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克倫特羅（clenbuterol，CL）或者鹽酸克倫特羅，其化學(xué)名稱為α－［（叔丁氨基）甲基］－4－氨基－3,5－二氯苯甲醇，又稱氨雙氯喘、克喘素、氨哮素，是一種選擇性β2受體激動(dòng)劑，與廣泛分布于呼吸道細(xì)胞膜上的β2受體結(jié)合，導(dǎo)致受體構(gòu)型改變，激活腺苷酸環(huán)化酶，催化細(xì)胞內(nèi)ATP轉(zhuǎn)化為cAMP，促使胞漿中游離鈣濃度下降，鉀通道開(kāi)放，引起平滑肌松弛。臨床上主要作為支氣管解痙藥物，對(duì)支氣管哮喘和伴有可逆性氣道阻塞的慢性支氣管炎均有良好效果。
克倫特羅無(wú)臭，味微苦，性狀為白色或類白色的結(jié)晶粉末，熔點(diǎn)172-175℃，易溶于乙醇、甲醇、水，微溶于氯仿，不溶于乙醚和苯。
克倫特羅是一種選擇性β2受體激動(dòng)劑，與廣泛分布于呼吸道細(xì)胞膜上的β2受體結(jié)合，導(dǎo)致受體構(gòu)型改變，激活腺苷酸環(huán)化酶，催化細(xì)胞內(nèi)ATP轉(zhuǎn)化為cAMP，促使胞漿中游離鈣濃度下降，鉀通道開(kāi)放，引起平滑肌松弛。臨床上主要作為支氣管解痙藥物，對(duì)支氣管哮喘和伴有可逆性氣道阻塞的慢性支氣管炎均有良好效果。它的藥理作用強(qiáng)，松弛支氣管平滑肌的作用是常用解痙平喘藥物—沙丁胺醇的100倍，口服后在胃腸道迅速吸收，且吸收完全，幾乎達(dá)100%，成人口服治療劑量?jī)H為30μg/d～40μg/d?？诜Ч翘夭妓值?70倍，對(duì)心率和血壓的影響不明顯。
除松弛支氣管平滑肌外，克倫特羅也激動(dòng)機(jī)體其它部位的β2受體，如血管平滑肌、骨骼肌和子宮等?？藗愄亓_通過(guò)作用于骨骼肌β2受體，引起肌肉中cAMP和乳酸濃度快速升高，肌糖原濃度下降，加快肌肉蛋白質(zhì)的合成速度，長(zhǎng)期連續(xù)使用能增加肌肉體積和體重。給豬食用，能提高豬肉的瘦肉率。但是必須嚴(yán)肅地指出：這根本不是克倫特羅的藥理作用，因?yàn)槿绻嬲鸬?ldquo;瘦肉”的效果，其使用劑量為解痙平喘作用時(shí)治療劑量的數(shù)十倍，可導(dǎo)致豬和食用者致病，并產(chǎn)生嚴(yán)重癥狀。
八十年代初人們發(fā)現(xiàn)在養(yǎng)豬、養(yǎng)牛時(shí)每天使用克倫特羅1000～3000μg可明顯提高飼料的利用率和瘦肉率。機(jī)理是高劑量克倫特羅通過(guò)作用于骨骼肌的β2腎上腺受體,引起肌肉中環(huán)磷酸腺苷和乳酸濃度的快速升高,肌糖元濃度下降,加快肌肉蛋白質(zhì)的合成速度,長(zhǎng)期連續(xù)使用能增加肌肉體積、增加體重。對(duì)心肌和后肢肌肉影響最明顯,使左心室、比目魚(yú)肌和深淺腓腸肌肌纖維顯著性增大。但在豬等肉用牲畜中投喂克倫特羅,即使是屠宰前7天停藥,肝、肺中仍可檢出較高濃度的克倫特羅。肉中的克倫特羅可使人體出現(xiàn)多種毒副作用,導(dǎo)致體內(nèi)聚胺濃度升高而繼發(fā)心臟肥大。一次性攝入克倫特羅的量過(guò)大,可迅速造成心率過(guò)速,對(duì)原有心律失常的病人更易發(fā)生心臟反應(yīng),嚴(yán)重時(shí)可出現(xiàn)心肌梗死。同時(shí),由于激活了Na+-K+?ATP酶,使K+進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)引起血鉀降低,低血鉀癥,從而導(dǎo)致心律失常?？藗愄亓_通過(guò)增加肌糖原的分解,引起血乳酸、丙酮酸升高,并可出現(xiàn)酮體。容易引起糖尿病人代謝紊亂,導(dǎo)致酮癥酸中毒或乳酸中毒。大鼠毒理試驗(yàn)表明,每天每公斤體重使用2000μg的高劑量克倫特羅,可極大地降低體內(nèi)牛磺酸的貯備,使肌纖維受損。此外,克倫特羅對(duì)生殖系統(tǒng)的影響可表現(xiàn)為降低子宮重量、增強(qiáng)子宮和陰道粘膜上皮細(xì)胞的分泌功能。
