手機(jī)掃碼訪問(wèn)本站
微信咨詢
乙肝病毒感染已經(jīng)成為全球性的危害。慢性乙肝可導(dǎo)致肝硬化、肝癌及肝功能衰竭，我國(guó)有數(shù)以億計(jì)的乙肝患者和病毒攜帶者，全球每年因乙肝相關(guān)疾病的死亡人數(shù)高達(dá)百萬(wàn)之多。恩替卡韋是百時(shí)美施貴寶公司( Bristol -Myers Squib, BMS) 研究開(kāi)發(fā)的抗乙肝病毒藥物，2005年 4月首次獲得美國(guó) FDA 的批準(zhǔn)。其化學(xué)名為 2-氨基-1, 9-二氫-9- [ (1S, 3R, 4S) -4-羥基-3-羥甲基-2-亞甲基環(huán)戊基] - 6H-嘌呤-6-酮一水合物。臨床主要用于治療成人伴有病毒復(fù)制活躍和血清轉(zhuǎn)氨酶持續(xù)增高、或肝組織學(xué)為活動(dòng)性病變的慢性乙型肝炎。
恩替卡韋的合成路線主要有 2 條，第一條：以 ( 1S-反式) -2- [ (苯甲氧基) 甲基] -3-環(huán)戊烯-1-醇 (2) 為原料，經(jīng) 8 步反應(yīng)得到恩替卡韋，第二條：以 [ 1S- ( 1α, 2α, 3β,5α)] -2- [ ( 苯甲氧基) 甲基] -6-氧雜二環(huán) [ 3, 1, 0] 己-3-醇為原料, 經(jīng) 10 步反應(yīng), 或以 ( 3as, 6aR) -3, 3a,6, 6a-四氫-2H-環(huán)戊二烯并 [ b] 呋喃-2-酮為原料, 經(jīng) 11 步反應(yīng)制得目標(biāo)化合物。2 種方法的主要區(qū)別在于前者是先在環(huán)戊基上引入嘌呤再進(jìn)行亞甲基化, 而后者是先在環(huán)戊基上引入亞甲基再引入嘌呤。文獻(xiàn)的反應(yīng)步驟相對(duì)較長(zhǎng)、工藝復(fù)雜，而且涉及方法專利。因此，本文以 (1S-反式) -2- [ ( 苯甲氧基) 甲基] -3-環(huán)戊烯-1-醇 ( 2) 為原料，經(jīng)環(huán)氧化、保護(hù)羥基、定向加成、保護(hù)氨基、氧化、亞甲基化和兩步脫保護(hù)基制得恩替卡韋[1]。其合成路線圖如下圖：
圖1 恩替卡韋合成路線圖
過(guò)氧叔丁醇 90.1 g ( 1.0 mol) 和二氯甲烷 (100 mL)混合液滴加到 ( 1S-反式) -2- [ ( 苯甲氧基) 甲基] -3-環(huán)戊烯-1-醇 (2) 102.0 g (0.5 mol) , 乙酰丙酮氧釩 2.7 g (0.01mol) 和二氯甲烷 (200 mL) 的混合溶液中, 氮?dú)獗Ｗo(hù), 室溫?cái)嚢璺磻?yīng) 16 h, 降溫至 0 ℃, 加入飽和亞硫酸鈉溶液, 室溫再攪拌 2 h, 分出有機(jī)層, 水層用二氯甲烷萃取, 合并有機(jī)相, 飽和食鹽水洗滌, 無(wú)水硫酸鈉干燥, 真空濃縮, 得( 3) 101.5 g 。 收率 92.3%。
氮?dú)獗Ｗo(hù), 在干燥的三頸瓶中加入干燥 的四氫呋喃( 500 mL) 和氫化鈉 ( 60%) 20.0 g (0.5 mol), 20℃以下滴加 (3) 99 g ( 0.45 mol) 的四氫呋喃 (100 mL) 溶液, 滴完后室溫反應(yīng) 2 h, 再向體系中加入四丁基碘化銨 1.8 g (5mmol) , 滴加溴芐 85.5 g ( 0.5 mol) , 室溫?cái)嚢璺磻?yīng)過(guò)夜,加入乙醇破壞氫鈉, 濃縮, 殘留物中加入水 ( 350 mL) 和乙醚 (350 mL) , 分出有機(jī)相, 水層用乙醚 ( 100 mL ×2)萃取。 合并有機(jī)相, 無(wú)水硫酸鎂干燥, 濃縮, 柱層析純化梯度洗脫:石油醚-乙酸乙酯 =10∶1 洗至產(chǎn)物, 石油醚-乙酸乙酯 =3∶1 洗脫完產(chǎn)物。得 ( 4) 107.2 g, 收率 76.8%。
氮?dú)獗Ｗo(hù)下, 于干燥的三頸瓶中加入 2-氨基-6- (苯甲氧基) -9H-嘌呤 144.6 g (0.6 mol) 和干燥的 DMF ( 450 mL) ,攪拌溶解, 室溫下加入氫化鋰 2.52 g (0.315 mol) , 保持 10min, 升溫至60 ℃反應(yīng) 15 min, 60 ℃下滴加 (4) 93.0 g (0.3mol) 的 DMF (250 mL) 溶液。 60 ℃反應(yīng) 15 min, 升溫至125 ℃反應(yīng) 3 h, 反應(yīng)混合物降至室溫, 加入冰醋酸 ( 20mL), 室溫下攪拌 30 min, 反應(yīng)混合物倒入水 ( 3 000 mL)中, 乙酸乙酯 (500 mL×4) 萃取, 合并有機(jī)相, 依次用水( 500 mL), 食鹽水 ( 500 mL) 洗滌, 干燥, 真空濃縮, 加入二氯甲烷 (2 000 mL), 析出的固體 (未反應(yīng)的 2-氨基-6-( 苯甲氧基) -9H-嘌呤) 過(guò)濾, 濾液真空濃縮, 殘留物柱層析(洗脫劑:二氯甲烷-甲醇 =60∶1) , 得 (5) 98.5 g, 收率 59.6%。
