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花青素(Anthocyanidin)又稱花色素,基本結(jié)構(gòu)為2-苯基苯并吡喃型陽離子,常與一個(gè)或多個(gè)葡萄糖形成各種花色苷而廣泛存在于藍(lán)莓、葡萄、紫甘薯、黑加侖、胡羅卜、紫蘇和紅甘藍(lán)等植物中,發(fā)揮抗氧化作用。花青素具有增強(qiáng)免疫功能、抑制腫瘤細(xì)胞生長、保護(hù)肝臟以及有效減輕由氧化應(yīng)激引起的神經(jīng)細(xì)胞損傷等作用。從紫蘇葉中提取花青素的有效成分紫蘇寧和矢車菊素3,5-二葡萄糖苷(矢車菊素雙葡糖苷),刺激誘導(dǎo)人外周血單個(gè)核細(xì)胞,觀察到CD3+T細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、NK細(xì)胞以及NKT細(xì)胞等免疫效應(yīng)細(xì)胞增殖格局的變化。
實(shí)驗(yàn)以紫蘇寧和矢車菊素3,5-二葡萄糖苷(矢車菊素雙葡糖苷)刺激正常人外周單個(gè)核細(xì)胞,刺激培養(yǎng)4、7天以后觀察其T細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞以及NKT細(xì)胞的刺激增殖作用,結(jié)果顯示紫蘇寧和矢車菊素3,5-二葡萄糖苷(矢車菊素雙葡糖苷)對CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞的增殖作用呈現(xiàn)隨刺激物濃度升高而增強(qiáng)的趨勢,矢車菊素3,5-二葡萄糖苷(矢車菊素雙葡糖苷)對NK細(xì)胞具有刺激生長作用,而紫蘇寧與矢車菊素3,5-二葡萄糖苷(矢車菊素雙葡糖苷)等比例混合沒有發(fā)揮互補(bǔ)的刺激作用,初步證實(shí)了紫蘇寧和矢車菊素3,5-二葡萄糖苷(矢車菊素雙葡糖苷)具有誘導(dǎo)CD3+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞和NK細(xì)胞增殖的作用。體外細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間延長會導(dǎo)致其活力下降,紫蘇寧和矢車菊素3,5-二葡萄糖苷(矢車菊素雙葡糖苷)可以抵抗自由基對脂肪、蛋白質(zhì)和核酸的氧化性損害,實(shí)驗(yàn)顯示紫蘇寧和矢車菊素3,5-二葡萄糖苷(矢車菊素雙葡糖苷)對細(xì)胞的刺激增殖作用隨時(shí)間延長而更顯見。但是紫蘇寧和矢車菊素3,5-二葡萄糖苷(矢車菊素雙葡糖苷)在免疫細(xì)胞培養(yǎng)中的作用是刺激細(xì)胞增長還是抗氧化保護(hù)或兼而有之尚待進(jìn)一步證實(shí)。PHA是人T淋巴細(xì)胞非特異性促有絲分裂原,可用于制備CD3AK細(xì)胞。
本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),單個(gè)核細(xì)胞經(jīng)1%PHA刺激4天后,NK細(xì)胞和NKT細(xì)胞的增殖率明顯高于對照組,7天以后,CD3+T細(xì)胞和CD4+T細(xì)胞數(shù)逐漸降低。說明PHA在短期內(nèi)可以刺激細(xì)胞生長,尤其是NK細(xì)胞和NKT細(xì)胞,長期刺激對CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞增殖的效果卻遜于紫蘇寧和矢車菊素3,5-二葡萄糖苷(矢車菊素雙葡糖苷)。人參皂苷Rh2具有誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的逆轉(zhuǎn)和調(diào)節(jié)免疫功能的作用[6-8]。以Rh2作為刺激物,對單個(gè)核細(xì)胞4天誘導(dǎo)培養(yǎng)后可以明顯刺激NKT細(xì)胞增殖(P<0.01),7天則可以刺激CD4+細(xì)胞和CD8+細(xì)胞增殖。2個(gè)時(shí)間段未見對NK細(xì)胞有誘導(dǎo)作用。NKT細(xì)胞是一種特定的異質(zhì)性T細(xì)胞亞群,兼有NK細(xì)胞和T細(xì)胞的某些特征。NKT細(xì)胞在發(fā)揮殺傷作用時(shí)不受MHC限制,激活的NKT細(xì)胞可以釋放大量細(xì)胞因子,增強(qiáng)機(jī)體抗感染和抗腫瘤的作用。本文初步證明人參皂苷Rh2對CD8+T細(xì)胞和NKT細(xì)胞具有增殖效應(yīng)。以花青素、PHA、人參Rh2組合取代細(xì)胞因子誘導(dǎo)免疫效應(yīng)細(xì)胞不僅有效且更經(jīng)濟(jì),具有良好的應(yīng)用前景。過繼性細(xì)胞免疫治療還須考慮Treg細(xì)胞、γδT細(xì)胞、DC細(xì)胞甚至B淋巴細(xì)胞在抗腫瘤過程中所扮演的角色],探究紫蘇寧、矢車菊素3,5-二葡萄糖苷(矢車菊素雙葡糖苷)對上述細(xì)胞的作用同樣具有實(shí)用意義。
紫蘇寧和矢車菊素3,5-二葡糖苷對免疫效應(yīng)細(xì)胞增殖格局的調(diào)節(jié)作用