2068-78-2 / 硫酸長春新堿的合成和脂質(zhì)體制備

背景及概述^[1-2]

硫酸長春新堿(vincristinesulfate，VCR)是夾竹桃科植物長春花生物堿類的細胞周期特異性抗腫瘤藥物，抗腫瘤作用靶點是微管，主要抑制微管蛋白的聚合而影響紡錘體微管的形成，使有絲分裂停止于中期。和其它長春花生物堿類一樣，VCR對于許多淋巴組織的惡性腫瘤，包括侵襲性非霍奇金淋巴瘤和急性淋巴細胞白血病，有著很好的治療效果。臨床主要應(yīng)用于急性白血病、惡性淋巴瘤、神經(jīng)母細胞瘤、慢性淋巴細胞白血病等疾病的治療。

制備^[1]

2g的硫酸長春堿溶于240ml四氫呋喃，加入7.5ml冰醋酸，在其保護下，用干冰降溫至-65℃，攪拌下，滴加配制好的重鎘酸鈉溶液(3g重鎘酸鈉溶于15ml水，再加入2ml濃硫酸，攪拌溶解)，滴加過程中維持反應(yīng)溫度在-50℃以下。滴加完畢，在-65℃下攪拌反應(yīng)3小時。

將反應(yīng)液倒入35ml濃氨水和200ml水的混合溶液中，用600ml二氯甲烷萃取，無水硫酸鎂干燥，減壓濃縮，得到長春新堿粗品2.06g，HPLC檢測純度83％。

得到的長春新堿粗品用異丙醇20ml溶解，攪拌下，滴加1％硫酸異丙醇溶液16ml調(diào)節(jié)PH≤4時濾出固體，真空干燥，得到硫酸長春新堿粗品1.82g，HPLC檢測純度92％。

將硫酸長春新堿粗品1.8g溶于36ml無水乙醇中，冷卻至-10℃，緩慢攪拌，析出固體，過濾，無水乙醇洗滌，真空干燥，得到硫酸長春新堿1.63g，收率81.5％，HPLC檢測純度98.6％。

脂質(zhì)體制備^[2]

硫酸長春新堿脂質(zhì)體VCR-Lipo的制備如下：

S1、PEG長循環(huán)脂質(zhì)體(Lipo)的制備：

將溶解在氯仿中的雞蛋鞘磷脂(sphingomyelin，SM)、膽固醇(Cholesterol)、和DSPE-PEG2000按摩爾比55：40：5加入園底燒瓶中，在60℃下用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，以轉(zhuǎn)速為200rpm/min旋轉(zhuǎn)并打開真空泵抽真空10min形成干燥薄膜，真空干燥儀過夜干燥以去除殘留的有機溶劑。

其中SM為Avantipolarlipids公司產(chǎn)品，貨號為860061P；膽固醇為Avantipolarlipids公司產(chǎn)品，貨號為700100P；DSPE-PEG2000為Avantipolarlipids公司產(chǎn)品，貨號為880128P。

將瓶底的脂質(zhì)薄膜用lml300mM的枸櫞酸緩沖液(pH＝4.0)進行水化，50℃水浴超聲20min后，在液氮、60℃水浴反復(fù)凍融5次。將產(chǎn)物裝入脂質(zhì)體擠推器，依次通過200nm、100nm的聚碳酸酯膜各20次，最后過50nm的聚碳酸酯膜21次，形成直徑在100nm左右的PEG修飾的空白脂質(zhì)體(Lipo)。

S2、包裹藥物脂質(zhì)體(VCR-Lipo)的制備

按照硫酸長春新堿：空白脂質(zhì)體質(zhì)量比1:10，取0.5mg長春新堿溶液(1mg/ml)和5mg空白脂質(zhì)體，加入1mlNa2HPO4溶液(500mmol/L，pH9.0)調(diào)節(jié)外水相pH為7.0，放置60℃水浴10分鐘，即制備包裹硫酸長春新堿的納米脂質(zhì)體VCR-Lipo。其中，硫酸長春新堿為浙江海正藥業(yè)股份有限公司產(chǎn)品，批號為130501。

參考文獻

[1][中國發(fā)明,中國發(fā)明授權(quán)]CN200810216286.1高純度硫酸長春新堿的制備方法

[2][中國發(fā)明,中國發(fā)明授權(quán)]CN201510988547.1硫酸長春新堿脂質(zhì)體及制備方法和應(yīng)用