氮?dú)獗Ｗo(hù), 室溫下將 (5) 82.7 g ( 0.15 mol) 溶于二氯甲烷 (600 mL) 中, 分別向溶液中加入三乙胺 30.3 g ( 0.3mol) , 對(duì)甲氧基苯基二苯基氯甲烷 55.6 g ( 0.18 mol) 和 4-二甲氨基吡啶 1.2 g ( 0.01 mol) , 室溫下攪拌過(guò)夜, 乙酸乙酯 2 000 mL 稀釋, 飽和碳酸氫鈉溶液 ( 300 mL×2) , 飽和食鹽水 (300 mL ×2) 洗滌, 干燥, 真空濃縮, 得到的粗品柱層析純化 ( 乙酸乙酯-石油醚=3∶2 ) 得到 (6) 93.4 g,收率 75.7%。
在氮?dú)獗Ｗo(hù)下, 往干燥的三口反應(yīng)瓶中加入 DMP 63.6 g (0.15 mol) 和二氯甲烷 ( 1 600mL) , 叔丁醇 12.2 mL ( 0.13 mol), 室溫反應(yīng) 10 min, 加入 (6) 82.3 g (0.1 mol) 的二氯甲烷 800 mL 溶液, 攪拌反應(yīng) 30 min。 HPLC 監(jiān)測(cè)反應(yīng), 反應(yīng)完畢, 攪拌下加入混合溶液 (10%亞硫酸鈉溶液-飽和碳酸氫鈉溶液-飽和食鹽水 =1.5∶1∶1) (3 500 mL), 攪拌 1 h。 分出有機(jī)相, 水相用二氯甲烷 1 600 mL 萃取, 合并有機(jī)相, 然后用飽和食鹽水洗滌, 無(wú)水硫酸鎂干燥, 濃縮至干得到黃色固體 ( 7) 80.0 g 。收率 97.4%。無(wú)需純化, 直接用于下一步反應(yīng)。
將上述制備的 ( 7) 80.0 g( 0.097 mol) 的二氯甲烷 800 mL 溶液加入到烯化試劑( 1 600 mL) 中, 攪拌反應(yīng) 3 h。 反應(yīng)完畢, 把反應(yīng)體系倒入二氯甲烷 (4 000 mL) 和飽和碳酸氫鈉溶液 ( 4 000 mL) 混合體系中, 攪拌 1 h, 過(guò)濾, 濾餅用二氯甲烷洗滌。 分液,水相用二氯甲烷萃取 (1 500 mL), 合并有機(jī)相, 無(wú)水硫酸鎂干燥。 濃縮至干, 得到粗產(chǎn)物柱層析純化 (石油醚-乙酸乙酯=4∶1) , 得到泡沫狀固體 ( 8) 39.5 g。 收率 49.5%。
將 (8) 39.5 g (48.2 mmol) 溶于混合溶液 ( 四氫呋喃-甲醇 =1∶1) 800 mL 中, 加入 3 mol · L -1 鹽酸 ( 197.5mL), 控溫 60 ℃攪拌反應(yīng)直到原料完全消失。 冷卻至室溫,加入水800 mL, 乙酸乙酯 800 mL, 攪拌下用 2 mol· L -1 氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié) pH =7.1～ 7.3, 分液, 水相用乙酸乙酯( 800 mL ×2) 萃取, 合并有機(jī)相, 無(wú)水硫酸鎂干燥, 濃縮至約 50 mL, 放置在冰箱中冷卻過(guò)夜, 過(guò)濾收集固體, 固體用冷的乙酸乙酯洗滌。 40 ℃真空干燥, 得到白色固體 ( 9)19.8 g 。 收 率 89.8%。
氮?dú)獗Ｗo(hù)下, 往干燥的三口瓶中加入 (9) 19.8 g ( 43.3mmol) , 干燥的二氯甲烷 ( 800 mL), 冷卻至-70 ℃, 緩慢滴加三氯化硼 433.0 mL (433.0 mmol) , 滴加后繼續(xù)攪拌反應(yīng) 1 h, 緩慢升溫至-30～ -20 ℃, 反應(yīng) 1.5 h。 反應(yīng)完畢,再降溫至-70 ℃, 慢慢滴加甲醇 (400 mL) , 滴加完后升溫至室溫, 減壓蒸除溶劑, 再加入甲醇 ( 800 mL) , 混合均勻后減壓濃縮, 殘?jiān)盟?(1 200 mL) 溶解, 用乙醚萃取至乙醚層無(wú)色。 水相用 2 mol· L-1 氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié) pH =7.0,然后將水相減壓濃縮至 250 mL, 加活性炭 2.5 g 煮沸脫色30 min, 濾去活性碳, 濾液自然冷卻, 室溫放置過(guò)夜。 過(guò)濾, 冷蒸餾水洗滌, 蒸餾水重結(jié)晶, 得到白色晶體 (1) 8.2g 。 收率 64.2%。
[1] Bisacchi GS, Chao ST , Bachard C, et al.BMS-200475, a novel carbocyclic-2′-deoxyguanosine analog with potent and selective anti-Hepatitis B Virus activity in vitro [J] .Bioo rg M ed ChemLett, 1997, 7 ( 2) :127-132.