2353-45-9/固綠FCF的應(yīng)用

概述^[1][2]

固綠FCF(fastgreenFCF，分子式為C37H34N2O10S3Na2)是一種生物染色劑，可作為蛋白質(zhì)的定性標(biāo)記試劑，主要用作實(shí)驗(yàn)室研發(fā)和生物研究過(guò)程中。

應(yīng)用^[1]

1）固綠FCF分光光度法測(cè)定血清蛋白質(zhì)。

在pH1.4的ClarkLubs緩沖介質(zhì)中，固綠FCF與血清蛋白質(zhì)作用在室溫下能迅速結(jié)合形成復(fù)合物，其最大吸收波長(zhǎng)為660nm，比固綠FCF本身紅移了36nm。用分光光度法研究了該結(jié)合反應(yīng)的最佳條件，并在此基礎(chǔ)上建立了測(cè)定蛋白質(zhì)的新方法。在660nm處各蛋白質(zhì)濃度至少在5～70mgL的范圍內(nèi)與吸光度成正比，對(duì)測(cè)定牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)及球蛋白(IgG)的表觀摩爾吸光系數(shù)ε660和桑德?tīng)栰`敏度s分別為7.87×10⁵、9.52×10⁵、1.60×10⁶L·mol^-1·cm^-1和0.083、0.072、0.093μg·cm^-2。除陰、陽(yáng)離子表面活性劑外，其余大部分物質(zhì)不干擾蛋白質(zhì)的測(cè)定。所擬方法具有簡(jiǎn)便、快速、選擇性好、靈敏度高等特點(diǎn)，應(yīng)用于尿液、人血清及含乳飲料中總蛋白的測(cè)定，結(jié)果與考馬斯亮藍(lán)G250法基本一致。

2）固綠FCF分光光度法測(cè)替米沙坦的含量。

在pH6.2的Britton-Robinson緩沖介質(zhì)中，替米沙坦(TMST)與生物染色劑固綠FCF(FGF)反應(yīng)，形成離子締合物，溶液顏色發(fā)生明顯改變，最大正、負(fù)吸收波長(zhǎng)分別位于598、632nm，從而建立光度法測(cè)定替米沙坦。在598、632nm處，替米沙坦分別在0～1.35×10^-5mol/L、0～1.05×10^-5mol/L范圍內(nèi)遵從比爾定律，表觀摩爾吸光系數(shù)分別為7.65×104L.mol^-1.cm^-1、1.70×105L.mol^-1.cm^-1，檢出限分別為8.22×10^-7mol/L和3.20×10^-7mol/L。該方法可用于臨床用藥、血樣及尿樣中替米沙坦的測(cè)定。

主要參考資料

[1]固綠FCF分光光度法測(cè)定血清蛋白質(zhì)

[2]固綠FCF分光光度法測(cè)替米沙坦的含量