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杜松(JuniperusrigidaSieb.etZucc.),別名崩松、棒兒松,柏科刺柏屬,常綠灌木或喬木,高達(dá)10m。樹冠圓柱形,大枝直立,小枝下垂。刺形葉條狀、質(zhì)堅(jiān)硬、端尖,上面凹下成深槽,槽內(nèi)有一條窄白粉帶,背面有明顯的縱脊?;ㄆ?月,球果翌年10月成熟。球果熟時(shí)呈淡褐黃色或藍(lán)黑色,被白粉。種子近卵形頂端尖,有四條不顯著的棱。杜松主要分布于我國(guó)黑龍江、吉林、遼寧、內(nèi)蒙古、河北、山西、陜西、甘肅及寧夏等省區(qū),朝鮮和日本也有分布。杜松是我國(guó)目前尚未充分利用的民族藥用植物。杜松的果實(shí)俗稱“杜松子”在韓國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中用于治療關(guān)節(jié)炎和水腫。杜松也被用于傳統(tǒng)蒙藥和藏藥中,主要用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、腎炎、水腫、布魯氏菌病和其他與炎癥相關(guān)的疾病。在《新修晶珠本草》中記載了杜松枝葉可用于瀉火、解毒、利尿、祛濕、治腎炎、水腫、風(fēng)濕疼痛等;果實(shí)用于清熱、利膽、止痛、治肝膽病和腎病等。在《中國(guó)民族藥志》記載了杜松枝和針葉可入藥治療腎熱、發(fā)癥、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等。杜松的小枝和針葉提取的精油是日用化工品的重要原料。杜松針葉中提取的木質(zhì)素有很好的生物活性,如抗炎、抗癌和抗病毒還報(bào)道了關(guān)于杜松乙醇提取物的抑制肥胖作用,可以用于治療現(xiàn)代人們多發(fā)的肥胖癥。李亞賢等用直接碘量法、吸附層析法和原子吸收光譜法對(duì)杜松針葉的營(yíng)養(yǎng)成分進(jìn)行分析,結(jié)果顯示杜松針葉中維生素C、胡蘿卜素和鋅、鐵、鈣、鎂、銅、錳等元素的含量豐富,可以用作工業(yè)、醫(yī)藥、保健品的深加工。
精油(essentialoil),即植物性天然香料,亦被稱為芳香油或者揮發(fā)油,是存在于植物的花、葉、莖、根和果實(shí)中的一類重要的次生代謝物質(zhì),由分子量較小的簡(jiǎn)單化合物組成,常溫下多為油狀液體,有一定的揮發(fā)性,具有強(qiáng)烈的香味。植物精油化學(xué)成分復(fù)雜,根據(jù)精油成分化學(xué)結(jié)構(gòu)的不同,可將其分為単萜、倍半萜、醛類、酯類、醇類等。精油可以用于防治害蟲,抑制細(xì)菌真菌生長(zhǎng)。植物精油在傳統(tǒng)藥物、食品防腐保鮮和化妝品等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用。它還具有抑菌作用、抗炎作用、抗氧化作用和抗腫瘤等作用。杜松精油常采用的提取方法有水蒸氣蒸餾法(SD)、超臨界CO2萃取法(SFE)。
杜松針葉精油的主要成分為α-蒎烯、石竹烯、月桂烯、檸檬烯、十一烷酮
-2、大牻牛兒烯-D、β-水芹烯、β-蒎烯、異松油烯、香茅醇等。研究發(fā)現(xiàn),精油的成分和含量與其生長(zhǎng)地點(diǎn)、提取部位、提取方法有關(guān)。
(1)不同生長(zhǎng)環(huán)境的杜松其精油成分和含量不同;Adams和張少貞等通過(guò)GC-MS檢測(cè)分析了中國(guó)、韓國(guó)和日本三個(gè)杜松主要分布地區(qū)的精油成分。發(fā)現(xiàn)中國(guó)東北地區(qū)杜松針葉精油中主要成分為α-蒎烯(39.7%)、月桂烯(11.2%)、檸檬烯(4.2%)、十一烷酮-2(4.8%)、大牻牛兒烯-D(2.3%)、β-水芹烯(2.1%)、β-蒎烯(1.9%)等。韓國(guó)地區(qū)杜松針葉精油中主要成分為α-蒎烯(53.3%)、月桂烯(4.8%)、β-蒎烯(4.7%)、檸檬烯(3.4%)、醋酸冰片酯(2.8%)、β-石竹烯(2.5%)、石竹烯氧化物(2.5%)、蛇麻烯(1.7%)等。日本地區(qū)杜松針葉精油中主要成分為醋酸冰片酯(59.0%)、α-蒎烯(13.5%)、檸檬烯(4.4%)、月桂烯(3.1%)、金合歡醇(2.0%)、樟腦(1.9%)、β-石竹烯(1.3%)、莰烯(1.3%)等。
