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紅盞花素又叫野黃芩苷，其植物來源有唇形科植物高黃芩的葉，黃芩的莖、葉以及半枝蓮全草等。臨床研究結(jié)果表明，野黃芩苷具有降低腦血管阻力，改善腦血循環(huán)、增加腦血流量及抗血小板凝集的作用，臨床用于腦血管病后癱瘓的治療。
一種新穎的純化野黃芩苷的純化方法，通過以下步驟實(shí)現(xiàn)：首先在一定溫度下，將野黃芩苷粗品放入到一定量的溶劑中，用堿溶液調(diào)pH，直至野黃芩苷全部溶解于溶液中；然后通過蒸發(fā)或降溫的方法析出結(jié)晶，過濾，洗滌，干燥，得到精制的野黃芩苷鹽的中間體；重新選 擇溶劑，將結(jié)晶狀中間體產(chǎn)品溶于其中，加入適當(dāng)?shù)乃嵝匀芤?，調(diào)節(jié)溶液的pH，使野黃芩苷鹽轉(zhuǎn)變?yōu)橐包S芩苷形式并從溶液中析出；再經(jīng)過濾、洗滌、干燥，得到野黃芩苷結(jié)晶。
具體步驟以下：
（1）在40~60℃下，將野黃芩苷粗品按重量體積比1:5~1:20g/mL加入溶劑溶液中，用質(zhì)量濃度為5~20%的堿溶液調(diào)pH至8.0~9.0，使野黃芩苷全部溶解，然后在4~10℃下放置結(jié)晶，經(jīng)36~48小時(shí)后，過濾，用水洗滌，干燥，得中間體野黃芩苷鈉鹽或鉀鹽的結(jié)晶；
（2）在10~35℃下，將野黃芩苷鈉鹽或鉀鹽的結(jié)晶，按重量體積比1:10~1:20g/mL加入到溶劑溶液中溶解，用質(zhì)量濃度為5~20%的堿溶液調(diào)pH至8.0~9.0使鹽全部溶解，再用質(zhì)量濃度為5~10%的酸溶液調(diào)pH至1.5~2.5，放置4~6小時(shí), 過濾，用水洗滌沉淀，干燥，得到純化的野黃芩苷結(jié)晶。
從黃芩莖葉中提取分離高純度野黃芩苷的方法，包括以下步驟：
(1)將50kg黃芩莖葉(野黃芩苷的含量大約為0.5kg)粉碎至10目至200目，得到黃 芩莖葉粗粉末；
(2)按重量比1:8向黃芩莖葉粉末中加入濃度為50％的乙醇，加熱至沸騰，提取2 次，每次1.5h，合并得到第一提取液；
(3)將上述第一提取液用濾布過濾后得到第一濾液，在溫度為60℃、壓力為 0.08MPa的條件下減壓濃縮，去除第一濾液中的乙醇，即得到不含乙醇的野黃芩苷濃縮液；
(4)將野黃芩苷濃縮液，用10％的碳酸鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至7，過濾，得第二濾液，棄去沉淀物；
(5)向第二濾液中加入10％的鹽酸溶液，調(diào)節(jié)pH值至1，靜置36h，析出棕色沉淀物，傾出上層溶液；
(6)將傾出的上層溶液繼續(xù)靜置18h，析出土黃色沉淀物；
(7)分別取棕色沉淀和土黃色沉淀物合并后過濾，濾餅先用蒸餾水，再用乙酸乙酯洗至中性，得到混合沉淀物，然后在50℃的低溫下干燥，即得到野黃芩苷粗品；
(8)向野黃芩苷粗品中加入20倍體積的濃度為95％的乙醇及野黃芩苷粗品重量的 1％的活性炭，加熱至沸騰，提取1h，得到第二提取液，將第二提取液過濾，得到第三濾液，將 第三濾液濃縮至原體積的80％，靜置使析出晶體，過濾，將所得晶體用濃度為45％的乙醇洗 滌5次，得野黃芩苷晶體；
(9)向上述野黃芩苷晶體中加入10倍體積的濃度為30％至50％的丙酮水溶液，搖勻，加入10％的鹽酸調(diào)節(jié)pH值為2，靜置后過濾，將沉淀物水洗至中性，干燥得到0.453kg高純度的野黃芩苷。
