134036-52-5/酪氨酸磷酸化抑制劑AG490的生物活性和藥理研究

背景及概述^[1]

酪氨酸磷酸化抑制劑AG490是個(gè)人工合成的苯亞甲基的丙二腈的脂類衍生物,類似于酪氨酸和癌基因抑活藥,可以和受體酪氨酸激酶競爭結(jié)合位置。除了可以阻斷Jak2,酪氨酸磷酸化抑制劑AG490還可可以有效地阻斷T細(xì)胞Jak3,從而阻斷Jak/STAT信號(hào)傳導(dǎo),引起一系列免疫學(xué)效應(yīng)。

生物活性^[2]

酪氨酸磷酸化抑制劑AG490是一種EGFR抑制劑，IC50為0.1μM，作用于EGFR比作用于ErbB2選擇性高135倍，對(duì)JAK2也有抑制作用，對(duì)Lck，Lyn，Btk，Syk和Src沒有抑制活性。酪氨酸磷酸化抑制劑AG490抑制EGF依賴的HER14細(xì)胞增殖，IC50為3.5μM。與特異性作用于前B細(xì)胞急性白血?。ˋLL）細(xì)胞抑制組成型激活的JAK2相一致，5μM酪氨酸磷酸化抑制劑AG490通過誘導(dǎo)程序性細(xì)胞死亡，幾乎完全抑制所有ALL細(xì)胞生長，而對(duì)正常造血功能不會(huì)造成有害影響。酪氨酸磷酸化抑制劑AG490不會(huì)抑制Lck,Lyn,Btk,Syk,和Src激活。

藥理研究^[3-4]

報(bào)道一、

毛成全等人通過酪氨酸磷酸化抑制劑AG490對(duì)JurkatT細(xì)胞活化、增殖、周期、凋亡及ICBP90蛋白表達(dá)的影響,探討阻斷JAK/STAT信號(hào)通路以抑制JurkatT細(xì)胞生長的可能性及其初步機(jī)制。方法:以JurkatT細(xì)胞為模型,應(yīng)用雙熒光抗體標(biāo)記結(jié)合流式細(xì)胞儀檢測酪氨酸磷酸化抑制劑AG490對(duì)JurkatT細(xì)胞表面分子CD69和CD25表達(dá)的影響;利用噻唑藍(lán)(MTT)比色法觀察酪氨酸磷酸化抑制劑AG490對(duì)JurkatT細(xì)胞增殖的影響;采用碘化丙錠(PI)染色檢測酪氨酸磷酸化抑制劑AG490對(duì)Jur-katT細(xì)胞周期的影響;應(yīng)用AnnexinV-FITC和PI雙染色檢測酪氨酸磷酸化抑制劑AG490對(duì)JurkatT細(xì)胞凋亡的影響;Westernblot檢測酪氨酸磷酸化抑制劑AG490對(duì)JurkatT細(xì)胞中ICBP90蛋白表達(dá)的影響以確定其與酪氨酸磷酸化抑制劑AG490抑制JurkatT細(xì)胞增殖的關(guān)系。結(jié)果:隨著酪氨酸磷酸化抑制劑AG490濃度從1mmol/L增至30mmol/L,細(xì)胞停滯于G0/G1期,阻止其進(jìn)入S期和G2/M期,導(dǎo)致JurkatT細(xì)胞ICBP90蛋白的表達(dá)顯著降低;AG490對(duì)細(xì)胞的抑制作用于24h最為明顯,抑制率可達(dá)27.37%,呈劑量依賴關(guān)系;酪氨酸磷酸化抑制劑AG490不能明顯抑制JurkatT細(xì)胞的活化或促進(jìn)其凋亡。結(jié)論:酪氨酸磷酸化抑制劑AG490能明顯抑制JurkatT細(xì)胞的生長,其抑制作用可能通過下調(diào)JurkatT細(xì)胞ICBP90蛋白的表達(dá)與細(xì)胞周期阻滯有關(guān),而不是通過促進(jìn)細(xì)胞凋亡而實(shí)現(xiàn)。

報(bào)道二、

劉麗等人觀察了酪氨酸磷酸化抑制劑AG490對(duì)慢性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞增殖的抑制作用,以及對(duì)增殖相關(guān)基因AKT蛋白表達(dá)的影響,為CML的治療,尤其是伊馬替尼耐藥的CML的治療提供了理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。本實(shí)驗(yàn)采用不同濃度的AG490分別作用于K562(人紅白血病細(xì)胞株)、32Dp210(小鼠髓系前體細(xì)胞株伊馬替尼敏感型)細(xì)胞24h、48h、72h,32Dp210-T315I(小鼠髓系前體細(xì)胞株伊馬替尼耐藥型)細(xì)胞6h、12h、24h,MTT檢測細(xì)胞增殖的抑制作用,隨后用不同濃度的酪氨酸磷酸化抑制劑AG490作用K562細(xì)胞16h,32Dp210細(xì)胞和32Dp210-T315I細(xì)胞6h,Westernblot檢測AKT蛋白及其磷酸化的表達(dá)情況,結(jié)果顯示酪氨酸磷酸化抑制劑AG490能抑制K562、32Dp210及32Dp210-T315I的增殖,其作用是時(shí)間依賴和劑量依賴,而且酪氨酸磷酸化抑制劑AG490對(duì)伊馬替尼耐藥細(xì)胞32Dp210-T315I的抑制作用更顯著。酪氨酸磷酸化抑制劑AG490能抑制AKT蛋白的磷酸化,呈濃度依賴作用,對(duì)AKT蛋白表達(dá)無明顯影響。酪氨酸磷酸化抑制劑AG490抑制細(xì)胞的增殖可能是由于AG490抑制AKT蛋白的磷酸化進(jìn)而影響細(xì)胞增殖。

參考文獻(xiàn)

[1][學(xué)位論文]王彬2003-西安交通大學(xué):外科學(xué)

[2]AG490PromotesHIF-1αAccumulationbyInhibitingItsHydroxylation.Fernandez-Sanchezetal.CurrMedChem.2012Aug1;19(23):4014-23

[3]毛成全,邢飛躍,郭中峰,方志遠(yuǎn).酪氨酸磷酸化抑制劑AG490抑制JurkatT細(xì)胞增殖[J].細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志,2010,26(03):214-217.

[4]劉麗.AG490對(duì)慢性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞增殖的影響及其機(jī)理研究[D].吉林大學(xué),2010.