15291-77-7 / 銀杏內(nèi)酯 B的多種藥理作用

背景及概述^[1][2]

我國自古以來就有銀杏葉入藥和食療的記載，如《本草品匯精要》中提到，銀杏葉“歸肺經(jīng)，能斂肺平喘，益心止痛”。隨著國外20 世紀 70 年代初用銀杏葉提取物（extract of Ginkgo biloba，E銀杏內(nèi)酯 B）治療中樞外周血流紊亂和腦血管動脈粥樣硬化的報導出現(xiàn)，其藥用價值受到了更為廣泛的關注銀杏的化學成分復雜，銀杏葉中已有報導的化學成分多達 180 種，其中主要活性成分為萜內(nèi)酯化合物和黃酮類化合物。萜內(nèi)酯類化合物包括銀杏內(nèi)酯 A、B、C、J 和 M，均為血小板活化因子(platelet activating factor，PAF)拮抗劑，其中銀杏內(nèi)酯 B 的活性最強。銀杏內(nèi)酯 B(縮寫為GB)是迄今發(fā)現(xiàn)的最強的血小板活化因子拮抗劑，可在臨床上用于治療血栓、急性胰腺炎和心血管疾病，還可用于轉移性癌癥的治療。藥效優(yōu)于總內(nèi)酯，價格也遠高于總內(nèi)酯。據(jù)報道，國際市場價格為 20 萬美元/kg。銀杏內(nèi)酯 B 在銀杏浸膏粉中含量只有 1%～2%，且與銀杏內(nèi)酯 A、C等結構相近，因此分離極為困難。銀杏內(nèi)酯 B 的分離屬于精細分離，市場需求一定的數(shù)量，因此必須有規(guī)?；木毞蛛x技術與之適應。

結構

制備^[2]

目前，銀杏內(nèi)酯 B 可以通過化學合成、植物組織培養(yǎng)、提取等 3 個途徑獲得。由于化學合成和植物組織培養(yǎng)均受到技術難度大、生產(chǎn)成本高等原因制約，目前 銀杏內(nèi)酯 B 來源以提取為主，主要從 E銀杏內(nèi)酯 B 通過分離獲得。由于 E銀杏內(nèi)酯 B 中的銀杏內(nèi)酯類化合物各個單體結構非常相似，性質(zhì)相近，用一般的方法難于將銀杏內(nèi)酯 B 單獨分離出來。銀杏內(nèi)酯 B 的提取分離一般分為兩步：

1) 銀杏總內(nèi)酯的提取與純化：銀杏葉功能活性成分一般可以通過水蒸汽蒸餾法、有機溶劑法、生物酶解法、超臨界流體提取 法等方法來獲取，其中有機溶劑法是國內(nèi)外最廣泛的方法。對于銀杏總內(nèi)酯的提取，一般是先將銀杏葉粉碎后用乙醇提取回流 3 次，因為用索氏提取法獲得的提取物比乙醇直接回流法的含量和收率高，故較多采用索氏提取法，提取液合并后減壓回收乙醇，得到 E銀杏內(nèi)酯 B，當然也可以直接利用藥廠生產(chǎn)的 E銀杏內(nèi)酯 B。然后將 E銀杏內(nèi)酯 B 置于索氏提取器內(nèi)，用醋酸乙酯抽提，醋酸乙酯相用質(zhì)量分數(shù) 1 % NaHCO3水溶液洗滌 數(shù)次，再用水洗至中性。收集有機相，回收溶劑至小體積，低溫結晶，抽濾，無水乙醇洗滌，晶體用丙酮溶解，活性炭脫色，回收丙酮，得白色固體。即為銀杏總內(nèi)酯的混合物。當然也 以采取其他工藝，關鍵是能夠達到提取和純化銀杏總內(nèi)酯的目的即可。

2)利用樹脂吸附洗脫法、柱層析法、色譜法等各種分離方法將 銀杏內(nèi)酯 B 從銀杏總內(nèi)酯中分離出來。樹脂吸附性能的優(yōu)劣是由其化學和物理結構決定的，樹脂的極性和空間結構(主要指孔徑、表面、孔容)是影響吸附性能的重要因素。研究人員利用大孔吸附樹脂柱成功實現(xiàn) 銀杏內(nèi)酯 B 的分離。以 E銀杏內(nèi)酯 B 為原料，采用 DA201 型 大孔吸附樹脂柱分離，乙醇水溶液梯度洗脫，乙醇水重結晶分別得到銀杏內(nèi)酯的 4 種單體：BB、GA、銀杏內(nèi)酯 B、GC，各種單體的純度均達到 95 %以上，銀杏內(nèi)酯 B 提取率達到69.84 %。由于此工藝不采用有毒的有機溶劑，所得產(chǎn)品安全性更高。本工藝簡便，采用有機試劑少，因此適用于中試及工業(yè)生產(chǎn)。

藥理作用^[3]