(2)不同提取部位如小枝、針葉和果實(shí),其精油成分和含量也不同;劉巧曉等通過(guò)GC-MS檢測(cè)分析了杜松小枝、針葉和果實(shí)的精油成分。發(fā)現(xiàn)杜松小枝精油主要成分為十一烷酮-2(11.30%)、石竹烯氧化物(8.79%)、石竹烯(7.12%)、芳香醇(6.49%)、α-石竹烯(5.11%)、醋酸冰片酯(4.60%)、反式橙花叔醇(4.56%)、乙酸松油酯(4.53%)、乙酸松油酯(3.65%)等。杜松針葉精油主要成分為石竹烯(13.10%)、α-石竹烯(11.70%)、石竹烯氧化物(10.30%)、大牻牛兒烯-D(6.57%)、芳香醇(6.31%)、乙酸龍腦酯(5.56%)、γ-畢澄茄烯(4.73%)、十一烷酮-2(4.59%)等。杜松果實(shí)精油主要成分為α-蒎烯(20.80%)、β-月桂烯(27.00%)、檸檬烯(5.76%)、石竹烯(5.20%)、大牻牛兒烯-D(5.98%)、α-石竹烯(4.07%)等。
(3)不同提取方法所得到的精油成分和含量也不同。通過(guò)GC-MS檢測(cè)發(fā)現(xiàn)韓國(guó)地區(qū)杜松針葉精油超臨界CO2萃取法得到的主要成分為α-蒎烯(71.5%)、月桂烯(8.2%)、檸檬烯(3.6%)、香茅醇(3.4%)、α-萜品烯(1.6%)等。水蒸氣提取法提取的杜松針葉精油主要成分為α-蒎烯(80.9%)、月桂烯(5.6%)、檸檬烯(2.2%)、異松油烯(3.1%)、α-萜品烯(2.3%)等。
杜松精油具有廣譜的抑菌活性,其抑菌圈直徑在8.05-16.00mm之間,肺炎克雷伯氏菌抑菌圈直徑最大(16.00mm),抑菌圈直徑最小的是糞腸球菌(8.05mm)。采用瓊脂稀釋法測(cè)定了杜松精油的MIC和MBC值,結(jié)果顯示杜松針葉精油對(duì)10種細(xì)菌均具有顯著的抑菌效果,其MIC和MBC值在3.125-12.50mg/mL之間,所有供試菌種中,肺炎克雷伯氏菌的MIC和MBC值最小(均為3.125mg/mL),表明杜松精油對(duì)肺炎克雷伯氏菌的抑制效果最為顯著。采用細(xì)菌生長(zhǎng)曲線、測(cè)量細(xì)菌細(xì)胞膜滲透性、測(cè)量細(xì)菌蛋白質(zhì)和掃描電鏡觀察細(xì)菌形態(tài)等幾方面,探討了杜松針葉精油的抑菌機(jī)理。結(jié)果表明杜松精油能顯著抑制肺炎克雷伯氏菌的生長(zhǎng),不同濃度精油的作用效果差別較大;杜松針葉精油改變了細(xì)菌細(xì)胞膜的滲透性,使得細(xì)胞內(nèi)容物外泄最終導(dǎo)致細(xì)菌死亡;杜松精油能夠抑制細(xì)菌細(xì)胞蛋白質(zhì)合成;杜松針葉精油處理后菌體表面和內(nèi)部結(jié)構(gòu)均發(fā)生改變,菌體表現(xiàn)出皺縮、破裂、部分缺失等,從而導(dǎo)致了細(xì)胞內(nèi)含物的泄漏。以上表明,杜松精油的抑菌作用主要是改變了細(xì)菌細(xì)胞膜的滲透性,使得細(xì)胞內(nèi)容物外泄,并抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)合成,最終導(dǎo)致細(xì)菌死亡。
一種用于杜松精油的提取工藝,包括如下步驟:
(1)將杜松除雜后烘干至水分不超過(guò)10%的杜松片,粉碎至40目備用。
(2)采用LED光照射杜松粒:具體采用15-25min的光照時(shí)間,光照強(qiáng)度為15-20lx,光照的色溫均為5500-6000K;作為本發(fā)明的一種實(shí)施方式,LED光照射時(shí)間為20min,光照強(qiáng)度為20lx,光照的色溫為5500K。當(dāng)然,作為本發(fā)明的另一種實(shí)施方式,LED光照射時(shí)間為25min,光照強(qiáng)度為15lx,光照的色溫為6000K;又或者,LED光照射時(shí)間為15min,光照強(qiáng)度為20lx,光照的色溫為5800K;上述實(shí)施例下的采用LED光照杜松粒,使得其后期制作出杜松精油的穩(wěn)定性較好。
(3)加入重量為其3倍的無(wú)水乙醇,在20攝氏度下靜置1h,得到混合溶液。
(4)將步驟(3)處理之后的混合溶液置入微波萃取儀中,在400w的微波功率條件下,進(jìn)行微波處理10min;
(5)然后進(jìn)行水蒸氣提取,并將收集到的粗產(chǎn)品在5攝氏度的冰箱中冷藏2h,最后再進(jìn)行離心操作,油水分離,得到杜松精油。
[1] 杜松針葉精油化學(xué)成分、抑菌活性及其作用機(jī)理研究
[2] 杜松不同部位化學(xué)成分及其抗氧化活性研究
[3] CN201610732126.7一種用于杜松精油的提取工藝