克倫特羅部分在肝中降解,部分以原形從尿中排出,停藥后若干天其對(duì)蛋白質(zhì)、脂肪代謝的作用即消失。因此克倫特羅作為營(yíng)養(yǎng)重新調(diào)配劑常常采用混飼給藥,以1-3mg/kg飼料飼養(yǎng)豬1-3月,會(huì)造成藥物蓄積,主要蓄積于眼組織、毛發(fā)、視網(wǎng)膜、肺、肝、腎、脾、肌肉或脂肪。用藥1d內(nèi)克倫特羅可出現(xiàn)在尿及身體各器官中,在肝臟中可保留數(shù)天,但在視網(wǎng)膜組織中至少可保留5個(gè)月?？藗愄亓_在血中含量很低,而在尿中含量很高,人口服治療量20-40μg,在血中濃度低于0.15ng/mL,而尿中最高濃度10-20ng/mL,48h后尿中濃度下降至1-2ng/mL。該藥化學(xué)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,有極強(qiáng)的熱穩(wěn)定性和生化穩(wěn)定性,在動(dòng)物體內(nèi)不易破壞分解,以原形排出體外,殘留時(shí)間長(zhǎng)含該藥殘留的肉經(jīng)過(guò)126℃油煎5min,只破壞一半的殘留量。肉豬后期飼喂瘦肉精在體內(nèi)殘留量高,且易導(dǎo)致發(fā)生跋行,運(yùn)動(dòng)量加大還會(huì)造成死亡屠宰后肌肉松軟、蒼白。
克倫特羅口服和注射均易被吸收,在對(duì)人、狗、兔、鼠和鴕鳥(niǎo)的研究中發(fā)現(xiàn)體內(nèi)吸收20-40min后,CL就可在血液中檢測(cè)出來(lái),并在2-3h后達(dá)到最大濃度。有報(bào)道對(duì)牛施用5μg/kg克倫特羅,首次劑量后2-9h血藥濃度達(dá)到峰值0.5ng/mL,連續(xù)服用兩周后血藥濃度達(dá)到1.1ng/mL,這種血藥濃度的雙峰值現(xiàn)象,說(shuō)明克倫特羅在動(dòng)物體內(nèi)具有時(shí)間性積累。每天對(duì)牛施用10μg/kg體重,連續(xù)10d后血藥濃度達(dá)到最大,說(shuō)明CL在動(dòng)物體內(nèi)殘留具有積累性。以1mg/kg CL劑量連續(xù)喂養(yǎng)肉雞14d,血藥濃度可達(dá)1.2ng/mL。通過(guò)14C標(biāo)記CL示蹤,發(fā)現(xiàn)在機(jī)體內(nèi)吸收相當(dāng)迅速,分布廣泛,見(jiàn)表1。在奶牛和哺乳期婦女的乳汁中同樣可以檢測(cè)到CL的殘留情況。對(duì)奶牛施用10μg/kg CL時(shí),牛奶中CL濃度可達(dá)5.5-22.5ng/mL,施用5μg/kgCL時(shí)牛奶中CL濃度為3-9ng/mL。
表1為CL在動(dòng)物體內(nèi)代謝
1.分光光度法
由于操作簡(jiǎn)便、靈敏度較高，分光光度法廣泛應(yīng)用于藥物的制劑分析中?？藗愄亓_與溴麝香草酚藍(lán)(BTB)能形成穩(wěn)定的離子對(duì)，可以用苯提取后比色測(cè)定。此種方法準(zhǔn)確、簡(jiǎn)單易行，在其含量達(dá)20μg/ml時(shí)即可定量。此法適用于常規(guī)片劑的分析，回收率可達(dá)(99.16±0.37)%(n=5)。如首先將克倫特羅重氮化后，除去過(guò)量的亞硝酸，再與鹽酸萘基乙二胺偶合，呈色物與已知含量的對(duì)照品溶液在波長(zhǎng)500nm處測(cè)吸收度并計(jì)算供試品中克倫特羅的含量。由于克倫特羅在生物樣品中含量甚微，分光光度法檢測(cè)限過(guò)高，達(dá)不到殘留分析要求，因此，該法目前只限于克倫特羅藥品本身的常規(guī)分析。
2.免疫分析法(IA)
（1）酶聯(lián)免疫分析法(簡(jiǎn)稱酶免法，EIA)
