214217-86-4 / 2-羥基阿托伐他汀的含量檢測(cè)

背景及概述^[1]

阿托伐他汀為他汀類血脂調(diào)節(jié)藥，屬HMG-CoA還原酶抑制劑前體?？诜蘸蟮乃猱a(chǎn)物在體內(nèi)競(jìng)爭(zhēng)性地抑制膽固醇合成過程中的限速酶，使膽固醇的合成減少，低密度脂蛋白受體合成增加，使血膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇水平降低，中度降低血清甘油三酯水平和增高血高密度脂蛋白水平。適用于治療高膽固醇血癥和混合型高脂血癥，可用于冠心病和腦中風(fēng)的防治。2-羥基阿托伐他汀為阿托伐他汀的代謝產(chǎn)物。阿托伐他汀在人體內(nèi)主要由細(xì)胞色素P450酶代謝為2-羥基阿托伐他汀(ortho-hydroxyatorvastatin，o-OAT)和4-羥基阿托伐他汀(para-hydroxyatorvastatin，p-OAT)。2-羥基阿托伐他汀和p-OAT占總體抑制活性的70％。同其他他汀類化合物一樣，阿托伐他汀、2-羥基阿托伐他汀和p-阿托伐他汀結(jié)構(gòu)中含有羥基羧酸結(jié)構(gòu)，無論在體內(nèi)和體外均能脫水關(guān)環(huán)形成內(nèi)酯，并且，該體內(nèi)內(nèi)酯代謝物在體外也易于水解轉(zhuǎn)化為羥基羧酸，因而，羥基羧酸濃度測(cè)定易受影響不準(zhǔn)確。

含量檢測(cè)^[2]

檢測(cè)人血漿中阿托伐他汀及代謝物的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜方法，含下述步驟：預(yù)處理，取血漿，加入阿托伐他汀及代謝物同位素內(nèi)標(biāo)溶液，以6M醋酸銨水溶液和乙腈為鹽析分層試劑沉淀蛋白，渦流及離心后制得血漿樣品；色譜，將血漿樣品液相色譜分離，采用KinetexXBC18柱，梯度洗脫，流動(dòng)相A:流動(dòng)相B初始體積比為60:40，流速0.8mL/min，柱溫40℃，流動(dòng)相A為水，流動(dòng)相B為乙腈；質(zhì)譜，電噴霧電離源，正離子多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(+MRM)掃描，噴霧電壓5500V，內(nèi)源氣體1(N2)65psi，氣體2(N2)75psi，氣簾氣體(N2)35psi，離子源溫度500℃，阿托伐他汀反應(yīng)監(jiān)測(cè)離子[M+H]+m/z559→m/z440，CE22eV，D5-阿托伐他汀反應(yīng)監(jiān)測(cè)離子[M+H]+m/z564→m/z445，CE22eV，2-羥基阿托伐他汀和4-羥基阿托伐他汀反應(yīng)監(jiān)測(cè)離子[M+H]+m/z575→m/z440，CE34eV，D5-鄰羥基阿托伐他汀和D5-對(duì)羥基阿托伐他汀反應(yīng)監(jiān)測(cè)離子[M+H]+m/z580→m/z445，CE34eV；計(jì)算，以阿托伐他汀及代謝物濃度為橫坐標(biāo)，阿托伐他汀及代謝物與阿托伐他汀及代謝物內(nèi)標(biāo)物的峰面積比為縱坐標(biāo)，回歸制得相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，計(jì)算阿托伐他汀及代謝物的血藥濃度。

主要參考資料

[1] 常用新藥精匯手冊(cè)

[2] CN201710281072.1檢測(cè)人血漿中阿托伐他汀及代謝物的液相色譜?串聯(lián)質(zhì)譜方法及臨床藥動(dòng)學(xué)研究的應(yīng)用