燈盞花素片是由菊科植物短葶飛蓬（燈盞細(xì)辛）Erigeron breviscapus(Vant.)Hand. -Mazz.提取物制成，主要成分為野黃芩苷（4′-羥基黃芩苷，又稱燈盞花乙素）和少 量的燈盞花甲素，具有散寒解表、活血化瘀、通絡(luò)止痛的功效，臨床上用于中風(fēng)后遺癥、冠心病、心絞痛等的治療。
一種測(cè)定燈盞花素片中野黃芩苷含量的方法，包括以下步驟：
（1）燈盞花素片供試品溶液的制備
取燈盞花素片，粉碎，取粉末20.0mg，精密稱定，置于2mL的量瓶中，加入 氘代二甲基亞砜溶解并定容至刻度，精密移取1mL上述溶液置于2mL的量瓶中，加入1mL濃度為0.1mg/mL的3-三甲基硅基丙酸鈉-d4的重水定容至刻度，混勻，14000rpm離心10分鐘，取上清液，作為燈盞花素片供試品溶液；
（2）燈盞花素片供試品溶液的1H-NMR檢測(cè)
取0.6mL步驟（1）所得的燈盞花素片供試品溶液，轉(zhuǎn)移至5mm核磁管中密封，將核磁管置于核磁共振儀中，按以下條件進(jìn)行1H-NMR檢測(cè)：抑水峰序列zgcppr，觀測(cè)頻率600.23MHz，測(cè)定溫度297.7K，譜寬12335.5Hz，90°脈沖寬度13μs，數(shù)據(jù)采樣點(diǎn)65536，掃描次數(shù)16次，延遲時(shí)間15s，接受增益203，得到燈盞花素片供試品溶液的1H-NMR譜圖；
（3）燈盞花素片供試品溶液中野黃芩苷的1H-NMR結(jié)構(gòu)解析及定量峰的選擇
根據(jù)燈盞花素片供試品溶液的1H-NMR譜圖，對(duì)其化學(xué)位移和耦合常數(shù)進(jìn)行歸屬，解析化合物為野黃芩苷，具體為δ7.93:2H,d,J=9Hz,H-2′,6′；δ6.98:3H,m,H-8, 3',5'；δ6.82:1H,s,H-3；δ5.22:1H,d,J=7.2Hz,H-1″；δ4.03:1H,d,J=9.6Hz,H-5″； 選取其中無干擾的質(zhì)子信號(hào)峰1H或2H或3H作為野黃芩苷的定量峰；或選取其中無干擾的質(zhì)子信號(hào)峰1H和2H，或1H和3H，或2H和3H作為野黃芩苷的定量峰；或同時(shí)選取其中無干擾的質(zhì)子信號(hào)峰1H、2H和3H作為野黃芩苷的定量峰，其中質(zhì)子信號(hào)峰1H、2H、3H的化學(xué)位移δ分別為6.82、7.93、6.98ppm；
（4）燈盞花素片中野黃芩苷的定量分析
按步驟（1）制備燈盞花素片供試品溶液，按步驟（2）進(jìn)行1H-NMR檢測(cè)，按步驟（3）所選定的定量峰采用內(nèi)標(biāo)法計(jì)算燈盞花素片中野黃芩苷的含量。
本測(cè)定燈盞花素片中野黃芩苷含量的方法，不僅具有簡(jiǎn)單快速、專屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好等特點(diǎn)，而且無需被測(cè)化合物的對(duì)照品即可實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確定量，可以彌補(bǔ)現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)和其他定量方法的不足，可應(yīng)用于燈盞花素片的質(zhì)量控制。
[1] CN201110143319.6 一種野黃芩苷的純化方法
[2] CN201710806480.4 一種從黃芩莖葉中提取分離高純度野黃芩苷的方法及野黃芩苷
[3] CN201410028292.X 一種測(cè)定燈盞花素片中野黃芩苷含量的方法