1. 防治缺血性損傷

1）防治腦缺血再灌注致神經(jīng)細胞損傷

2）防治局灶性腦缺血損傷

3）防治心肌功能損傷與I-R 損傷

2. 保護腸道及腸黏膜

金黃色葡萄球菌分泌的葡萄球菌腸毒素B（SEB）是引起食 物中毒的主要原因之一，其可以通過小鼠腹腔膜誘導中性粒細胞，激活 c-纖維神經(jīng)肽、脂肪 氧化酶或環(huán)氧代謝物、一氧化氮、組胺遞質(zhì)，誘發(fā)炎癥，銀杏內(nèi)酯 B可以顯著抑制 SEB 刺激巨噬細胞釋放嗜中性粒細胞趨化蛋白，對腸道及腹腔起到保護作用。

3. 抗炎和免疫調(diào)節(jié)作用

炎性遞質(zhì) PAF可促進花生四烯酸生成、氧自由基和彈性蛋白酶釋放增加、細胞間黏附分子-1表達升高，并且與其他炎性遞質(zhì)、血管活性物質(zhì)、細胞因子相互作用形成級聯(lián)反應，使炎性信號擴大，從而加重對組織微循環(huán)的傷，導致多器官的功能損傷。銀杏內(nèi)酯 B通過識別和清除抗原，及對自身成分產(chǎn)生免疫耐受，維持內(nèi)環(huán)境的定，起到抗炎及免疫調(diào)節(jié)作用。

4. 治療偏頭痛

原發(fā)性頭痛是兒童和青少年最常見疾病之一，然而 銀杏內(nèi)酯 B在中樞神經(jīng)系統(tǒng)對 抗 PAF谷氨酸傳輸?shù)恼{(diào)解有援助作用。在患者有無先兆偏頭痛的預防性治療中，由于 銀杏內(nèi)酯 B耐受性好，以及能有效的預防治療小兒原發(fā)性頭痛并減少偏頭痛發(fā)作 的頻率，因此 銀杏內(nèi)酯 B被國際上認為是一個有前途治療有無先兆偏頭痛藥物。

4. 治療阿爾茨海默?。ˋD）

AD是一個復雜 的遺傳性疾病，其致病機制是由于β－淀粉樣蛋白（Aβ）積累觸發(fā)的神經(jīng)退行性疾病，其中一部分AD是通過腦谷氨酸 介導的興奮性氨基酸引起。銀杏內(nèi)酯 B可以保護由于 Ａβ 的積累導致磷酸化異常所致的神經(jīng)細胞損傷。研究發(fā)現(xiàn)，銀杏內(nèi)酯 B可以抑制細胞凋亡，其神經(jīng)保護作用可能與腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子密切相關。銀杏內(nèi)酯 B能夠抑制Aβ1-42誘導的人類神經(jīng)母細胞瘤細胞凋亡、線粒體功能障礙和氨基末端激酶的激活，抑制細胞外信號調(diào)節(jié)激酶和信號通路以保護神經(jīng)細胞。由此表明，PAF受體拮抗劑 銀杏內(nèi)酯 B可以治療AD，保護神經(jīng)細胞，抑制異常鈣離子涌入，減少大腦中的有毒遞質(zhì)的含量，由此降低引發(fā)神經(jīng)退行性疾病的危險。

5. 保護肝臟

銀杏內(nèi)酯 B可以抑制肝損傷，改善肝功能。研銀杏內(nèi)酯 B 誘導人體內(nèi)多種肝藥酶代謝和轉運，通過激活外源性受體，調(diào)節(jié)肝臟的新陳代謝。

6. 抑制鈣離子釋放

銀杏內(nèi)酯 B呈劑量依賴性抑制誘導的細胞凋亡，并降低細胞內(nèi)鈣離子濃度，上調(diào)鈣結合蛋白表達，對神經(jīng)細胞起到一定 的保護作用。

7. 抗氧化損傷

氧化損傷極易導致心血管疾病的發(fā)生，在疾病治療過程中引起的氧化損傷，可以給予外源性抗氧化劑或者激活體內(nèi)的抗氧化機制，以減少氧自由基對組織 的損傷?？寡趸瘎?銀杏內(nèi)酯 B可以有效地阻止EPV 誘導的內(nèi)皮細胞通透性和線粒體功能障礙。在乙醇誘導的人肝癌細胞株細胞氧化損傷中，不同濃度的 銀杏內(nèi)酯 B 對細胞內(nèi)活性氧 的抑制作用不同。另外研究發(fā)現(xiàn)，銀杏內(nèi)酯 B可以通過抑制氧化酶的表達，改善乙醇誘導的神經(jīng)毒性產(chǎn)生，降低細胞毒性，減少 活性氧產(chǎn)生，抑制細胞凋亡。

主要參考資料

[1] 銀杏葉中銀杏內(nèi)酯B的提取、分離與純化研究

[2] 銀杏內(nèi)酯 B 提取分離技術的研究進展

[3] 銀杏內(nèi)酯Ｂ藥理作用研究進展