酶免法中應(yīng)用最為廣泛的是酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。國(guó)內(nèi)陳繼明等用此法檢測(cè)了飼料、尿樣與臟器中克倫特羅含量,檢測(cè)范圍為15.6μg/ml～1.90ng/ml；回收率多在85%。該法中抗血清與腎上腺素和去甲腎上腺素?zé)o交叉反應(yīng)，僅對(duì)塞曼特羅和沙丁胺醇分別有10%和12.5%的交叉反應(yīng)。檢測(cè)結(jié)果有較好的穩(wěn)定性和較高的標(biāo)準(zhǔn)回歸曲線，與用HPLC檢測(cè)結(jié)果大體一致。另外孔科也用該法檢測(cè)了豬肝中克倫特羅殘留，檢測(cè)線性范圍0.13～5.3ng/ml，檢測(cè)限0.13ng/ml，回收率大于70%，變異系數(shù)小于20%,認(rèn)為該法是一種較簡(jiǎn)便可靠的快速檢測(cè)方法。
（2）放射免疫分析法(簡(jiǎn)稱放免法，RIA)
如利用14C標(biāo)記克倫特羅，連續(xù)飼喂豬7d，停藥后測(cè)定不同時(shí)間段總放射量和克倫特羅放射量，從而檢測(cè)豬可食性組織中克倫特羅及其衍生物殘留,總回收率為(94.2±6.5)%，0d停藥后肝、腎中總放射量均為286μg/kg，脂肪組織、骨骼肌中均為19μg/kg;7d停藥后肝中總放射量為15μg/kg，此時(shí)肝、肺中克倫特羅殘留量仍分別為歐盟最高允許殘留限量(0.5μg/kg)的4.6倍和2.4倍。放免法檢測(cè)克倫特羅殘留具有很好的特異性和高度靈敏度。但由于對(duì)條件要求比較苛刻且放射性同位素對(duì)工作人員有一定傷害，因而限制了該法的廣泛應(yīng)用。
（3）熒光免疫分析法(簡(jiǎn)稱熒免法，F(xiàn)IA)
熒免法同放免法相比，克服了放免法中的核輻射缺點(diǎn)。利用單抗技術(shù)與熒免分析技術(shù)檢測(cè)了克倫特羅在牛尿中的殘留,檢測(cè)線性范圍10~105pg，檢測(cè)限10pg。與色譜法相比，熒免法檢測(cè)藥物殘留具有特異性高，穩(wěn)定性好，對(duì)樣品處理要求比較簡(jiǎn)單及一次可檢測(cè)多個(gè)樣品等優(yōu)點(diǎn)。缺點(diǎn)是對(duì)溫度的強(qiáng)烈依賴性和熒光強(qiáng)度取決于激發(fā)波長(zhǎng)，因此在藥物分析方面應(yīng)用較少。
3.高效液相色譜法(HPLC)
高效液相色譜法具有專屬性好、選擇性高和靈敏性高等優(yōu)點(diǎn)，適合于微量克倫特羅檢測(cè)。楊珊瑛應(yīng)用反相離子對(duì)HPLC法測(cè)定情安喘定片中微量克倫特羅，線性范圍在4～26μg之間，r=0.9998，平均回收率達(dá)92.78%，RSD(n=5)為0.80%。
4.聯(lián)用技術(shù)分析法
（1）液相色譜-質(zhì)譜法(LC-MS)
（2）氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)
（3）高效液相色譜-酶聯(lián)免疫分析法(HPLC/EIA)
（4）免疫親和層析-酶免疫法(IAC-EIA)
（5）低溫捕獲氣相色譜-傅立葉轉(zhuǎn)換紅外分析法(CTGC-FTIR)
臨床上主要用于防治支氣管痙攣，人、畜支氣管哮喘和喘息型慢性支氣管炎，對(duì)神經(jīng)、骨骼、泌尿、生殖、呼吸等系統(tǒng)疾病的治療也能起到良好的效果，因此作為平喘藥在醫(yī)學(xué)應(yīng)用。
作為一種腎上腺類神經(jīng)興奮劑，克倫特羅對(duì)心臟起正性肌力作用，引起心臟收縮力增加，正常劑量毒副反應(yīng)輕微。而一次性大量服用，則會(huì)引起明顯的毒副反應(yīng)，β2受體廣泛分布于心臟、骨骼肌等部位，引起心動(dòng)過(guò)速、心律失常、血壓升高等，心電圖提示ST段下移和T波振幅下降，同時(shí)引起四肢、面頸部骨骼肌震顫，頭暈、惡心、嘔吐，甚至不能站立，嚴(yán)重者可發(fā)生室上性心動(dòng)過(guò)速和心房顫動(dòng)。大劑量的克倫特羅才具有增加肌肉體積的作用，食用含瘦肉精的肉制品后，很容易發(fā)生中毒癥狀，因?yàn)榭藗愄亓_的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，加熱到172℃才分解，而一般的烹煮加熱方法不能破壞其成分。
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