用現(xiàn)配。

3.樣品前處理方法

3.1提取蘋果、葡萄、菠菜、番茄、甘藍、黃瓜和蘑菇:稱取試樣約4g(精確到0.01g)于50mL離心管中，加入5g氯化鈉(既可以促使有機相與水相分層，降低待測物在水相中的溶解度，又可在均質(zhì)過程中起到研磨的作用，提高提取效率)，20mL乙腈，15000r/min均質(zhì)提取2min，4000r/min離心10min，將上清液經(jīng)裝有10g無水硫酸鈉的漏斗過濾至120mL雞心瓶中。再用20mL乙腈重復(fù)提取1次，合并提取液于同一雞心瓶中，于45℃水浴濃縮至近干，待凈化。大米、玉米、小麥、大豆和辣椒:稱取試樣約4g(精確到0.01g)于50mL離心管中，加10mL水潤濕樣品，混勻2min，靜置30min后處理方法與蘋果、葡萄等樣品相同。

3.2凈化用2mL乙腈－甲苯(7+3，V/V)溶解上述步驟中所獲得的濃縮液，過石墨化炭黑/氨基固相萃取柱(使用前用10mL乙腈－甲苯(7+3，V/V)預(yù)淋洗)，再用3mL乙腈－甲苯(7+3，V/V)溶液分3次洗脫，控制流速為0.5mL/min，收集全部流出液，于45℃氮氣吹干。用1.0mL乙腈溶解，過0.22μm有機相微孔濾膜后，待測。

4.儀器條件

色譜柱:ThermoHyperisilGOLDC18色譜柱(100mm×2.1mm，5μm);進樣量:10μL;柱溫:30℃;流動相:A相為0.2%甲酸水溶液，B相為乙腈;流速:300μL/min;梯度洗脫程序如下:0～4.0min，15%B～85%B;4.0～7.0min，85%B;7.0～7.01min，85%B～15%B;7.01～10.0min，15%B。電離方式:電噴霧正離子源(ESI+);檢測模式:MRM;毛細管電壓:3.5kV;離子源溫度:150℃;去溶劑溫度:350℃;鞘氣(N2)壓力:241.3kPa;輔助氣(N2)壓力:55.1kPa;定量離子對435.0＞389.8(碰撞能量:22V)，定性離子對435.0＞214.9(碰撞能量:25V)。

實驗以不含嗪氨靈農(nóng)藥的大米、玉米、小麥、大豆、蘋果、葡萄、黃瓜、番茄、甘藍、菠菜、蘑菇和辣椒為空白樣品基質(zhì)，在不同添加水平上進行加標回收率實驗，其結(jié)果見表 2。從表 2 可看出，每個水平重復(fù)做 10 次，測得方法的回收率范圍為 68.4%～109.0%，相對標準偏差(RSD) 為4.38% ～13.5%，符合規(guī)定的要求。

應(yīng)用本方法對市售的 40 份蔬菜、40 份水果和 10 份糧谷樣品進行測定， 并對實際樣品進行了加標回收測定。結(jié)果在 1 批次菠菜中檢出5.6 μg /kg的嗪氨靈，2 批次甘藍和 1 批次蘑菇中檢出嗪氨靈，濃度在 6.2～16.7 μg /kg之間，均低于 GB 2763－2014《食品安全國家標準食品中農(nóng)藥最大殘留限量》的要求。

參考文獻

[1]農(nóng)業(yè)大詞典

[2]王敬,馬育松,趙中輝,代漢慧,張海超.固相萃取-高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定植物源食品中嗪氨靈的殘留量[J].食品工業(yè)科技,2017,38(02):84-88.