219861-53-7 / (R)-草酸西酞普蘭的含量測(cè)定

背景及概述^[1]

西酞普蘭草酸鹽（CIT）是一種選擇性的5-羥色胺再攝抑制劑，它具有耐受性好、不良反應(yīng)少的特點(diǎn)，被推薦為長期治療抑郁癥的首選藥物，1998年美國FDA批準(zhǔn)在美國上市，1999年在中國市場銷售。CIT為消旋體，其S-對(duì)映體選擇性抑制5-羥色胺再吸收，而R-對(duì)映體(R)-草酸西酞普蘭作用甚微。

儀器及試藥^[1]

美國Agilent Hypersil 1010型HPLC儀，DVD檢測(cè)器。 S-CIT對(duì)照品及樣品均由廣州佐森生物科技有限公司提供。S-CIT對(duì)照品由S-CIT精制而成［批號(hào):20030108］，R型異構(gòu)體 <4.0%，有關(guān)物質(zhì)<0.5%，含量測(cè)定用歸一法，按干燥品計(jì)算，含C20H21FN2O·C2H2O4不得少于99.5%。甲醇，乙腈為色譜純，冰醋酸和三乙胺為分析純，水為去離子水經(jīng)蒸餾后使用。

方法與結(jié)果^[1]

1、色譜條件

色譜柱：用Chirobiotic V手性柱（250mm*4.6mm，5μm），以甲醇-乙酸-三乙胺（100:0.1:0.1）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長為240nm，色譜柱溫為20℃，流速為1.0mL·min^-1。S和R型異構(gòu)體之間的分離度大于1.5，R型異構(gòu)體和S型異構(gòu)體的保留時(shí)間分別約為14.3min和15.5min。

2、線性關(guān)系考察

精密稱取S-CIT對(duì)照品適量，用流動(dòng)相溶解，并稀釋制成每1mL中含1mg的溶液作為貯備液，分別精密吸取貯備液置10mL量瓶中，制成濃度10，25，50，100，150μg·mL^-1的溶液。取上述各溶液20μL進(jìn)樣，記錄各主成分峰的峰面積，以平均峰面積（A）為縱座標(biāo)，以濃度（C,μg·mL^-1）為橫座標(biāo)進(jìn)行線性回歸，回歸方程為A=49224.78C-55.066（r=0.9991,n=5）。測(cè)定結(jié)果表明，S-CIT在10~150μg·mL^-1內(nèi)，峰面積與濃度呈良好的線性關(guān)系，且S型與R型異構(gòu)體的分離度>1.5。

3、精密度試驗(yàn)

精密量取線性范圍試驗(yàn)項(xiàng)下的25，50，100μg·mL^-1濃度，按上述色譜條件重復(fù)進(jìn)樣5次，記錄各組分的峰面積，求出各組分峰面積的RSD，測(cè)定結(jié)果表明，S-CIT的RSD為1.0%<2.0%。

4、回收率考察

精密量取S-CIT儲(chǔ)備液，加流動(dòng)相分別定量稀釋成每1mL中含S-CIT 25，50，100μg·mL^-1的溶液各5份，按標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下的色譜條件進(jìn)樣20mL，計(jì)算回收率。測(cè)定結(jié)果表明，S-CIT的平均回收率分別為99.32，99.27%，99.87%，RSD在0.8%~2.6%的范圍內(nèi)。

5、檢測(cè)限

用流動(dòng)相配制5μg·mL^-1的S-CIT對(duì)照品溶液，進(jìn)樣量6μL,，檢測(cè)限為0.03μg（10倍信噪比）。

6、樣品測(cè)定

取S-CIT約10mg，精密稱定，加流動(dòng)相溶解并定量稀釋制成100μg·mL^-1的溶液；取20μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖。并按歸一法計(jì)算供試品中R型異構(gòu)體和S型異構(gòu)體含量之比，結(jié)果R型異構(gòu)體均在5%以下，且分離度大于1.5。結(jié)果見表1。

參考文獻(xiàn)

[1]楊雪梅,劉旭,嚴(yán)軼琛,徐江平.S-西酞普蘭草酸鹽含量測(cè)定[J].中國新藥雜志,2004(11):1020-1021.